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《糞腸球菌cms-h001預防hp感染的分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、七年制碩士論文第一章材料與方法1．1實驗材料；第一章材料與方法1．1．1動物6～8周齡SPF級蒙古沙鼠，雌雄各半，體重604-lOg，共60只，購自上海生物制品研究所，24"C恒溫恒濕，12小時光照和12小時暗室清潔級動物飼養(yǎng)環(huán)境，沙鼠由湘雅二醫(yī)院動物實驗中心飼養(yǎng)1．1．2菌株2．1幽門螺桿菌標準株ATCC43504：由南方醫(yī)院消化科惠贈。2．2治療用糞腸球菌CMS—H001為本實驗室從健康人胃液中分離，糞腸球菌CMS-H001株保存于中國典型微生物保存中心(武漢)，典藏號CCTCCM206108。1
2、．1．3材料和儀器心腦浸液干粉(青島高科園海博生物技術有限公司，批號20070621)布氏肉湯干粉(青島高科園海博生物技術有限公司，批號20070228)無菌脫纖維羊血(湘臨檢驗中心，批號001516)胎牛血清(北京鼎國生物試劑有限公司，批號20070930)蛋白胨(北京奧博星生物技術責任有限公司，批號20070130)酵母浸粉(北京奧博星生物技術責任有限公司，批號20070202)牛肉粉(北京奧博星生物技術責任有限公司，批號20070321)葡萄糖(湖南師大化學試劑廠，批號20061230)瓊脂粉(
3、北京奧博星生物責任有限公司，批號20070404)硫酸鎂(河南省焦作市化工三廠，批號20061010)硫酸錳(河南焦作市化工廠，批號20061010)磷酸氫二鉀(河南省焦作市化工三廠，批號20061010)檸檬酸二銨(湖南湘中精細化學品廠，批號20090510)乙酸鈉(廣東省臺山市化工廠，批號20060304)吐溫．80(西安富力化學廠，批號20061012)氯化鈉(廣東省臺山市化工廠，批號20060304)磷酸氫二鈉(河南省焦作市化工三廠，批號20061010)多聚甲醛液(上海凌峰化學試劑有限公司，
4、批號20070203)高鹽甘露醇培養(yǎng)基(湖南省益陽生化試劑廠，批號20070412)伊紅一美藍培養(yǎng)基(北京奧博星生物技術責任有限公司，批號20070130)七年制碩士論文第一章材料與方法快速尿素酶試劑盒(福建三強生物化工有限公司，批號20070801)髓過氧化物酶(MPO)測試盒(南京建成生物工程研究所，批號20070506)質(zhì)子泵抑制劑：泮立蘇針劑(40mg／支)(杭州中美華東制藥有限公司，批號040805)抗生素：克拉霉素注射劑(40mg／2m1)(江西匯仁藥業(yè)有限公司，批號0710019)氨芐青
5、霉素針劑(O．59／支)(華北制藥股份有限公司，批號0704307)超凈工作臺(型號SWCJ．IF)厭氧培養(yǎng)箱(型號BAC．HI．m)厭氧盒(英國)。1．2實驗方法1．2．1Hp培養(yǎng)和益生菌菌液制備1．2．1．1Hp培養(yǎng)增菌Up復蘇后取長勢良好者密集劃線接種子心腦浸液血平板，置于厭養(yǎng)箱中微需氧環(huán)境(5％02，85％N2，lO％C02)培養(yǎng)3"--5天。1．2．1．2制備菌懸液無菌接種環(huán)從心腦浸液血平板上收集Hp菌落于無菌生理鹽水成混懸液，比濁法調(diào)整菌懸液終濃度為l×109CFU／ml。1．2．1．3．
6、益生菌懸液、藥液的配制：將近期已記數(shù)CMS—H001菌粉，用無菌生理鹽水配成懸液，混勻，調(diào)整菌懸液終濃度為1×109CFU／m1及4×109CFU／ml兩種。蒙古沙鼠的藥物劑量按人與各種動物之間的用藥劑量換算：已知A種動物每kg體重用藥量，欲計算B種動物每kg體重用藥劑量時，可查表，找出折算系數(shù)(w)再按下式計算：B種動物的劑量(mg／kg)=WXA種動物的劑量(mg／kg)。由上述公式計算出各種藥物的劑量如下：泮立蘇針劑(40mg)用6．6ml無菌生理鹽水稀釋成濃度為6mg／ml的溶液氨芐青霉素(0
7、．59)用0．416ml無菌生理鹽水稀釋成濃度為120mg／ml的溶液克拉霉素(O．259)用7．14ml無菌生理鹽水稀釋成濃度為35mg／ml的溶液。1．2．2實驗動物分組及治療方法’1．2．2．1動物模型的建立：56只清潔級蒙古沙鼠隨機分成7組，每組8只，第5組預防處理組在接種HP前一周每天禁飲8h，讓其自由飲用CL22新鮮菌懸液1×109CFU／ml，連續(xù)7天。除正常組外均接種ATCC43504Hp菌液，0．6ml／只(約含七年制碩士論文第一章材料與方法ATCC43504Hp為109CFU／m1
8、)，所有動物灌胃前禁食12h，連續(xù)3次，1周完成。接種后第5周隨機各處死6只沙鼠，取胃黏膜評估其Hp感染及炎癥情況。1．2．2．2實驗動物分組：將造模成功的6組蒙古沙鼠，每組8只。第1組為PPI三聯(lián)干預治療組(三聯(lián)療法組)第2組為糞腸球菌CMS—H001處理組(CMS—H001組)第3組為糞腸球菌CMS—H001和三聯(lián)療法聯(lián)合處理組(三聯(lián)合并CMS—H001組)第4組為三聯(lián)療法處理后糞腸球菌CMS-H001接種一周(三聯(lián)一cMS—H001組)第5組為預防
