姜黃素抑制兔眼后囊膜混濁的實驗研究

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1、姜黃素抑制兔眼后發(fā)性白內(nèi)障的實驗研究中文摘要【目的】后發(fā)性白內(nèi)障又稱后囊膜混濁(PostdorcapsularopaCmcation，PCO)，為白內(nèi)障囊外摘出術后最常見的并發(fā)癥，是影響白內(nèi)障術后視力恢復的重要因素。其主要發(fā)生的原因是白內(nèi)障囊外摘出術后或晶狀體外傷后，殘留的皮質(zhì)或晶狀體上皮細胞在炎癥介質(zhì)和細胞因子的刺激下逐漸向后囊膜增生、移植和纖維化形成。姜黃素(curCum‰Cur)是姜黃、莪術和郁金等姜黃屬藥用植物中的酚性色素成分，以中藥姜黃中的含量為最高。近年來經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素具有抗炎、抗氧化、降血脂及抗腫瘤等各種生物學活性，能有效地抑制離體牛眼晶狀體上皮細胞的增殖。本實驗將不同

2、濃度的姜黃素應用于活體兔眼晶狀體囊外摘出術后，觀察其抑制兔眼后發(fā)性白內(nèi)障的劑量效應關系及毒副作用的程度?！痉椒ā?0只健康日本大耳朵白兔(40只眼)，體重為2．00__2．25Kg，兔齡3_4‘一個月，雌雄兼有，外眼及眼底檢查正常，隨機均分為4個組，每組5只，4組兔雙眼均施行白內(nèi)障小切口非超聲乳化囊外摘除術。A組為空白對照組，使用格林氏液體為灌注液；B組為實驗組I，術中使用lOm∥L的嘶；C組為實驗組II，術中使用30m∥L的Cur；D組為陽性對照組，術中使用8m∥L的柔紅霉素。每組均于透明晶狀體摘除后行前房灌注10分鐘，Bss液置換lO分鐘。術后觀察3個月。其中，術前和術后第l、2、3

3、天，測量眼壓。術前術后，3d、7d、15d、30d，測量角膜內(nèi)皮細胞數(shù)。術后ld、3d、7d對實驗動物行裂隙燈檢查結(jié)膜、角膜及前房，記錄下結(jié)膜睫狀充血，角膜水腫及房水混濁程度。術后第2周、第4周、第8周、第12周檢查后囊膜混濁的情況。術后12周，處死兔子，沿睫狀體扁平部全層環(huán)形剪開取完整的眼前段組織(包括角膜、虹膜、睫狀體后囊膜組織)，10％的甲醛固定液固定24小時，然后經(jīng)梯度酒精脫水，浸蠟，石蠟包埋及切片和免疫組化染色，觀察晶狀體上皮細胞增殖情況及角膜、虹膜、睫狀體的組織學改變?！窘Y(jié)果】①．手術前后眼內(nèi)壓的變化，各組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義。術前與術后第2、3天眼壓值比較差異無統(tǒng)計學意

4、義，術前與術后第1天眼壓值比較差異有統(tǒng)計學意義。②．術前和術后3d、7d、15d角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量比較差異無明顯統(tǒng)計學意義。③．術后第1天，所有兔眼角膜、鞏膜切口區(qū)都有輕中度的水腫，但均在術后l周后消失，術后第1天、3天、7天各組角膜水腫程度比較差異無統(tǒng)計學意義。④．術后第l天、7天、15天，各組間房水混濁的程度差異有統(tǒng)計學意義，其中B、C、D三組房水混濁程度與A組比較差異有統(tǒng)計學意義，B組和C組比較房水混濁的程度差異有統(tǒng)計學意義，C、D兩組比較房水混濁的程度差異無統(tǒng)計學意義(P

5、比較差異無統(tǒng)計學意義，術后第7天結(jié)膜、睫狀體充血漸消退。⑥．術后后囊膜混濁情況，術后第2周A組(空白對照組)，后囊部分開始出現(xiàn)輕度混濁，B組(10111班沁)在術后第4周部分開始出現(xiàn)后囊膜混濁，C組(30Illg／Lcur)在術后第8周部分開始出現(xiàn)后囊膜混濁，D組(8mg／L柔紅霉素)在術后第8周部分開始發(fā)現(xiàn)后囊膜混濁。術后第8周比較各組后囊膜混濁程度，B、C、D三組后囊膜混濁程度與A組比較差異有統(tǒng)計學意義，B組和C組、D組兩組后囊膜混濁程度比較差異有統(tǒng)計學意義，C、D兩組后囊膜混濁程度比較差異無統(tǒng)計學意義。⑦．光鏡觀察后囊膜切片顯示：A組切片可見晶狀體上皮細胞明顯變成纖維形狀，呈梭形、

6、長條形，細胞大量增殖及轉(zhuǎn)化為成纖維細胞，細胞收縮變形呈“拉網(wǎng)狀’’。B、C兩組切片可見晶狀體上皮細胞的細胞核內(nèi)染色質(zhì)發(fā)生凝集、固縮、邊集，在細胞核膜周邊聚集成環(huán)形、馬蹄形。細胞膜表面微絨毛和偽足減少或消失。D組可見晶狀體上皮細胞皺縮成圓形，透光差，胞漿內(nèi)顆粒增多。⑧．光鏡觀察角膜、虹膜。切片顯示：各組角膜內(nèi)皮細胞形態(tài)無明顯差異，均為六邊形結(jié)構(gòu)，大小均勻，無細胞腫脹脫落現(xiàn)象。虹膜內(nèi)皮細胞均呈扁平狀，核呈橢圓形，可見兩層色素上皮細胞層次清楚，表層為較大的色素上皮細胞，內(nèi)層為2特殊分化的肌上皮細胞，中間為疏松結(jié)締組織，內(nèi)含豐富的血管。⑨．免疫組化染色真彩色醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)檢測PcNA表達IOD

7、，B、C、D組IoD值與A組比較差異有統(tǒng)計學意義?！窘Y(jié)論】①．在活體兔眼晶狀體囊外摘出術中使用10IIl∥L和30In班的Cl

8、r均可有效的抑制后囊膜混濁的發(fā)生。②．Cur對晶狀體上皮細胞增殖的抑制作用呈明顯劑量．效應關系。③．各組濃度的C11r均不產(chǎn)生眼前節(jié)的毒副作用，具有抗炎和抗氧化的作用。④．10In∥L和30IIl∥L的c11r作為灌注液抑制后囊膜混濁的發(fā)生是有效且安全的。⑤．此項研究的結(jié)論應用于臨床前，尚需更進一步詳盡的動