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《豬肉組織中β2受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、山東人學(xué)碩士學(xué)位論文摘要B2-受體激動(dòng)劑是一類苯乙胺類藥物，起初主要在臨床上用于治療支氣管哮喘、痙攣，阻塞性肺炎等癥狀，后來發(fā)現(xiàn)當(dāng)把較大劑量的此類藥物添加到飼料中時(shí)，會(huì)大大提高動(dòng)物的瘦肉轉(zhuǎn)化率，具有營養(yǎng)再分配的作用。若長期食用含有B：．受體激動(dòng)劑殘留的食品就會(huì)發(fā)生頭痛，胸悶，惡心等不良反應(yīng)，因此歐盟和我國先后都頒布法令禁止在畜禽生產(chǎn)中使用該類藥物。本研究旨在建立豬肉中62-受體激動(dòng)劑殘留的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC．MS／MS)確證方法和表面等離子生物傳感器(SPR．biosensor)的篩選方法。UPLC．MS／MS方
2、法：稱取2．Og勻質(zhì)的樣品經(jīng)酶解后，用高氯酸：甲醇(9：l，v／v)混合溶液除蛋白后，經(jīng)混合型的PCX柱凈化，氮?dú)獯蹈珊?，使用初始的流?dòng)相定容到2．0mL。最后經(jīng)過超高效液相色譜電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。結(jié)果表明，本方法有效的減少了離子抑制現(xiàn)象，沙丁胺醇，萊克多巴胺，鹽酸克倫特羅三種62-受體激動(dòng)劑的平均回收率都在85％以上，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)在2．3．11％范圍內(nèi)，方法檢出限在0．07-0．12／zg／kg，定量限在0．22-O．38／Mg／kg。SPR生物傳感器方法：樣品經(jīng)高氯酸提取，乙酸乙酯凈化后，通過分別固定抗原和抗體優(yōu)
3、化了SPR檢測(cè)方法，并對(duì)緩沖液，再生溶液進(jìn)行了優(yōu)化，建立了豬肉中萊克多巴胺的SPR生物傳感器抑制免疫殘留檢測(cè)方法，該方法對(duì)萊克多巴胺的檢出限為0．6／Mg／kg，在1、2和4／比g／kg三個(gè)濃度添加水平下，平均回收率為81％一102％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在10％以內(nèi)。本方法簡單快速，檢測(cè)時(shí)問為．5．0min，與ELISA方法比較，抗體無需標(biāo)記。在相同的前處理?xiàng)l件下，與UPLC．MS／MS相比，雖然檢測(cè)限較高，但回收率和精密度都較好，并且受樣品基質(zhì)的影響小。特別適合大量樣品的快速篩選。與國外方法相比，本研究采用中國科學(xué)院自行研制的S
4、PR．2004生物傳感器及芯片成本低，抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng)，具有廣泛的應(yīng)用前景。本研究所建立的兩種檢測(cè)豬肉中82-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法，樣品處理簡單，去除基質(zhì)干擾能力強(qiáng)，回收率、精密度以及方法精密度都較好，UPLC．MS／MS方法，適合樣品的確證分析。SPR生物傳感器方法，特別適合大量樣品的快速篩選工作，而且成本較低，可以用于工廠，超市，集市等場(chǎng)所的質(zhì)量控制。山東大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)鍵詞：超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；表面等離子體共振生物傳感器；B2．受體激動(dòng)劑；豬肉；殘留II山東大學(xué)碩二lj學(xué)位論文ABSTRACTB2-agonist
5、saresyntheticphenethanolaminecompoundsasbronchodilatoryandobstructivepneumonitisagentsinhumanandveterinarymedicine．However，thesedrugsareoftenmisusedasgrowthpromotersfortheirfunctioningrowthratesenhancementandfeedefficiently．Meatproductscomingfromtreatedanimalsmightb
6、eapotentialthreatforconsumerhealthandcauseheadache，chesttightness，nauseaandotheradversereactions．SotheuseofB2一agonistsasgrowthpromotersincattleisbannedintheEUandourcountry．Inthisresearch，confirmatorymethodofultraperformanceliquidchromatography／massspectrometry／masss
7、pectrometry(UPLC-MS／MS)andscreeningmethodofsurfaceplasmonresouance(SPR)biosensormethodwerestudied．UPLC—MS／MSmethod：Afterenzymatichydrolysis，a2．0ghomogenizedporksampleWasextracted，withperchloricacid-methanol(9：l，V：V)toprecipitateprotein，andthencleanedbymixed-modeBond
8、ElutPlexaPCXsolidphaseextraction(SPE)cartridges．Finally，theevaporatedextractwasreconstitutedto2．0mLwithinitialmobilephase．Theanalyteswered
