蒙古黃芪愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生

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1、蒙古黃芪愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生  摘要:以蒙古黃芪[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]種子萌發(fā)后的上胚軸、下胚軸和子葉為材料,采用MS培養(yǎng)基附加不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑進行愈傷組織的誘導(dǎo),并誘導(dǎo)不定芽的發(fā)生,生根后得到完整的再生植株。在該過程中,采用正交試驗分析6-BA、NAA、2,4-D、固化劑等條件對蒙古黃芪愈傷組織誘導(dǎo)和不定芽分化的影響。結(jié)果表明,下胚軸為誘導(dǎo)愈傷組織的最佳外植體取材部位,最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-

2、BA+0.2mg/L2,4-D,最佳的不定芽分化培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,而固化劑采用0.1%Gelrite為最佳。  關(guān)鍵詞:蒙古黃芪[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao];愈傷組織;植株再生;正交試驗  中圖分類號:S567.23文獻標(biāo)識碼:A文章編號:0439-8114(2016)19-5091-04  DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.19.050  Abs

3、tract:Withtheepicotyls,hypocotylsandcotyledonsfromseedgerminationofAstragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiaoasexplants,MSmediumplusdifferentconcentrationsofplantgrowthregulatorswasusedtocallusinducementandadventitiousbudsgenerationforplantregenera

4、tion.4Inthisprocess,orthogonalexperimentwereusedtoanalysistheimpactof6-BA,NAA,2,4-DandcuringagenttocallusinducementandadventitiousbudsdifferenciationofAstragalusmembranaceus.Theresultsshowedthathypocotylwasthebestsiteforexplantcallusinducement.Theoptimalmediumforcal

5、lusinducementwasMS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-DandforadventitiousbudsdifferenciationwasMS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA.Theoptimalcuringagentwas0.1%Gelrite.  Keywords:Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao;callus;plantregeneration;orthogonalexperiment  蒙古

6、黃芪[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]是豆科(Fabaceae)黃芪屬(Astragalus)植物,是中國重要的傳統(tǒng)中藥材,其藥用歷史悠久,被譽為“補藥之長”4,產(chǎn)于黑龍江、內(nèi)蒙古、河北及山西等地區(qū),生于向陽草坡或山坡上。近年來,國內(nèi)外學(xué)者對黃芪的藥用成分、藥理作用等進行了廣泛的研究。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,黃芪中的有效藥用成分主要為多糖、皂苷、黃酮、蛋白質(zhì)、生物堿等物質(zhì)[1,2],具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗血栓形成、抗衰老、抗病毒、抗風(fēng)濕、免疫調(diào)節(jié)等

7、多種藥理作用[3,4]。隨著對黃芪藥理作用研究的不斷深入及其藥用范圍的不斷拓寬,對其需求量也越來越大。傳統(tǒng)上,商品黃芪以野生為主,但由于長期過度采挖,致使野生黃芪資源幾近枯竭。同時,在黃芪的人工栽培中,存在種質(zhì)退化、混雜等現(xiàn)象,以及黃芪根腐病、白粉病等病害、蟲害、鼠害等[5],使黃芪產(chǎn)量和質(zhì)量均有所下降,嚴重影響該中藥材的持續(xù)發(fā)展。因此,如何擴大黃芪的產(chǎn)量和質(zhì)量滿足國內(nèi)外對其的需求是目前亟待解決的問題。本試驗利用組織培養(yǎng)方法,誘導(dǎo)蒙古黃芪的愈傷組織,并進行不定芽的增殖,以達到快速繁殖的目的,為蒙古黃芪的種質(zhì)利用和品種改良提供基

8、礎(chǔ)?! ?材料與方法  1.1材料  供試材料為蒙古黃芪種子,購自甘肅隴西。選取顆粒飽滿的種子,在無菌條件下用75%乙醇消毒30s,消毒過程中用手輕輕搓洗,隨即放入2%次氯酸鈉溶液處理20min,無菌水漂洗4次,接種于MS基本培養(yǎng)基上萌發(fā)。萌發(fā)后,取子葉、下胚軸和莖段作為外植

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