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《基于uhplc-qtofms代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)豬尿中β_2-受體激動(dòng)劑殘留的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號(hào)：單位代碼：密級(jí)學(xué)號(hào)：博士學(xué)位論文基于代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)豬尿中受體激動(dòng)劑殘留的研究研究生吳玉蘋指導(dǎo)教師丁雙陽研究員合作指導(dǎo)教師夏儀副教授申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別農(nóng)學(xué)博士專業(yè)名稱基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向獸醫(yī)藥理學(xué)與毒理學(xué)所在學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)院年月Ph.D.DissertationMetabonomicapproachbasedonultra-highperformanceliquidchromatography-quadrupoletime-of-flightmassspectrometryforurineprofilingofswi
2、netreatedwithp2-agonistsPh.D.Candidate:WUYupingSupervisors:Prof.DINGShuangyangAssociateProf.XIAXiMajor:BasicVeterinaryMedicineResearchField:VeterinaryPharmacologyandToxicologyCoCollege:llegeofVeterinaryMedicineChinaAgriculturalUniversityJune,2015獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位
3、論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中已經(jīng)注明引用和致謝的內(nèi)容外，論文中不包含本人和其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：時(shí)間：日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保存及向國家有關(guān)部門和機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人同意中國農(nóng)業(yè)
4、大學(xué)將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》或《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進(jìn)行出版，并享受相關(guān)權(quán)益。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）學(xué)位論文作者簽名：時(shí)間：年月々日導(dǎo)師簽名：時(shí)間：年月之日本研究由公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)資助摘要受體激動(dòng)劑高劑量使用時(shí)由于能顯著提高胴體的瘦肉率和顯著增重，常被非法用于畜牧業(yè)養(yǎng)殖業(yè)中，但其殘留易通過食物鏈進(jìn)入人體危害人類健康，我國已禁止使用。監(jiān)測此類物質(zhì)的非法使用一般采用儀器或靶向檢測方法。然而，隨著新的類似物不斷合成和使用方式變化，傳統(tǒng)監(jiān)測將面
5、臨巨大的挑戰(zhàn)。非靶向代謝組學(xué)具有可以大規(guī)模的定性和半定量分析復(fù)雜生物樣品中小分子代謝物的優(yōu)勢，本文旨在基于代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)卩受體激動(dòng)劑在豬尿中的殘留進(jìn)行研究，建立檢測受體激動(dòng)劑的新方法。首先基于超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)對(duì)克倫特羅干擾的大鼠尿液進(jìn)行生物標(biāo)志物的篩選，建立了尿液中非靶向代謝組學(xué)的方法。以大鼠為模型動(dòng)物，只大鼠隨機(jī)分為四組：低、中、高劑量三個(gè)實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組。克倫特羅藥物干擾后連續(xù)收集尿液，運(yùn)用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜分析，數(shù)據(jù)用軟件處理。結(jié)果顯示低、中劑量組的大鼠尿液中的代謝物變化不顯
6、著，克倫特羅高劑量組的大鼠尿液中蹄選出了潛在生物標(biāo)志物。運(yùn)用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)平臺(tái)，初步建立了尿液中代謝組學(xué)的研究方法。其次應(yīng)用建立的代謝組學(xué)方法對(duì)受體激動(dòng)劑干擾后的豬尿樣品進(jìn)行研究。應(yīng)用非靶向代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)單獨(dú)和小劑量混合使用克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺的豬尿樣進(jìn)行了分析，篩選出共同的生物標(biāo)志物。頭豬隨機(jī)分為四組，其中三組分別飼喂含的克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺的飼料，一組飼喂添加上述三種藥物各的飼料，連續(xù)飼喂天，用藥前小時(shí)的每頭豬的尿液作為空白對(duì)照，停藥后分別在、、、、、、、、、、、、、、、
7、、、、、、和天采樣，對(duì)收集到的近個(gè)尿樣運(yùn)用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜分析，進(jìn)而利用多元統(tǒng)計(jì)分析進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，比較藥物干擾組和對(duì)照組，篩選出可能的生物標(biāo)志物，本實(shí)驗(yàn)篩選生物標(biāo)志物的離子選擇標(biāo)準(zhǔn)如下：（值；倍數(shù)變化離子強(qiáng)度。對(duì)篩選出的離子再使用、、、等數(shù)據(jù)庫進(jìn)行鑒定，最后利用超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)對(duì)所得到的共同的可能生物標(biāo)志物與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比鑒定出這兩種物質(zhì)分別是剛哚甲酸（和氟米龍醋酸酷（最后，基于共同的生物標(biāo)志物建立檢測受體激動(dòng)劑的分析方法。針對(duì)尿液中共同的生物標(biāo)志物，優(yōu)化了前處理方法，確定固相萃取柱作
8、為尿液的凈化優(yōu)化了檢測的質(zhì)譜條件，建立了超高液相色譜串聯(lián)四極桿質(zhì)譜的儀器方法。運(yùn)用此方法對(duì)采集的份尿樣進(jìn)行了檢測，結(jié)果份疑似陽性。隨之對(duì)份疑似陽性樣品運(yùn)用傳統(tǒng)檢測激動(dòng)劑的超高液相色譜串聯(lián)四極桿質(zhì)譜方法進(jìn)行確證，結(jié)果顯示份疑似陽性樣本分別為沙丁胺醇和氯丙那林。隨之運(yùn)用隨機(jī)抽取檢測結(jié)果為陰性并經(jīng)儀器驗(yàn)證的份空白尿樣初步確定了受體激動(dòng)劑檢測中生物標(biāo)志
