岷江百合抗逆相關基因的克隆及表達分析

岷江百合抗逆相關基因的克隆及表達分析

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1、密級:論文編號:中囯農他科學院學位論文岷江百合抗逆相關基因的克隆及表達分析CloningandExpressionAnalysisofStress-ResistantGenesfromLiliumregaleWilson碩士研究生:袁迎迎指導教師:明軍研究員申請學位類別:農學碩士專業(yè):觀賞園藝研究方向:觀賞植物種質資源與遺傳育種培養(yǎng)單位:蔬菜花卉研究所研究生院提交日期2015年5月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文

2、中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中國農業(yè)科學院或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:%A^時間:年玄月#曰關于論文使用授權的聲明本人完全了解中國農業(yè)科學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定,即:中國農業(yè)科學院有權保留送交論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意中國農業(yè)科學院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。研究生

3、簽名:表時間:年上月w日導師簽名:時間年上月認日中國農業(yè)科學院碩士學位論文評閱人、答辯委員會簽名表論文題目岷江百合抗逆相關基因的克隆及表達分析觀賞植物種質資源論文作者袁迎迎專業(yè)觀賞園藝研宄方向與遺傳育種指導教師明軍培養(yǎng)單位(研宄所、中心)蔬菜花卉研宄所姓名職稱單位專業(yè)簽名碩導口評博導口閱碩導口人博導口答辯碩導口中國林業(yè)科學研宄孫振元園林植物與觀賞園藝〃主席博導口院林業(yè)研究所碩導口北京林業(yè)大學->高亦珂觀賞園藝%.?博導口園林學院7?亦碩導口南京林業(yè)大學廣王良桂植物栽培與應用Afi博導口風景園林學院碩導口中國農業(yè)

4、科學院張忠華博導口生物信息學爾蔬菜花卉研究所辯碩導口中國林業(yè)科學研宄鄭勇奇林木遺傳肓種博導口院林業(yè)研究所i委卜碩導口博導口員碩導口博導口碩導口博導口會議記錄(秘書)福、魯疇論文答辯時間地點2015年5月25日,農科院蔬菜所綜合樓202會議室密級:論文編號:中國農業(yè)科學院學位論文岷江百合抗逆相關基因的克隆及表達分析CloningandExpressionAnalysisofStress-ResistantGenesfromLiliumregaleWilson碩士研究生:袁迎迎指導教師:明軍研究員申請學位類別:農學

5、碩士專業(yè):觀賞園藝研究方向:觀賞植物種質資源與遺傳育種培養(yǎng)單位:蔬菜花卉研究所研究生院提交日期2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationCloningandExpressionAnalysisofStress-ResistantGenesfromLiliumregaleWilsonMs.Candidate:YuanYingyingAdvisor:MingJunMajor:OrnamentalHorticultureSpec

6、ialty:OrnamentalPlantGermplasmResourcesandGeneticBreedingMay2015摘要岷江百合(LiliumregaleWilson)為百合科(Liliaceae)百合屬(LiliumL.)植物,原產于中國四川岷江流域,因其具有較強的耐鹽堿、低溫和抗病毒的能力而作為重要的育種材料。本研究以岷江百合為試驗材料,在已經構建的岷江百合cDNA文庫的基礎上篩選克隆與非生物脅迫相關的功能基因,并且研究它們在非生物脅迫下的表達模式,為有效挖掘和利用岷江百合的抗性優(yōu)良基因提供參考

7、。試驗采用cDNA文庫和RACE技術,在本實驗室已經克隆了岷江百合蛋白激酶基因lilyABC1的基礎上,從岷江百合成熟的葉片中克隆獲得百合調節(jié)蛋白lily14-3-3基因和轉運蛋白lilyWBC-ABC基因的全長,并做了生物信息學的分析。結合實時熒光定量(qRT-PCR)的方法研究了以上三個基因在高鹽、低溫、高溫、黑暗、模擬干旱5種非生物脅迫下的表達模式,本研究獲得的主要結果如下:1.lilyABC1基因對高鹽、低溫、高溫、黑暗脅迫均有響應,但表達模式卻有所不同:在高鹽、低溫脅迫1h即達到表達最高峰隨后略有下降

8、;黑暗處理也在1h時達到表達高峰,但3h以后的表達量持續(xù)降低,12h時已顯著低于對照;高溫處理6h達到表達最高峰,而后逐漸降低,lilyABC1基因不受干旱脅迫的誘導表達。該基因對各種非生物脅迫的敏感性也不相同,對5種非生物脅迫的敏感性次序為:低溫>黑暗>高溫>高鹽>干旱。2.獲得了調節(jié)蛋白lily14-3-3基因的全長為1111bp的cDNA序列,生物信息學分析結果顯示,該基因編碼2

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