不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因差異表達(dá)比較分析

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1、洲Y1㈣9洲3Ⅲ2圳洲7,Ⅲ0Ⅲ7Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationDifferentialExpressionofResistance--relatedGenestoXcc(Xanthomonascampestrispv.campestris)inDifferentRadish(RaphanussativusL.)GermplasmMs.Candidate:WangShaoweiAdvisor:ProfessorLiXixiangMajor:VegetableScienceSpecialty:Veget

2、ableGeneticResourcesChineseAcademyofAgriculturalSciencesJune2011獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致詡}(cāng)的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,也不包含為獲得中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名:時(shí)間:沙忙6日

3、c》B關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送

4、交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容?!銊艂鲬懀厚Z年歷伊導(dǎo)師簽名:時(shí)間:三切1年6月幻日碩士學(xué)位論文評(píng)閱人、答辯委員會(huì)簽名表論文題目不同蘿b抗源抗黑腐病相關(guān)基因差異表達(dá)比較研究論文作者王少偉專業(yè)蔬菜學(xué)研究方向蔬菜種質(zhì)資源指導(dǎo)教師李錫香研究員培養(yǎng)單位(研究所)蔬采化卉研究所碩(博)導(dǎo)蔣衛(wèi)杰碩導(dǎo)口中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬蔬菜學(xué)\姓名職稱單位專業(yè)簽名師評(píng)研究員菜花卉研究所博導(dǎo)囤閱吳才君教授碩導(dǎo)口江西農(nóng)業(yè)大學(xué)疏采芋\\博導(dǎo)囹農(nóng)學(xué)院旌口辯碩導(dǎo)口北京市農(nóng)林科學(xué)院門張風(fēng)

5、蘭研究員蔬菜學(xué)主博導(dǎo)囹蔬菜研究中心獄唇(\乙席磁碩導(dǎo)口生物化學(xué)與分肖興國(guó)教授博導(dǎo)囹中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)子生物學(xué)∥f艘硪碩導(dǎo)口范雙喜教授北京農(nóng)學(xué)院蔬菜學(xué)博導(dǎo)囹?qū)O日飛研究員博導(dǎo)囹蔬菜學(xué)蝴猻9碩導(dǎo)口中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所碩導(dǎo)口中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬馮東昕研究員植物病理博導(dǎo)囹菜花卉研究所劉玉。乏摻研究員博導(dǎo)囹菜花卉研究所疏采字釩’碩導(dǎo)口中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬劉富中研究員碩導(dǎo)囹中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬蔬菜學(xué)繃幼博導(dǎo)口菜花卉研究所’∥f會(huì)議記錄(秘書)徐東輝、l論文答辯時(shí)間地點(diǎn)2011年6月17日14:00蔬菜花卉研究所綜合樓202會(huì)議室摘要黑腐病是嚴(yán)重影響十字花科蔬菜生產(chǎn)的世界性細(xì)菌病害。為了篩選蘿卜黑腐病抗源和挖掘抗

6、病優(yōu)異基因,本文采用三種不同的鑒定方法對(duì)籮I-種質(zhì)資源進(jìn)行了鑒定,并采用DDRT-PCR和cDNA.AFLP對(duì)不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因表達(dá)進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:1.對(duì)40份初選蘿卜種質(zhì)分別接種Xcc8004和XccBJ兩個(gè)菌株,進(jìn)行黑腐病苗期抗性鑒定;對(duì)其中的8份代表性蘿卜種質(zhì)采用肉質(zhì)根切片接種Xcc8004進(jìn)行抗性鑒定;對(duì)其中的27份蘿卜種質(zhì)接種8個(gè)含有效應(yīng)物基因的農(nóng)桿菌,進(jìn)行過(guò)敏反應(yīng)鑒定。結(jié)果表明:不同蘿卜種質(zhì)苗期對(duì)黑腐病的抗性存在顯著差異,篩選出對(duì)Xcc8004表現(xiàn)高抗的材料3份,對(duì)XccBJ表現(xiàn)高抗的材料1份。蘿卜苗期不同材料對(duì)Xcc8004和XccBJ的抗性表現(xiàn)極顯

7、著相關(guān),蘿卜苗期和肉質(zhì)根對(duì)Xcc8004的抗病性極顯著相關(guān)。穩(wěn)定可靠抗病資源的獲得為蘿卜抗病育種和抗病機(jī)理深入研究提供了基礎(chǔ)材料。篩選出17份對(duì)不同效席物表現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)的蘿卜種質(zhì)。不同抗源對(duì)不同效應(yīng)物的過(guò)敏反應(yīng)程度有所不同。2.利用cDNA.AFLP技術(shù),研究了4份蘿卜抗病材料KB09.1、KB09.12、KB09—17、KB09—16和1份感病材料KB09.29接種和未接種黑腐菌Xcc8004的基因差異表達(dá)。256對(duì)引物組合在參試材料中擴(kuò)增出790個(gè)差異表達(dá)條帶。克隆得到的74個(gè)差異片段按其功能分為8類。在多份蘿I-種質(zhì)中都涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)代謝、光合作用、抗病防御及轉(zhuǎn)運(yùn)等序列的差異表

8、達(dá)。不同蘿I-抗源表達(dá)的抗性相關(guān)基岡不完全相同。3.對(duì)高抗黑腐病蘿卜種質(zhì)KB09—12分別接種效應(yīng)物xopXccN和xopXccX2,利用cDNA.AFLP方法獲得153個(gè)差異表達(dá)條帶。25個(gè)測(cè)序條帶分析表明,接種xopXccN和xopXccX2公共差異表達(dá)條帶主要涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和抗病防御,接種xopXccN的特異差異表達(dá)條帶主要涉及光合作用,接種xopXccX2的特異表達(dá)差異條帶主要涉及蛋白質(zhì)合成、加工。比較KB09.12接種效應(yīng)物

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