芝麻愈傷組織誘導(dǎo)與植株再生體系的建立.pdf

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1、植物學(xué)報ChineseBulletinofBotany2012，47(2)：162-170，fww．chinbullboIanc0mdoi：10．3724／SP．J．1259．2012．00162·技術(shù)方法·芝麻愈傷組織誘導(dǎo)與植株再生體系的建立苗紅梅，琚銘，魏利斌，馬琴，張海洋河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院河南省芝麻研究中心，鄭州450002摘要以芝麻栽培；~(Sesamumindicum，2n=26)、野生種(S．radiatum，2n=64；S．schinzianum，2n=64)及其遠(yuǎn)源雜交后代(S．schinzianumxS．indicum)

2、為材料，研究了不同基因型、外植體類型、激素種類及其濃度對芝麻愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生的影響，建立了芝麻愈傷組織誘導(dǎo)及高頻植株再生的技術(shù)體系。結(jié)果表明，6-BA／NAA激素組合有利于綠色緊密型愈傷組織的形成及分化：最佳愈傷組織誘導(dǎo)及分化培養(yǎng)基為MS+0．1mg-L～NAA4-2．0mg·L_。6-BA+30g-L-。蔗糖。在該培養(yǎng)條件下．野生種下胚軸愈傷組織的誘導(dǎo)率最高為97．50％，分化率為94．02％：栽培種下胚軸愈傷組織的誘導(dǎo)率最高為40．60％，分化率為8．16％：遠(yuǎn)緣雜交后代幼胚外植體愈傷組織的誘導(dǎo)率最高為46．67％，分化率為8

3、9．29％。該研究結(jié)果為芝麻轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系的建立及新種質(zhì)創(chuàng)制奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞愈傷組織，基因型，誘導(dǎo)，再生，芝麻苗紅梅，琚銘，魏利斌，馬琴，張海洋(2012)．芝麻愈傷組織誘導(dǎo)與植株再生體系的建立．植物學(xué)報47，162—170芝麻隸屬胡麻科胡麻屬，是世界上最古老的油料等，1997)，但實驗結(jié)果重復(fù)性差，愈傷組織植株再生作物之一。我國芝麻的種植面積約為8．0×10。hm，年頻率極低。另外，生長調(diào)節(jié)劑的組合及濃度配比等方總產(chǎn)量約7．5×10。t，位居世界第1，在國際油料貿(mào)易面各研究報道差異較大，芝麻再生技術(shù)體系仍處于探中具重要地位。芝麻種子

4、含油量一般介于35％一63％索階段(孫建和張秀榮，2009)，尚不能用于轉(zhuǎn)基因研之間，油酸／亞油酸的比例約為1：1，是人類最理想的究。鑒于此，本研究以芝麻栽培?~p(Sesamumindicum，食用油脂。此外，芝麻種子中還含有芝麻酚、芝麻素2n=26)、野生種(S．radiatum，2n=64；S．schinzia—和VE等天然抗氧化類物質(zhì)及其次生代謝物，在降血n￡，m，2n=64)4~1：1遠(yuǎn)源雜交后代(S．schinz~numXS．脂、抗菌防癌和延緩人體衰老等醫(yī)療保健方面具有重indicum)等1O個基因型的不同外植體為材料，設(shè)計

5、了要的功效(Rameta1．，1990)。目前，芝麻生產(chǎn)中存在不同的激素組合，篩選出適宜芝麻愈傷組織誘導(dǎo)及再的主要問題為品種抗病抗逆能力差、產(chǎn)量低且不穩(wěn)生的基因型、外植體類型、培養(yǎng)基類型及激素組合配方，定。因此，通過現(xiàn)代生物技術(shù)手段創(chuàng)制芝麻抗病抗逆建立了芝麻愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生技術(shù)體系，為芝新種質(zhì)并提高其產(chǎn)量一直是芝麻遺傳育種研究的重麻轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系建立及新種質(zhì)創(chuàng)制奠定了基礎(chǔ)。要任務(wù)之一。白20世紀(jì)80年代以來，國內(nèi)外學(xué)者對芝麻愈傷1植物材料組織誘導(dǎo)及植株再生技術(shù)體系開展了大量研究(劉埔，本研究所有實驗材料均由河南省芝麻研究中心提供。

6、1986；劉淑蘭等，1994；瞿禎等，1994；李明軍等，所用的芝麻不同基因型及外植體來源如表1所示。1996；Xueta1．，1997；MaryandJayabalan，1997；郅玉寶等，1998；BaskaranandJayabalan，2006；衛(wèi)2培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件雙玲等，2007；Chakrabo~iandGhosh，2009；崔彥2．1外植體的獲得慧等，201O)，并有關(guān)于通過芝麻愈傷組織誘導(dǎo)出胚狀體或再生出植株的報道(李寶平等，1990；易永華子葉和下胚軸：選取籽粒飽滿且無病害的芝麻種子。收稿日期：2011．09．29

7、；接受日期：2012-01-03基金項目：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(No．2011CB109304)~1]國家芝麻產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項目(No．CARS-15)通訊作者。E—mail：zhy@hnagri．org．ca苗紅梅等：芝麻愈傷組織誘導(dǎo)與植株再生體系的建立163表1實驗材料的基因型及外植體類型Table1Genotypesandexplanttypesofsesame表中材料(zzM1102(潁上芝麻二號)、ZZM2296(；~V'＼棱)、77M1224(；~R苔)、77M0570(楊樹黃和尚頭)和zzMO2O9(大八權(quán)))編號來

8、源于我國芝麻資源數(shù)據(jù)庫編號。IDofZZM1102(YingshangZhimaNo．2)，ZZM2296(LaoBaleng)，ZZM1224(Dutai)，ZZM0570(YangshuHuangHes