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《tweak%2ffn14促進大鼠心肌成纖維細胞增殖和膠原合成》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、山東大學碩士學位論文TWEAK／Fnl4促進大鼠心肌成纖維細胞增殖和膠原合成日月k專業(yè)研究生導師內(nèi)科學(心血管病)陳慧娜隋樹建教授．中文摘要背景：高血壓是一種嚴重危害人類健康的常見病，在其發(fā)展進程中可導致心、腦、腎等靶器官的功能損害。心肌纖維化(myocardialfibrosis，MF)是高血壓性心臟病(hypertensionheartdisease，HHD)的主要病理基礎之一。MF主要表現(xiàn)為心肌成纖維細胞(cardiacfibroblasts，CFs)數(shù)目增多和膠原過度沉積，影響心肌的舒張
2、及收縮功能，可致心力衰竭、心律失常甚至心源性猝死等嚴重并發(fā)癥。高血壓MF的發(fā)病機制仍未明確，目前MF的發(fā)病機制及其防治措施已經(jīng)成為國內(nèi)外研究的熱點。研究發(fā)現(xiàn)炎性反應參與MF的發(fā)生發(fā)展過程。炎性反應在MF發(fā)展中形成了一個復雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡，在炎性因子的刺激下發(fā)生纖維化的心肌組織進一步分泌炎性因子，促進心肌纖維化病理過程的發(fā)生。炎性因子及其受體在心肌重塑過程中有重要作用，而且還促進急性心力衰竭的發(fā)生及發(fā)展為慢性心功能不全。研究表明急性心肌梗死后的心肌梗死區(qū)和非梗死區(qū)都存在著炎性細胞浸潤和纖維化，且炎性因
3、子的水平與纖維化的程度密切相關。近來發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，n師)在MF中起重要作用，主要促進心肌細胞凋亡和改變相關細胞因子的表達。腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導劑(tumornecrosisfactor-likeweakinducerofapoptosis，TWEAK，alsoAp03L，TNFSFl2)是腫瘤壞死因子超家族的新成員，是II型跨膜蛋白，其功能主要是作為可溶性細胞因子調(diào)節(jié)細胞的生長、增殖及凋亡、炎性反應、血管生成等，TWEAK主要通過與其受體成纖維細
4、胞生長因子誘導早期反應蛋白14(fibroblastgrowthfactor-inducible14，F(xiàn)nl4)結(jié)合介導這些效應。Fnl4為I型跨膜蛋白，其可通過連接不同的含有腫瘤壞死因子受體相關因子(TNFreceptor-associatedfactor，TRAF)結(jié)構域的受體蛋白或胞漿蛋白，啟動細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑，引發(fā)相應的基因活化。研究發(fā)現(xiàn)TwEAK／Fnl4在心功能不全的山東大學碩士學位論文發(fā)展過程中有重要作用，心功能不全與MF密切相關，但TWEAK／Fnl4與MF的關系尚未見報道。目
5、的：本文通過觀察TWEAK／Fnl4對大鼠心肌成纖維細胞增殖和膠原合成的影響，以探討TWEAK／Fnl4與心肌纖維化的關系。方法：1．采用胰酶消化法獲得Wistar大鼠CFs。采用倒置相差顯微鏡和波形蛋白免疫熒光法鑒定細胞。2．各實驗組培養(yǎng)24h和48h采用MTT比色法檢測細胞增殖，qRT-PCR和ELISA測定CFsl型膠原基因表達和細胞培養(yǎng)上清的I型膠原蛋白含量：①對照組：不加干預因素；②100；tg／L組：加入100I_tg／L重組人TWEAK(RecombinanthumanTWEAK，
6、rhTwEAK)；③500pg／L組：加入500pg／LrhTWEAK。結(jié)果：1．采用胰酶消化法分離CFs，倒置顯微鏡下觀察，細胞排列致密，呈梭形或不規(guī)則三角形，細胞核較大呈橢圓形，細胞漿透明，生長時走向多為放射狀或旋渦狀，無自發(fā)性搏動。波形蛋白免疫熒光顯示，CFs的波形蛋白呈陽性反應，細胞呈梭形或多邊形，胞漿內(nèi)圍繞胞核呈現(xiàn)綠色網(wǎng)絡狀物質(zhì)。2．M1vr法測定CFs吸光度值(A492值)，與同時間段對照組比較，100pg／L組與500pg／L組A492值增高(p<0．01)，500pg／L組與10
7、099／L組相比差異有統(tǒng)計學意義(刪．01)。100扯g／L組與500pg／L組培養(yǎng)48h較24hA492值高(尸8、WEAK能夠促進心肌成纖維細胞增殖和膠原合成：2．TWEAK促進心肌成纖維細胞增殖和膠原合成的生物學作用可能主要是通過與其受體Fnl4結(jié)合介導的，提示TWEAK／Fnl4在心肌纖維化過程中可能發(fā)2山東大學碩士學位論文揮重要作用。關鍵詞：腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導劑；成纖維細胞生長因子誘導早期反應蛋白14；心肌成纖維細胞；增殖；膠原合成3山東大學碩士學位論文TWEAK／Fn14PromotestheProliferationandCollagenSynthesisofRatCardiacFibro
