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《梅毒血清試驗(yàn)的臨床意義及血清固定分析》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、梅毒血清試驗(yàn)的臨床意義及血清固定分析四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所林昭春梅毒血清試驗(yàn)的分類梅毒血清試驗(yàn)根據(jù)所用抗原不同分為兩類非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)不需加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR)快速血漿反應(yīng)環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)及TRUST試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒螺旋體顆粒凝集法(TPPA)熒光密螺旋體抗體吸附試驗(yàn)(FTA-ABS)梅毒血清試驗(yàn)的適應(yīng)癥非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)適應(yīng)于常規(guī)檢查及大量人群篩選定量試驗(yàn)可監(jiān)視疾病活動情況和觀察治療效果,是否復(fù)發(fā)與再感染鑒別早期
2、梅毒與晚期潛伏梅毒,先天梅毒與被動反應(yīng)素血癥腦脊液作VDRL試驗(yàn),有助于神經(jīng)梅毒的診斷梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)該試驗(yàn)特異性強(qiáng),敏感性高,一般用來作證實(shí)試驗(yàn),不能作為療效觀察和隨訪指征梅毒血清試驗(yàn)的原理當(dāng)機(jī)體感染TP后,經(jīng)過一定潛伏期,在血清中產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗體(非特異性的反應(yīng)素)和抗密螺旋體抗體(特異性免疫球蛋白),主要是IgG抗體可以用各種免疫學(xué)的方法來檢測反應(yīng)素或抗體,協(xié)助梅毒的診斷性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)VDRL試驗(yàn)所用抗原是從牛心中提取心磷脂加上卵磷脂和膽固醇梅毒螺旋體在破壞組織的過程中,體內(nèi)釋放一種抗原
3、性心磷脂它刺激機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素,這種反應(yīng)素與牛心中提取的心磷脂在體外有抗原-抗體反應(yīng)待檢血清先滅活,試驗(yàn)時應(yīng)用已知陽性血清對照性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)定性結(jié)果判定:"-"陰性,僅見微小顆粒,液體渾濁"+"弱陽性,肉眼見小的塊狀物或者用放大鏡見到塊狀物,液體渾濁“+++”陽性,肉眼見大的或中等大的塊狀物VDRL玻片定量試驗(yàn):將待測血清用生理鹽水在小試管中作6個稀釋度,原倍血清、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32,每個稀釋度與0.5ml血清加于玻片圓圈中,按定性的方法測定和判斷結(jié)果。不需加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR)
4、該試驗(yàn)用改良的VDRL抗原稀釋后離心沉淀,于沉淀中加入EDTA(二胺四乙酸二鈉)氯化膽堿可起化學(xué)“滅活”作用,所以血清不必滅活抗原不必每天配制,在4~8℃冰箱中保存6個月定性結(jié)果判定“-”陰性,顆粒細(xì)小,分布均勻,無塊狀物“±”可疑,顆粒分布均勻,或細(xì)小的粗糙物“+”弱陽性,顯微鏡下見塊狀物,分布均勻“++”陽性,肉眼可見小塊狀物,在顯微鏡下見較大塊狀物“+++”強(qiáng)陽性,肉眼可見大的或較大塊狀物,溶液清亮定量試驗(yàn)同VDRL的定量法快速血漿反應(yīng)環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)原理與USR試驗(yàn)基本相同其優(yōu)點(diǎn)是RPR抗原中加入了活性碳顆粒,
5、試驗(yàn)在特制的白色紙卡上進(jìn)行容易判斷結(jié)果,肉眼即可觀察,不需顯微鏡,血漿也可進(jìn)行檢測快速血漿反應(yīng)環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)定性結(jié)果判定"-"陰性,無顆粒凝集,或僅見粗糙炭顆粒聚集中央"+"弱陽性,可見散在小的黑色凝集塊“++、+++”陽性,可見中等或大的黑色凝集塊,溶液清亮定量試驗(yàn)方法同VDRL定量法如果效價高于1:32,應(yīng)測定1:64,1:128,1:256稀釋度,以最高稀釋度出現(xiàn)的陽性作為效價非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的注意事項(xiàng)試驗(yàn)應(yīng)在23~29℃室溫進(jìn)行,氣溫過低或過高都影響其結(jié)果。出現(xiàn)弱陽性或可疑者,應(yīng)重做。試劑及待檢血清
6、從冰箱取出必須在23~29℃處放置30min后,再做試驗(yàn)。定性試驗(yàn)陽性都必須做定量試驗(yàn),陽性者需了解抗體效價的高低,以便監(jiān)視疾病活動情況和觀察療效。定量試驗(yàn)還可排除"前帶現(xiàn)象"。梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)以梅毒螺旋體為抗原的間接血球凝集試驗(yàn)抗原為經(jīng)超聲波處理Nichol梅毒螺旋體的提取物為可溶性抗原,再致敏經(jīng)醛化和鞣酸處理的綿羊紅細(xì)胞,稱為致敏血球待檢血清用吸附劑處理,可除去非特異性螺旋體抗體對照用非致敏血球及陽性血清梅毒螺旋體顆粒凝集法(TPPA)日本富士公司取代TPHA的新產(chǎn)品可用于梅毒的任何階段,檢測抗梅毒螺
7、旋體的被動顆粒凝集試驗(yàn)它能檢測血清樣品中的梅毒螺旋體抗體其特點(diǎn)操作簡單,血清血漿均可檢測,特異性強(qiáng),敏感性高梅毒螺旋體顆粒凝集法(TPPA)結(jié)果判定:"-"陰性,顆粒集中在中央呈鈕扣狀,外緣圓而平滑,標(biāo)本血清與致敏顆粒無反應(yīng)。"±"可疑,顆粒聚集成致密的環(huán)狀,外緣圓而平滑,標(biāo)本血清與未致敏顆粒反應(yīng)陰性,與致敏顆粒反應(yīng)介于與陰性之間,此時,需作定量試驗(yàn)或用FTA-ABS法。"+"陽性,顆粒形成大的環(huán),外緣粗糙,外周有凝集現(xiàn)象,或凝集顆粒均勻地覆蓋孔底。熒光密螺旋體抗體吸附試驗(yàn)(FTA-ABS)該試驗(yàn)在國外被認(rèn)為是權(quán)威性的方法
8、用間接免疫熒光技術(shù)檢測血清中的抗梅毒螺旋體IgG抗體此試驗(yàn)敏感性高,特異性強(qiáng)熒光密螺旋體抗體吸附試驗(yàn)(FTA-ABS)結(jié)果判定:"-"陰性,見微弱或無熒光的螺旋體。"+"可疑,見較弱的熒光螺旋體。"++、+++"陽性,見強(qiáng)的或中等度的熒光螺旋體。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的注