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《丙型肝炎合并代謝綜合征治療策略及藥物機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明l叭Y帆2帆311lll4㈣0洲6511119礬本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：走婁承簽字日期：2。侈年歲月≥7日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解j墾塞跡塑匡堂瞳有關(guān)保存、使用學(xué)位論文的管理辦法。有權(quán)保留并
2、向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)j＆塞跡塑匡堂院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：起齲簽字日期：如驂年，月2—7日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：導(dǎo)師簽名：簽字日期：電話：郵編：日北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文丙型肝炎合并代謝綜合征的治療策略及藥物機(jī)制研究摘要丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎。在丙型肝炎患者中大約有一半以
3、上的患者合并有高血脂、高血糖等代謝綜合征相關(guān)癥狀。HCV誘導(dǎo)患者出現(xiàn)胰島素抵抗、高血脂、肝臟脂肪變性等代謝癥狀，而肥胖、胰島素抵抗及肝臟脂肪變性等癥狀有助于HCV的復(fù)制，從而削弱抗病毒藥物的治療效果?？贡透窝姿幬镆种艸CV復(fù)制有助于調(diào)節(jié)代謝，而合并使用胰島素增敏劑能提高抗丙型肝炎藥物的治療效果。針對(duì)丙型肝炎合并代謝綜合征的患者，需要同時(shí)進(jìn)行抗病毒和調(diào)節(jié)代謝治療。因此本論文對(duì)抗病毒藥物和調(diào)節(jié)代謝藥物分別進(jìn)行了機(jī)制研究。人類宿主細(xì)胞因子APOBEC3G(hA3G)是一種胞嘧啶核苷脫氨酶，其能夠抑制包括人類免疫缺陷病毒1型
4、(HIV-1)在內(nèi)的一系列病毒。在研究hA3G的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)有助于hA3G穩(wěn)定的化合物顯著抑制HCV的復(fù)制。由于HCV與HIV不同，為單股正鏈RNA病毒，屬黃病毒科，這提示hA3G也可能是HCV復(fù)制的限制性因子。因此，本論文第一部分首先探索了hA3G在HCV復(fù)制中起到的作用。將外源性hA3G轉(zhuǎn)染入感染了HCV的Huh7．5細(xì)胞，HCV的復(fù)制受到抑制；用RNAi下調(diào)內(nèi)源性hA3G的表達(dá)導(dǎo)致HCV復(fù)制的增強(qiáng)。外源性HIV-1Vif蛋白能降低細(xì)胞內(nèi)hA3G的水平，從而增強(qiáng)HCV增殖。這些結(jié)果提示，hA3G是HCV復(fù)制的限制性
5、因子。由于HIV-1編碼的Vif蛋白能特異性地下調(diào)hA3G的含量，因此，Vif蛋白的存在，有助于HCV的復(fù)制，這可能是HIV-1陽(yáng)性患者常常出現(xiàn)HIV-1／HCV合并感染的原因之一。用兩個(gè)已知的可以提高h(yuǎn)A3G穩(wěn)定性的化合物RN．5或IMB．26處理HCV感染的Huh7．5細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)hA3G的表達(dá)水平增加，相應(yīng)的HCV復(fù)制受到抑制。這些化合物并不抑制HCV病毒酶，但卻增加了進(jìn)入HCV病毒顆粒中的hA3G的水平。但是，應(yīng)用感染克隆測(cè)序并沒有在新復(fù)制的HCV基因組里檢測(cè)到G'-)A的高突變率，這表明hA3G對(duì)于HCV的抑
6、制作用是基于一個(gè)與抗HIV-l作用不同的新的抗病毒機(jī)制。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，hA3G和其穩(wěn)定劑在HCV復(fù)制子系統(tǒng)中均對(duì)HCV的復(fù)制無(wú)影響，提示hA3G對(duì)HCV復(fù)制的限制作用可能發(fā)生在HCV復(fù)制周期的早期或晚期。穩(wěn)定hA3G的小分子化合物RN．5即使在大劑量灌胃或腹腔注射處理小鼠后，沒有觀察到明顯的毒副作用。上述所有結(jié)果說(shuō)明hA3G是HCV復(fù)制的細(xì)胞內(nèi)限制性因子并且可能成為藥物靶點(diǎn)。鹽酸小檗堿(Berberine，BBR)是一種從中草藥中提取出的單體化合物(生物堿)。其多年來(lái)被用于控制2型糖尿病患者的血糖水平。在人體和動(dòng)物模
7、型中，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文BBR都能夠起到改善肥胖，控制血糖、血脂和肝臟脂肪變性的作用，但是其機(jī)制仍然不明確。因此本論文第二部分重在研究BBR改善代謝的機(jī)制。本研究，證實(shí)BBR在食源性肥胖模型(DIO)小鼠中增加能量消耗。給予小鼠含BBR的食物，小鼠的氧耗量和二氧化碳的產(chǎn)生增加，而其運(yùn)動(dòng)量和食物攝入量沒有變化。經(jīng)過(guò)BBR治療，小鼠的體重增長(zhǎng)下降，肝臟脂肪變性改善，血脂下降，由高脂飼料(HFD)引起的胰島素抵抗也得到改善。在肝臟里，BBR增加SIRTl(Sirtuin1)的蛋白表達(dá)和SIRTl蛋白絲氨酸46位(Se
8、r46)的磷酸化、升高氧化型和還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+／NADH)的比率，同時(shí)下調(diào)C．Jun氨基末端激酶1(JNKl)的活性。在小鼠的肝臟細(xì)胞(1clc7)中，BBR的處理可以時(shí)間依賴性地增加SIRTl的蛋白表達(dá)和NAD+的水平，降低JNK的活性。在BBR的處理下SIRTl的酶活性提高。在BBR喂養(yǎng)的小鼠中，硬酯酰輔酶
