黃芩苷對實(shí)驗(yàn)性肺纖維化大鼠肺內(nèi)ctgf表達(dá)影響

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1、中文摘要黃芩苷對實(shí)驗(yàn)性肺纖維化大鼠肺內(nèi)CTGF表達(dá)的影響摘要目的：肺纖維化(pulmonaryfibrosis，PF)是以肺泡間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤、纖維細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行性沉積為主要特征的慢性間質(zhì)性肺疾病。其發(fā)病機(jī)制還不十分清楚，目前尚無理想的治療方法。氣管內(nèi)一次性滴注博萊霉素(bleomycin，BLM)復(fù)制肺纖維化模型己得到國內(nèi)外公認(rèn)。結(jié)締組織生長因子(connectivetissuegrowthfactor，CTGF)作為許多促纖維化刺激的共同下游介導(dǎo)因子，在介導(dǎo)肺纖維化的發(fā)生中發(fā)揮十分重要的作用。己知在BLM誘導(dǎo)的肺纖維化肺內(nèi)CTG

2、F蛋白表達(dá)增多。黃芩苷(Baicalin，Ba)為一具有．酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類衍生物。．本課題組以往研究發(fā)現(xiàn)連續(xù)腹腔注射黃芩苷(12．5mg／kg／d，×28d)，能有效地減輕BLM誘導(dǎo)的肺纖維化，但是其作用機(jī)制尚未明了。黃芩苷能否影響CTGF的表達(dá)迄今國內(nèi)外尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)觀察不同劑量的黃芩苷對BLM誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化及肺內(nèi)CTGF蛋白上調(diào)的影響，以闡明黃芩苷防治肺纖維化的機(jī)制，為此藥的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)資料。方法：將45只SD(古)(體重170．1809)大鼠隨機(jī)分成六組：即①NS+NS組(n_6)：氣管內(nèi)一次性滴注生理鹽水(O．5ml／k

3、g)后，每天腹腔注射NS(1ml／kg)，連續(xù)28天；QNS+Bal2．5mg組(n--6)：氣管內(nèi)一次性滴注NS(O．5ml／kg)后，每天腹腔注射黃芩苷12．5mg／kg，連續(xù)28中文摘要天；(重)BLM+NS組(n=8)：氣管內(nèi)一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射NS(1ml／kg)，連續(xù)28天；@BLM+Ba6mg組(n=9)：氣管內(nèi)一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黃芩苷6mg／kg，連續(xù)28天；(晝)BLM+Bal2．5mg組(n_9)：氣管內(nèi)一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黃芩苷12．5

4、mg／kg，連續(xù)28天；⑥BLM+Ba50mg組(n=7)：氣管內(nèi)一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黃芩苷50mg／kg，連續(xù)28天。以上各組在氣管內(nèi)給藥后第29天取材。大鼠在10％水合氯醛(3ml／kg)腹腔注射麻醉后，放血處死。將左肺置于新鮮配制的4％多聚甲醛溶液中固定，固定后經(jīng)石蠟包埋、切片，用于CTGF免疫組織化學(xué)染色。其余肺組織去氣管后制成肺粉用于羥脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量測定。用肺組織HYP含量測定法來檢測大鼠的肺纖維化程度；用免疫組化方法觀察CTGF在肺組織中的表達(dá)。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(；

5、±SD)表示，采用SPSS一13．0統(tǒng)計(jì)軟件，多個(gè)樣本均數(shù)比較用單因素方差分析(One．WayANOV：A)，多個(gè)樣本均數(shù)間的兩兩比較用最小顯著差法(1eastsignificantdifferrence．LSD)，以P<0．05作為判斷差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果：1．觀察期間大鼠的一般情況：NS+NS組、NS+Ba12．5mg組大鼠表現(xiàn)活潑，反應(yīng)靈敏，皮毛光滑。BLM+NS組大鼠精神差，活動(dòng)減少，反應(yīng)遲鈍，毛發(fā)晦暗豎立，食欲差，發(fā)育遲緩，體重低。BLM+Ba6mg組、BLM+Bal2．5mg組及BLM+Ba50mg組大鼠精神、食欲、毛色、體重及

6、活動(dòng)中文摘要情況較BLM+NS組均有所好轉(zhuǎn)。2．大鼠肺組織HYP含量：NS+NS組、BLM+NS組肺組織HYP含量分別為(6．95±O．81)lag／raglungweight和(13．40-t-1．50)lag／mglungweight。與NS+NS組比較，BLM+NS組肺組織HYP含量顯著增高(P<0．01)。BLM+Ba6mg組、BLM+Bal2．5mg組、BLM+Ba50mg組肺組織HYP含量分別為(9．54--+1．81)lag／mglungweight、(8．87±1．31)lag／raglungweight和(11．05-+1．

7、08)lag／mglungweight。與BLM+NS組比較，三個(gè)治療組(BLM+Ba6mg組、BLM+Bal2．5mg組、BLM+Ba50mg組)肺組織HYP含量均明顯降低(均P<0．01／)，但三個(gè)治療組肺組織HYP含量仍高于NS+NS組(均PO．05)。3．肺

8、組織切片CTGF免疫組化結(jié)果：NS+NS組僅在支氣管上皮細(xì)胞有少量的CTGF免疫陽性表達(dá)，CTGF陽性區(qū)域積分光密度為2．23±O．39。BLM+NS組CTGF陽性