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《豬肉組織中β2受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、山東人學(xué)碩士學(xué)位論文摘要B2-受體激動(dòng)劑是一類苯乙胺類藥物,起初主要在臨床上用于治療支氣管哮喘、痙攣,阻塞性肺炎等癥狀,后來發(fā)現(xiàn)當(dāng)把較大劑量的此類藥物添加到飼料中時(shí),會(huì)大大提高動(dòng)物的瘦肉轉(zhuǎn)化率,具有營養(yǎng)再分配的作用。若長期食用含有B:.受體激動(dòng)劑殘留的食品就會(huì)發(fā)生頭痛,胸悶,惡心等不良反應(yīng),因此歐盟和我國先后都頒布法令禁止在畜禽生產(chǎn)中使用該類藥物。本研究旨在建立豬肉中62-受體激動(dòng)劑殘留的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC.MS/MS)確證方法和表面等離子生物傳感器(SPR.biosensor)的篩選方法。UPLC.MS/MS方
2、法:稱取2.Og勻質(zhì)的樣品經(jīng)酶解后,用高氯酸:甲醇(9:l,v/v)混合溶液除蛋白后,經(jīng)混合型的PCX柱凈化,氮?dú)獯蹈珊?,使用初始的流?dòng)相定容到2.0mL。最后經(jīng)過超高效液相色譜電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。結(jié)果表明,本方法有效的減少了離子抑制現(xiàn)象,沙丁胺醇,萊克多巴胺,鹽酸克倫特羅三種62-受體激動(dòng)劑的平均回收率都在85%以上,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)在2.3.11%范圍內(nèi),方法檢出限在0.07-0.12/zg/kg,定量限在0.22-O.38/Mg/kg。SPR生物傳感器方法:樣品經(jīng)高氯酸提取,乙酸乙酯凈化后,通過分別固定抗原和抗體優(yōu)
3、化了SPR檢測(cè)方法,并對(duì)緩沖液,再生溶液進(jìn)行了優(yōu)化,建立了豬肉中萊克多巴胺的SPR生物傳感器抑制免疫殘留檢測(cè)方法,該方法對(duì)萊克多巴胺的檢出限為0.6/Mg/kg,在1、2和4/比g/kg三個(gè)濃度添加水平下,平均回收率為81%一102%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在10%以內(nèi)。本方法簡單快速,檢測(cè)時(shí)問為.5.0min,與ELISA方法比較,抗體無需標(biāo)記。在相同的前處理?xiàng)l件下,與UPLC.MS/MS相比,雖然檢測(cè)限較高,但回收率和精密度都較好,并且受樣品基質(zhì)的影響小。特別適合大量樣品的快速篩選。與國外方法相比,本研究采用中國科學(xué)院自行研制的S
4、PR.2004生物傳感器及芯片成本低,抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng),具有廣泛的應(yīng)用前景。本研究所建立的兩種檢測(cè)豬肉中82-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法,樣品處理簡單,去除基質(zhì)干擾能力強(qiáng),回收率、精密度以及方法精密度都較好,UPLC.MS/MS方法,適合樣品的確證分析。SPR生物傳感器方法,特別適合大量樣品的快速篩選工作,而且成本較低,可以用于工廠,超市,集市等場(chǎng)所的質(zhì)量控制。山東大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)鍵詞:超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜;表面等離子體共振生物傳感器;B2.受體激動(dòng)劑;豬肉;殘留II山東大學(xué)碩二lj學(xué)位論文ABSTRACTB2-agonist
5、saresyntheticphenethanolaminecompoundsasbronchodilatoryandobstructivepneumonitisagentsinhumanandveterinarymedicine.However,thesedrugsareoftenmisusedasgrowthpromotersfortheirfunctioningrowthratesenhancementandfeedefficiently.Meatproductscomingfromtreatedanimalsmightb
6、eapotentialthreatforconsumerhealthandcauseheadache,chesttightness,nauseaandotheradversereactions.SotheuseofB2一agonistsasgrowthpromotersincattleisbannedintheEUandourcountry.Inthisresearch,confirmatorymethodofultraperformanceliquidchromatography/massspectrometry/masss
7、pectrometry(UPLC-MS/MS)andscreeningmethodofsurfaceplasmonresouance(SPR)biosensormethodwerestudied.UPLC—MS/MSmethod:Afterenzymatichydrolysis,a2.0ghomogenizedporksampleWasextracted,withperchloricacid-methanol(9:l,V:V)toprecipitateprotein,andthencleanedbymixed-modeBond
8、ElutPlexaPCXsolidphaseextraction(SPE)cartridges.Finally,theevaporatedextractwasreconstitutedto2.0mLwithinitialmobilephase.Theanalyteswered