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《醫(yī)學畢業(yè)論文細胞膜表達的hlag誘導免疫耐受性樹突狀細胞的產(chǎn)生》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、XX大學畢業(yè)論文細胞膜表達的HLAG誘導免疫耐受性樹突狀細胞的產(chǎn)生姓名：2014年6月25日作者：周浩黎緯明張敏劉崢喋鄒萍【摘要】為了探討體外誘導免疫耐受性樹突狀細胞(dendriticcell,DC)產(chǎn)生的方法及其機制，利用人HLAG1真核表達載體轉染K562細胞并與DC共培養(yǎng)后，用流式細胞術檢測DC表面CD80、CD86、ILT3和ILT4分子表達情況,同時采用氟胸腺密定核昔(3HTdR)摻入法檢測DC對T細胞功能的影響。結果表明，膜表達的HLAG1分子與樹突狀細胞作用后，DC表而免疫共刺激分子CD80、CD86表達下調，而抑制性分子I
2、LT3、ILT4表達上調。HLAG1作用后DC異基因抗原誘導淋巴細胞增殖的活性明顯下降。結論：HLAG1分子可以在體外條件下，下調DC表面免疫共刺激分子水平，促進ILT3、ILT4表達,誘導免疫耐受性樹突狀細胞產(chǎn)生?！娟P鍵詞】樹突狀細胞；HLAG；T淋巴細胞；免疫耐受InductionofTolerogenicDendriticCellsbyMembraneBoundHLAGAbstractInordertostudyhowtoinducetolerogenicdendriticcellsinvitroanditsmechanism,the
3、K562cellstransducedwithHLAGconstructwereusedtococulturewithDC.Thentheirrelatedimmunologicalchanges,suchasmembranemoleculesCD80,CD86,ILT3andILT4expressionlevelsweredetectedbyflowcytometry.Allogeneicproliferationofperipheralbloodmononuclearcells(PBMNC)wasdetectedbymixedlymph
4、ocytereaction.TheresultsshowedthatCD80andCD86expressionsonDCweredownregulated,whileILT3andILT4expressionswereupregulatedaftercoculturingwithK562HLAGcells.TheDCswerelessabletostimulatetheallogenicPBMNC.ItisconcludedthatthemembraneboundHLAGcanupregulateexpressionofinhibitory
5、receptorsILT3andILT4,inducingtolerogenicDCinvitro,whichmayprovideanovelstrategyfortransplanttoleranceinduction.Keywordsdendriticcell;HLAG;Tlymphocyte;immunetolerance移植排斥所導致的移植物抗宿主病(GVHD)是骨髓移植領域的難題。R前臨床免疫抑制劑的應用雖然可以顯著降低急性GVHD的發(fā)生，但是慢性GVHD損害的發(fā)生仍然難以克服。誘導受者外周免疫耐受被認為可能成為解決移植后慢性GV
6、HD的有效途徑［1］。樹突狀細胞(dendriticcell,DC)是體內功能最強的專業(yè)性抗原呈遞細胞，是活化初始CD4+T細胞最有效的抗原呈遞細胞。近年來，人們逐漸認識到DC在外周免疫耐受中的作用，并尋找誘導免疫耐受性樹突狀細胞產(chǎn)生的有效途徑［2］。免疫耐受性樹突狀細胞膜上高表達ILT3和ILT4分子，它們的可能配體是HLAG［3］。研究發(fā)現(xiàn)，HLAG促進心臟移植后的外周免疫耐受狀態(tài)的產(chǎn)牛，其機制可能與誘導樹突狀細胞耐受有關［4］0木實驗希望通過對HLAG誘導DC免疫耐受的機制的研究，探討誘導免疫耐受性DC產(chǎn)生的新的有效方法。材料和方法主
7、要試劑、細胞株及HLAG1真核表達質粒RPMI1640培養(yǎng)液、DMEM培養(yǎng)液、G418、TRIZOL—步法提取RNA試劑及逆轉錄試劑盒均購于Gibco公司，Lipofectamine2000脂質體轉染試劑盒購于Invitrogen公司，小牛血清購于杭州四季青公司。慢性粒細胞白血病細胞株K562、絨毛膜癌細胞株JEG3細胞來源于ATCC,培養(yǎng)于含15%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中。包括人HLAG1全長cDNA的真核表達質粒由CaroleOber博士惠贈。K562細胞的轉染及藥物篩選脂質體介導的真核細胞轉染技術參照Lipofcctamin
8、c2000脂質體轉染試劑盒說明進行。轉染細胞在800
9、ig/ml濃度G418條件下篩選穩(wěn)定株。穩(wěn)定轉染細胞株表示為K562HLAG1,轉染空載體的細胞株表示為K562RSV?？贵w
