膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)豬尿中β2-受體激動(dòng)劑殘留的研究

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1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：405605012179南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)豬尿中02-受體激動(dòng)劑殘留的研究TheResearchofColloidalGold-basedImmunochromatographyAssayforRapidandQuantitativeDetectionofB2-agoni$tResiduesinSwineUrine彭濤培養(yǎng)單位（院、系)：食品學(xué)院食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室指導(dǎo)教師姓名、職稱：賴衛(wèi)華博士、教授申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：工學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)名稱：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程論文答辯F!期

2、：2015年5月25R答辯委員會(huì)主席:評(píng)閱人：_______________IIf.2015年5月一、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研宄工作及取得的研宄成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研宄成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他敦音和構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我--同丨:作的同志對(duì)本研宄所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）:簽字曰期:年‘月+曰二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留'使用學(xué)位

3、論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印'縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)北朵萬(wàn)方數(shù)據(jù)股份冇限公司和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。{1/學(xué)位論文作者簽名（鴨）導(dǎo)師簽名（手寫）：簽字曰期:外/]、年g月4目____________簽字

4、日期:#/]?年‘月4■日論文題S姓名ii私學(xué)號(hào)論文級(jí)別博土□碩1-5院/系/所專業(yè)「枳戶備加蠃與口公幵□保密（向校學(xué)位辦申請(qǐng)獲批準(zhǔn)為“保密”，______年__月后公開)摘要摘要傳統(tǒng)的膠體金免疫層析方法主要是通過肉眼觀察檢測(cè)線的有無(wú)來(lái)判斷檢測(cè)結(jié)果，對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定性或者半定量檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果易受溫度、光線等環(huán)境因素和檢測(cè)者的主觀因素影響?；谀z體金光學(xué)讀取儀的膠體金免疫層析快速定量檢測(cè)方法具有速度快、操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、可定量檢測(cè)、數(shù)據(jù)可存儲(chǔ)、適合現(xiàn)場(chǎng)快速篩查等優(yōu)點(diǎn)。本研究旨在建立膠體金免疫層析快速定量檢測(cè)平臺(tái)并初步探討影響其穩(wěn)定性的主要因素，為推

5、廣膠體金免疫層析快速定量檢測(cè)方法的應(yīng)用提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。近年來(lái)，鹽酸氯丙那林作為一種新型的“瘦肉精”使用，該藥物在動(dòng)物體內(nèi)代謝緩慢且具有蓄積毒性，通過食物鏈的傳遞易對(duì)人類的健康造成危害。本研究成功建立了基于HG-8膠體金光學(xué)讀取儀快速定量檢測(cè)豬尿中氯丙那林殘留的方法。通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù)，該方法能在9分鐘內(nèi)快速分析檢測(cè)尿樣中的氯丙那林，最低檢測(cè)限為0.15μg/L，在3.0μg/L和20.0μg/L之間有良好的線性關(guān)系2=0.997），與其它5種β（R2-受體激動(dòng)劑沒有明顯的交叉反應(yīng)。為了驗(yàn)證本方法的準(zhǔn)確性，用本方法與高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)

6、20個(gè)陰性豬尿加標(biāo)樣品，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果有良好的相關(guān)性。本方法具有便捷靈敏、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，能在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)尿樣中的氯丙那林殘留。在動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)中，鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等三種β2-受體激動(dòng)劑（β2-agonist）藥物常用于促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)及提高飼養(yǎng)動(dòng)物的瘦肉率，本研究以克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇等三種膠體金免疫層析快速定量檢測(cè)試紙條為對(duì)象，通過60℃加速保存實(shí)驗(yàn)得出影響膠體金定量試紙條穩(wěn)定性的主要因素是質(zhì)控線（C線）的穩(wěn)定性。萊克多巴胺試紙條相比于其它兩種試紙條的穩(wěn)定性較好，而克倫特羅和沙丁胺醇試紙條在加速保存實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)線（T線）

7、穩(wěn)定C線下降明顯，導(dǎo)致T/C上升顯著。本研究分別在克倫特羅和沙丁胺醇兩種試紙條的二抗稀釋液中均添加5%（v/v）的WellChampion抗體保護(hù)劑，NC膜在60℃條件下干燥24小時(shí)，兩種試紙條的穩(wěn)定性均得到了有效提高。同時(shí)，本研究建立了膠體金免疫層析快速定量檢測(cè)平臺(tái)，檢測(cè)豬尿中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇三種β2-受體激動(dòng)劑的最低檢測(cè)限分別為0.19μg/L、I摘要0.39μg/L和0.83μg/L，回收率在86.6%~109.7%之間，變異系數(shù)為4.7%~14.7%；檢測(cè)豬肉中三種目標(biāo)物的最低檢測(cè)限分別為0.43μg/kg、0.52μg/k

8、g和1.01μg/kg，回收率為71.2%~101.6%，變異系數(shù)為7.2%~17.9%。對(duì)不同地區(qū)的135個(gè)不同豬尿樣本和江西國(guó)鴻食品