細胞分化劑增強三氧化二砷誘導肝癌細胞的凋亡效應(yīng)

《細胞分化劑增強三氧化二砷誘導肝癌細胞的凋亡效應(yīng)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、維普資訊http://www.cqvip.com細胞分化劑增強三氧化二砷誘導肝癌細胞的凋亡效應(yīng)劉建偉’，唐毅’，沈雁’，鐘雪云。，區(qū)慶嘉’(1．暨南大學附屬廣州紅十字會醫(yī)院普外科，廣東廣州510220；2．暨南大學醫(yī)學院病理科，廣東廣州510632；3．中山大學附屬第二醫(yī)院普外科，廣東廣州510120)摘要：【目的】探討細胞分化劑(CDA。Ⅱ)在三氧化二砷(As203)誘導肝癌細胞凋亡效應(yīng)中的作用。【方法】應(yīng)用CDA一Ⅱ和As203共同處理肝癌細胞株BEL一7402、HepG2，通過四唑藍比色法檢測細胞存活率；用活細胞熒光染色觀測細胞凋亡及形態(tài)學變化、流式細胞術(shù)

2、分析細胞周期變化及凋亡率?！窘Y(jié)果】CDA。Ⅱ毒性作用很低，但可以顯著增強As203對肝癌細胞生長的抑制作用，1．0g／LCDA一Ⅱ便可使As203對兩株細胞的半數(shù)抑制濃度由5．0／lmol／L降低至1．0t．tmol／I。(P<0．01)。形態(tài)學可觀察到CDA。Ⅱ明顯加強了As203誘導的細胞凋亡，且與劑量有關(guān)；流式細胞術(shù)分析，低質(zhì)量濃度的CDA一Ⅱ(<2．0g／L)細胞生長阻滯于G2期較對照組多，而隨著劑量的增加則凋亡細胞和滯留于Gl期的細胞增多，低劑量CDA一Ⅱ與犧03共同處理肝癌細胞后，凋亡率明顯高于單獨用AS203?！窘Y(jié)論】cD艮Ⅱ可增強AS203誘導肝

3、癌細胞的凋亡效應(yīng)，兩藥具有協(xié)同作用。關(guān)鍵詞：癌，肝細胞；凋亡；細胞分裂期；生長抑制物；三氧化二砷中圖分類號：R735．2文獻標識碼：A文章編號：1000—257X(2002)06—0423—04+物鈿有三研黧究證罌實其!竺較2某些：是化簍療曩藥黧物謄具銎有竺更望強妄的霎誘蘭導1材“料川與一方～法”，肝癌細胞凋亡效應(yīng)，也有較強的細胞毒性和腫瘤細1．1材料胞耐藥性問題?1。人尿提取物細胞分化劑(CDA-肝癌細胞株HepG2、BEL一7402來源于中山大Ⅱ)具有較強的誘導腫瘤細胞分化和逆轉(zhuǎn)化療藥耐學醫(yī)學院細胞庫；細胞分化劑(CDA-II，商品名：喜藥性的作用[引，臨床

4、治療晚期肝癌發(fā)現(xiàn)肝功能好轉(zhuǎn)，滴克)由合肥永生制藥有限公司提供；三氧化二砷癥狀明顯改善CDDCDDCDDCDD有利于化療‘引。我們應(yīng)用CDA-II和(AS203，M，=197．84)、四甲基偶氮唑藍(M1vr)和As203共同處理肝癌細胞，旨在探索細胞分化劑與Hoechst33258購自Sigma公司；其他：PRMI1640三氧化二砷在誘導肝癌細胞凋亡效應(yīng)中的作用。(美國cmco)、瓊脂糖、蛋白酶一K、(華美公司)、小牛血清(杭州四季青)、DMSO(二甲基亞砜，進口分裝)。維普資訊http://www.cqvip.com424中1jl醫(yī)科大學學報(AcadJSUM

5、S)，2002，23(6)1．2分組藥物培養(yǎng)后，加Hochst33258入細胞懸液，終質(zhì)量根據(jù)預(yù)實驗的結(jié)果1．0～5．0／~mol／L的2濃度為1mg／I，避光染色15min，滴片后在熒光顯誘導肝癌細胞的凋亡率有差異性，I．0～5．0g／L微鏡觀察細胞核DNA熒光。的CDA一1具有抑制肝癌細胞增殖及誘導分化的作1．3．3流式細胞術(shù)分析細胞凋亡收集經(jīng)藥物處用。本實驗分為A組：對照，只有細胞，不加藥物；理4d的細胞，用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)洗滌，1×B組：單純加As203，以PRMI1640液稀釋，終濃度10細胞乙醇固定，送中山醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院1．0，2．0，

6、3．0，4．0，5．0／~mol／L5個濃度；C組：單腎病實驗室流式細胞儀(美國BECKMAN．純加CDA一1，以PRMI1640液稀釋，終濃度1．0，COULPER)進行細胞周期分析，亞Gl期DNA含2．0，3．0，4．0，5．0g／L5個濃度；D組：A組各濃度量的細胞為凋亡細胞。+1．0g／LCDA一1I。1．4統(tǒng)計學處理1．3方法以SPSS8．0軟件，資料均行方差齊性檢驗，多1．3．1細胞培養(yǎng)及四唑藍快速比色法(MTT)檢因素實驗設(shè)計資料方差分析的析因分析。測存活率細胞常規(guī)培養(yǎng)(37℃、體積分數(shù)5％2結(jié)果coe飽和濕度)，實驗時用PRMI1640液將細胞株

7、濃度調(diào)整至1X10。／mI，接種于96孑L培養(yǎng)板上培2．1CDA．1，As20對肝癌細胞生長的影晌養(yǎng)24h，按實驗分組加入不同濃度藥物，B、C組每As2o3作用肝癌細胞后呈現(xiàn)明顯的細胞毒性，孔加100L／L培養(yǎng)液，100L／L藥物，總體積200對細胞存活率的影響呈濃度依賴關(guān)系，兩株細胞的L／L；D組兩種藥物各加100L／L，總體積200半數(shù)抑制濃度是5．0mol／L。而CDA一1的細胞gL／L；對照組每孑L加培養(yǎng)液200L／L。每組濃度毒性很低，在質(zhì)量濃度1．0g／L時，HepG2、Be1．均為4個復孑L，培養(yǎng)72h后，每孑L加入MTT207402兩株細胞存活率

8、分別是92％和89％，質(zhì)