資源描述：
《產(chǎn)絲素蛋白酶菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、產(chǎn)絲素蛋白酶菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化 摘要采用單因素法，研究了產(chǎn)絲素蛋白酶菌株在發(fā)酵過程中，培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)基初始pH值，培養(yǎng)基碳源、氮源、金屬離子等因素對產(chǎn)絲素蛋白酶菌株的發(fā)酵影響，最后通過對發(fā)酵產(chǎn)生的產(chǎn)絲素蛋白酶酶活及絲素蛋白降解的影響分析，來初步確定最佳發(fā)酵條件。研究結(jié)果表明：培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)基初始pH值8.0，培養(yǎng)基中添加絲素，以玉米粉作為碳源，KNO3為氮源，以Mg2+作為金屬離子，在該條件下發(fā)酵所得絲素蛋白酶活性最高，降解程度最大?！ ￡P(guān)鍵詞產(chǎn)絲素蛋白酶；發(fā)酵條件；絲素蛋白降解；優(yōu)化 中圖分類號(hào)O629
2、.72文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-5739（2016）18-0242-02 AbstractBysingletest，choosingculturetemperature，initialpHvalue，carbonsources，nitrogensources，metalionastheconditions，effectofthefermentationforfibroinasestrainwasstudied.Thenthroughtheeffectonthefibroinaseactivityandfibr
3、oinlossrate，thebestconditionsforfermentationwaschose.Theresultsshowedthatbestfermentationconditionsforfibroinasestrainwasasfollowed：theculturetemperature30℃，initialpH8.0，cornpowderasthecarbonsources，KNO3asthenitrogensources，Mg2+asthemetalion，andaddsomefibron.U
4、nderthe8condition，wecangetthebestfibroinaseactivityandfibroinlossrate. Keywordsfibroinase；fermentationcondition；fibroinlossrate；optimization 蠶絲是人類最早利用的天然蛋白質(zhì)纖維之一。蠶絲中蛋白質(zhì)含量高達(dá)98%以上，主要是由絲素蛋白和絲膠蛋白組成，其中，絲素蛋白是蠶絲蛋白的主要組成部分，其水解中間產(chǎn)物為絲肽，具有較好的調(diào)節(jié)血壓、防止腦老化、降血糖及抑菌等功效[1]。當(dāng)前，絲素
5、蛋白水解可采用中性鹽解法、酸堿水解法及酶解法等。其中，酶法水解制備絲素肽，因具備成本低、生產(chǎn)條件溫和、高安全性、高選擇性、高穩(wěn)定性和可控性等優(yōu)點(diǎn)而受到人們的青睞[2]?！ ≡谧匀唤缰?，存在著各種各樣可以水解蛋白質(zhì)的蛋白酶，但由于絲素蛋白是一種典型的β-角蛋白，很難被普通的蛋白酶降解。土壤中存在著豐富的微生物資源，目前認(rèn)為環(huán)境中有90%以上的微生物還沒有進(jìn)行分離培養(yǎng)。蠶繭、絲綢在土壤中很快會(huì)腐爛、降解，這說明其中存在著可以降解、利用絲素蛋白的微生物?！ ”疚闹饕槍ν寥乐蟹蛛x篩選出可降解絲素蛋白的放線菌菌株，從發(fā)酵培
6、養(yǎng)溫度，起始pH值，培養(yǎng)基碳源、氮源、金屬離子等方面對該菌株進(jìn)行發(fā)酵條件初步優(yōu)化，通過測定發(fā)酵產(chǎn)酶酶活及絲素蛋白的降解率，來尋找最佳產(chǎn)酶條件，以期為利用酶法生產(chǎn)絲肽產(chǎn)品探尋一條有效新途徑，為蠶絲資源再利用拓展開辟一條新渠道?！ ?材料與方法8 1.1菌種 從來源于寧波某小區(qū)的土壤中分離篩選出可降解絲素蛋白的高陽鏈霉菌?！ ?.2絲素的脫膠處理 選擇干凈的蠶繭，于烘箱放置10min，稱量，每10g為一份。取1L去離子水于燒杯中，加入5gNa2CO3，加熱至沸騰。待水溫冷卻至80℃，加入10g烘干蠶繭（充分?jǐn)嚢瑁?/p>
7、，于80℃水浴鍋中脫膠30min。30min后取出，過濾，留脫膠絲。60℃蒸餾水清洗3遍，再常溫蒸餾水清洗3遍，清洗好后擰干，將脫膠絲展開自然風(fēng)干后，收集備用。 1.3培養(yǎng)基 高氏一號(hào)培養(yǎng)基：淀粉20g，NaCl0.5g，KNO31g，K2HPO40.5g，MgSO4?7H2O0.5g，F(xiàn)eSO4?7H2O0.01g，蒸餾水1000mL，瓊脂20g，pH值7.0。種子培養(yǎng)基：NaCl0.5g，K2HPO40.5g，MgSO4?7H2O0.5g，F(xiàn)eSO4?7H2O0.01g，蒸餾水1000mL，pH值7.0。發(fā)
8、酵培養(yǎng)基：NaCl0.5g，KH2PO40.4g，K2HPO40.3g，MgSO4?7H2O0.5g，F(xiàn)eSO4?7H2O0.01g，蒸餾水1000mL，pH值7.0?！ ?.4試驗(yàn)方法 1.4.1菌株培養(yǎng)?！ 。?）菌株活化。從土壤中分離篩選出可降解絲素蛋白的放線菌菌株，接到高氏一號(hào)培養(yǎng)基，30℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)7d，備用。 ?。?）種子液制備。用接種環(huán)挑
