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1、受精液種類(lèi)、卵丘細(xì)胞及卵巢保存溫度對(duì)奶牛體外受精效果的影響 摘要：為了提高奶牛體外受精效果，研究了體外成熟卵母細(xì)胞在IVF-100、BO和TALP三種體外受精液中的受精效果，同時(shí)比較了裸卵（NOs）與卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體（COCs）對(duì)受精效果的影響，卵巢的不同保存溫度對(duì)卵母細(xì)胞受精效果的影響。結(jié)果顯示，體外成熟卵母細(xì)胞在受精液IVF-100中的卵裂率顯著高于BO液的（P0.05）；裸卵（NOs）的卵裂率低于卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體（COCs），但差異不顯著（P>0.05）；NOs的囊胚率極顯著低于COCs的（P0.05）?！ ￡P(guān)
2、鍵詞：奶牛；卵母細(xì)胞；卵裂率；囊胚率 中圖分類(lèi)號(hào)：S858.23文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.07.007 AgriculturalUniversity，Zhengzhou，Henan450002，China；3.No.11Farm，TianjinJialiheHusbandryCorporation，Tianjin300273，China；4.ShanghaiPublicHealthClinicalCenterAffiliatedtoFudanUniversit
3、y，Shanghai201508，China；5.XiayingAnimalSciencesandVeterinaryMedicineStationofJixianCounty，Tianjin300193，China；6.AnimalHealthSupervisionandInspectionInstituteofJixianCounty，Tianjin301900，China） Abstract：Inordertoimprovetheeffectoffertilizationin10vitroofcows，thisst
4、udycomparedtheeffectoffertilizationamongtheIVF-100，BOandTALPsolution.Meanwhile，thistestcomparedtheeffectoffertilizationbetweenNOsandCOCs，andthetrailexploredthedifferenceofeffectoffertilizationondifferenttemperatureforovaries.Theresultsshowedthattherateofcleavageso
5、ftheoocytesinIVF-100wassignificantlyhigherthanthatinBO（P0.05）.TherateofcleavagesofNOswaslowerthanthatofCOCs，whiletherewasnosignificantdifference（P>0.05），buttheNOs’rateofblastocystwasextremesignificantlylowerthanthatofCOCs（P0.05）. Keywords：cows；oocytes；cleavagerat
6、e；blastocystrate 隨著配子與胚胎生物技術(shù)的研究與應(yīng)用，對(duì)胚胎的需求量越來(lái)越大。超數(shù)排卵和胚胎移植的合理化應(yīng)用雖能成倍提高優(yōu)良母畜的繁殖率，但所獲得的胚胎數(shù)量有限。為了解決這個(gè)問(wèn)題，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)奶牛卵母細(xì)胞體外受精技術(shù)進(jìn)行了大量的研究。保國(guó)俊、Ginther等[1-2]通過(guò)IVF技術(shù)可提供數(shù)量更多、成本更低的胚胎，體外受精技術(shù)是對(duì)優(yōu)良公、母畜的綜合充分利用。近年來(lái)，牛體外受精技術(shù)（Invitrofertilifation，IVF）取得了較大進(jìn)展，已成為可在實(shí)驗(yàn)室條件下生產(chǎn)大量廉價(jià)胚胎的實(shí)用技術(shù)，將為胚胎移
7、植提供重要的胚胎來(lái)源。牛體外受精技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)。但由于體外受精技術(shù)操作環(huán)節(jié)復(fù)雜，操作過(guò)程涉及因素較多以及卵母細(xì)胞對(duì)體外生存環(huán)境要求較高，使得試驗(yàn)體系不穩(wěn)定，進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[3]。10 本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)比不同受精液對(duì)卵母細(xì)胞體外受精效果影響的研究，分析了不同形態(tài)的卵子和卵巢運(yùn)輸保存溫度對(duì)奶牛成熟卵母細(xì)胞體外受精能力的影響，皆在為優(yōu)化奶牛體外受精技術(shù)奠定基礎(chǔ)?！ ?材料和方法 試驗(yàn)中所用的化學(xué)試劑除特別說(shuō)明外，均購(gòu)自Sigma公司?！ ?.1卵巢的采集與保存 奶牛卵巢采集自河北省大廠個(gè)體屠宰場(chǎng)。屠宰后立即采集
8、卵巢并除去多余的脂肪組織，然后用加有雙抗的生理鹽水沖洗5～6次，保存在盛有10或37℃、加有雙抗的滅菌生理鹽水中，于2～3h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室?！ ?.2卵母細(xì)胞的采集 用無(wú)菌紗布將卵巢表面擦干，抽吸法吸取直徑2～8mm的卵泡，抽吸液注入培養(yǎng)皿中，根據(jù)試驗(yàn)不同的需求挑選裸卵及具有一層以上完整卵丘細(xì)胞的卵丘-
