膠體金免疫層析法快速檢測(cè)c反應(yīng)蛋白的研究

膠體金免疫層析法快速檢測(cè)c反應(yīng)蛋白的研究

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1、單位代碼;10472學(xué)術(shù)學(xué)位囚專業(yè)學(xué)位口;12121中圖分類號(hào)學(xué)號(hào)00;密級(jí):fe斬l#i碩±學(xué)位論文膠體金免疫層析法快速檢測(cè)C反應(yīng)室白的研究DevelomentofaRaidColloidalGoldppImmunochromatographicAssayofC民eactiveProtein:李靜芳作者姓名導(dǎo)師姓名:王云龍教授學(xué)科n類:臨巧醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:臨巧檢驗(yàn)訟斷學(xué)培養(yǎng)院系:民學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院?,’,二〇—完成時(shí)間:節(jié)年H月DevelopmentofaRapidCollo

2、idalGoldImmunochromatographicAwayofCReactiveProteinAThesisSubmittedfortheDereeofMastergCandida化:LiJingfangSuervisor:Prof.WangYunlonepSchoolofBasicMedicalScienceXinxiangMedicalUniversity新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中蔣別加W

3、祿注引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)。L發(fā)表或撰寫的成果作品對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中乂明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。。:作者簽名:日期^巧年義月曰4井5^學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子脫允許論文被査閱和借閱。本人授權(quán)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院可將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫漲廳檢索,可W采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。""本學(xué)位論文屬于(請(qǐng)?jiān)冢紫孪鄳?yīng)

4、方框內(nèi)打V):1.。,在保密□__年解密后適用本授權(quán)書2.不保密口。"'作者簽名:日期:女年、月VS導(dǎo)師簽名;^日期:,年月^^/2^^^^;目錄摘要1一第部分前言6第二部分材料和方法11第蘭部實(shí)驗(yàn)錦26第四部分討論40第五部分結(jié)論43參考規(guī)44文獻(xiàn)綜述49參考文獻(xiàn)58B^61攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況62mm63個(gè)人簡(jiǎn)歷64新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩壬學(xué)位論文膠體金免疫層祈法快速檢測(cè)C反應(yīng)蛋白的硏究摘要背景C反應(yīng)蛋白(Creactiveproteiii

5、jCRP)自從在急性感染者血液中被發(fā)現(xiàn)后,因能夠反應(yīng)感染性疾病的動(dòng)態(tài)變化,已被臨床上廣泛應(yīng)用于炎癥的輔助診斷化相關(guān)的檢測(cè)方法、產(chǎn)品不斷涌現(xiàn),但目前獲批的CRP定量檢測(cè)相關(guān)產(chǎn)品均需要借助設(shè)備來完脫不適合現(xiàn)場(chǎng)、社區(qū)醫(yī)院、鄉(xiāng)村等基層醫(yī)巧機(jī)構(gòu)使用。因此,研究開發(fā)不需要借助任何設(shè)備即可快速檢測(cè)CRP含量的膠體金免疫層析試紙條具有重要的臨床價(jià)值和社會(huì)意義。目的建立基于自制化色卡半定量檢測(cè)CRP含量的雙抗體夾也膠體金免疫層析法方法1RP.C比色卡定值點(diǎn)的確定,:根據(jù)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)確定比色卡H個(gè)定值點(diǎn)。2.CRP室內(nèi)質(zhì)控晶的制備;利用CRP低值血清

6、作為基質(zhì)血清稀釋CRP高值血清一,另外添加類風(fēng)濕因子、蘭醜甘油等干擾物質(zhì)制備系列室內(nèi)質(zhì)控品,并采用羅氏試劑進(jìn)行復(fù)核。3.CRP試紙條的制備及工藝優(yōu)化:采用梓臀酸云鋼還原法制備不同粒徑的膠體金,采用功能性實(shí)驗(yàn)確定膠體金最優(yōu)粒徑、最佳pH和蛋白標(biāo)記量、最佳蛋白包被量;采用正交實(shí)驗(yàn)確定樣品墊處理液的成分及含量、血、血;通過全血漿清的稀釋倍數(shù)研究確定不同標(biāo)本的稀釋倍數(shù),制備比色卡,并在實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上將反應(yīng)體積放大100倍,驗(yàn)證工藝的穩(wěn)定性。4.、精密化、試紙條性能評(píng)化選用室內(nèi)質(zhì)控品對(duì)試紙條的靈敏度、批間差恃異性、鉤狀(HOOK)效應(yīng)、穩(wěn)定性、檢測(cè)

7、環(huán)境條件等進(jìn)行研究。5.實(shí)驗(yàn)室臨床標(biāo)本檢測(cè):從中也標(biāo)本庫選200份臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)并與對(duì)照試一。劑對(duì)照,確認(rèn)致性1新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩生學(xué)位論文結(jié)果1.確定CRP比色卡王個(gè)定值點(diǎn)由淺到深分別為10l/mL、50/mL、100/mL。^g鴨ng2.配制CRP室內(nèi)質(zhì)控晶14份;含類風(fēng)濕因子(150IU/mL)、H酷甘油(16mmol/L)和不含干擾因素的CRP終濃度分別為5ng/mL、10帖/mL、50ng/mL、100i-ig/mL樣本共12份.57ZmL),HOOK效應(yīng)樣本(CRP10

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