曲古抑菌a對膽囊癌細胞增殖及對p21、survivin基因的影響

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時間:2019-02-17

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1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文曲古抑菌A對膽囊癌細胞增殖及對p21、survivin基因的影響姓名:蘇龍豐申請學位級別:碩士專業(yè):外科學指導教師:張啟瑜2012-05-24溫州醫(yī)學院碩士畢業(yè)論文曲古抑菌素A誘導膽囊癌細胞GBC-SD凋亡的實驗研究中文摘要目的:采用不同濃度TSA或不同時間的同濃度TSA作用于膽囊癌細胞GBC-SD,通過抑制率及細胞凋亡率來研究TSA對膽囊癌細胞GBC-SD的凋亡誘導作用。并通過不同濃度TSA作用GBC—SD細胞后P21及survivin的變化,探討TSA誘導膽囊癌細胞GBC-SD凋亡與P21和survivin表達的關系,以及在TSA誘導膽囊癌細胞GBC-SD凋亡機制的

2、作用。方法:125一1000nmol/L范圍內不同濃度的TSA及250nmol/LTSA不同時間點作用于體外培養(yǎng)的GBC—SD細胞,采用CCK-8法檢測TSA對膽囊癌細胞GBC—SD增殖的抑制作用,流式細胞術AnnexinV—FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡率。應用相對定量RT-PCRp21基因、survivin基因的mRNA表達及Western—blot檢測p21、survivin蛋白含量表達的變化。結果:CCK一8法檢測顯示TSA能有效抑锘IJGBC—SD細胞的增殖(P(0。05),且具有明顯的時間和濃度依賴性。流式細胞術AnnexinV—FITC/PI雙染法檢測顯示膽囊癌細胞GBC—S

3、D凋亡率隨著TSA濃度的增加而增加。相對定量RT-PCR及Western-blot檢測顯示P21基因mRNA及蛋白含量隨藥物作用濃度增加而增高,Survivin基因mRNA及蛋白含量隨藥物作用濃度的增加而降低。結論:(1)TSA具有對膽囊癌細胞GBC—SD的增殖抑制作用,并具有時間濃度依賴性。(2)TSA具有對誘導膽囊癌細胞GBC—SD凋亡的作用,并具有濃度依賴性。(3)TSA誘導膽囊癌細胞GBC—SD凋亡的機制可能通過上調P21基因和下調Survivin基因有關。關鍵詞:膽囊癌細胞:組蛋白乙?;敢种苿磺乓志谹(TSA):p21帆肛伸1;SIJrvjvin_4——溫州醫(yī)學院碩士畢業(yè)論

4、文TheEffectofTrichostatinAonTheProliferationandTheExpressionofP21andSurvivinGenesofGallbladderCellCarcinomaLineGBC.SDAbstractObjectiveTreatmentonhumangallbladdercancer∞llsGBC—SDbyusingdifferentconcentrationsofTSAanddifferenttimewithcertainconcentration,thispaperstudiesgallbladdercancercellsGBC—SDapo

5、ptosisinductionpathwaythroughtheinhibitionrateandapoptosisrate,whichprovideclinicalapplicationwiththeoreeticalbasis.ThenbytestingtheviariationofP21andsurvivingeffectedbydifferentTSAconcentration,thispaperexplorestherelationshipbetweeninducedTSAgallbladdercancercellsGBC—SDapoptosisandP21andsurvivine

6、xpression,todiscusstheroleofTSAintheapoptosismechanismsofgallbladdercancercellsGBC-SD.Methods:AfterhavingtreatedthehumanGBC.SDcellsinvitroculture24hoursbyusingdifferentconcentrationsTSAfrom125to1000nmol/Lrangeand250nmol/LTSAdifferenttimepoints.wedetectTSAgallbladdercancercellsGBC—SDproliferationinh

7、ibitionwithCCK.8assay,analyzethecellapoptosisratebyflowcytometryusingAnnexinV—FITC/PIapoptosisdetectionkit,measurethemRNAexpressionofp21andsurvivinbyrelativequantitativeRT.PCRandtheproteinexpressionofp21and

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