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《結(jié)核桿菌esat-6抗原多表位dna疫苗的制備及其免疫效果的初步研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文英文縮略詞表英文縮略詞英文全稱中文名稱AmpAmpicillin氨芐青霉素BCGBacillusCalmetteGuerin卡介苗bpbasepair礴，趙蟪ConAConcanavalinA刀豆蛋白ADCDendriticCell樹(shù)突狀細(xì)胞DM匣MDulbecco’SmodifiedEagle’SMediumDMEM培養(yǎng)基DMSOdirnethylsulfoxide二甲亞砜dNTPdeoxythymidinetriphosphate三磷酸脫氧核苷EBethidiumbromide溴化乙碇EDTAethylened
2、iaminetetraceticacid乙二胺四乙酸ELISAenzyme—linked酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)immunosorbentassayESAT-66kdearlysecrecyantigenictarget6kd早期分泌蛋白FBSfetalbovineseriunl胎牛血清FLfms—liketyrosine1【inase3ligandFlt3配體GFPgreenfluorescenceprotein綠色熒光蛋白GMCsglomerularmesangialcells腎小球系膜細(xì)胞腳horseradishpemxidaSe辣根過(guò)氧化
3、物酶ODopticaldensity光密度PBSphosphatebufferedsaline磷酸緩沖液PCRpolymerasechainreaction多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)rpmrevolutionsperminute每分鐘轉(zhuǎn)速RPMll640RooseveltparkmediumRPMll640培養(yǎng)基TAETris／acetate／EDTA(bafter)"Iris／醋酣EDTA緩沖液南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文結(jié)挖j王菌墾§△!二魚(yú)壘麥僮旦叢瘞苴的劍備丞墓魚(yú)瘞夔墨的硒究是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。
4、論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均在論文中作了明確的聲明并表示了謝意。專業(yè)：魚(yú)瘞堂作者簽名：隘：霞．日期：2避．厶。!三論文使用授權(quán)聲明本人完全了解南京醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定。作者簽名：酶．霞導(dǎo)師簽名：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要第一部分結(jié)核桿菌ESAT-6抗原多表位I)NA疫
5、苗的構(gòu)建與體外表達(dá)的鑒定目的：構(gòu)建含3個(gè)結(jié)核桿菌ESAT-6抗原T細(xì)胞表位及Flt3配體基因的重組質(zhì)粒，并使其在大鼠腎小球系膜細(xì)胞(aMCs)中表達(dá)。方法：用計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測(cè)結(jié)核桿菌ESAT-6抗原的T細(xì)胞表位譜，選取3個(gè)T細(xì)胞表位，并以Ala．Ala-Tyr(AAV)序列作為接頭，合成全基因序列，定向克隆入真核雙表達(dá)載體pIRES及質(zhì)粒pIRES—FL。在酶切分析與序列測(cè)定后，用PEI轉(zhuǎn)染至GMCs細(xì)胞，并行Westernblot鑒定其體外表達(dá)。結(jié)果：核酸序列測(cè)定證實(shí)重組質(zhì)粒構(gòu)建正確，Westemblot證實(shí)該重組質(zhì)粒能在體外GMCs細(xì)胞
6、中表達(dá)融合蛋白。結(jié)論：成功構(gòu)建了結(jié)核桿菌ESAT-6抗原多表位基因重組質(zhì)粒。關(guān)鍵詞：結(jié)核桿菌；ESAT-6；T細(xì)胞表位；DNA疫苗南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文第二部分結(jié)核桿菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗誘導(dǎo)C57BL／6小鼠免疫應(yīng)答的初步研究目的：研究結(jié)核桿菌ESAT-6抗原多表位基因及FL胞外段共表達(dá)質(zhì)粒對(duì)小鼠的免疫功能的影響。方法：將plRES-TH、pIRES—TH—FL重組質(zhì)粒免疫小鼠，檢測(cè)小鼠體內(nèi)特異性淋巴細(xì)胞增殖、Thl與Th2型細(xì)胞因子(IFN吖、IL．2、IL．4、IL．10)分泌以及小鼠血清ESAT-6特異性IgG2a、
7、IgGl型抗體的水平。結(jié)果：經(jīng)plRES—TH質(zhì)粒免疫的小鼠Thl型應(yīng)答水平上調(diào)，Th2型應(yīng)答水平下降。聯(lián)合FL基因的plRES．TH．FL重組DNA疫苗免疫效果高于單純ESAT-6表位的DNA疫苗。結(jié)論：結(jié)核桿菌ESAT-6表位及FL胞外段共表達(dá)質(zhì)粒能夠提高小鼠體內(nèi)的細(xì)胞免疫功能。關(guān)鍵詞：結(jié)核桿菌；ESAT-6表位；FL；DNA疫苗；細(xì)胞免疫3南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文ABSTRACTConstructionandexpressionofmultiepitopeDNAvaccineonESAT-6antigenofMycobacteriu
8、mtuberculosisinvitroObjective：Toconstructrecombinantplasmidscontaining3TcellepitopesonESAT-6anti
