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《替米沙坦對nafld大鼠肝臟及大網膜脂肪組織中pparγ表達的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文替米沙坦對NAFLD大鼠肝臟及大網膜脂肪組織中PPARγ表達的影響姓名：姬霞申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學指導教師：蔣樹林201203中文摘要替米沙坦對NAFLD大鼠肝臟及大網膜脂肪組織中PPARY表達的影響摘要目的：非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfatliverdisease，NAFLD)是排除病毒，乙醇，化學物質，放射線及自身免疫性疾病等損肝因素所致的以肝細胞脂肪變性為主要病理改變的慢性肝臟疾病。其病理過程大致分為單純性脂肪肝，脂肪性肝炎，脂肪性肝硬化3個類型。NAFLD與遺傳、環(huán)
2、境、代謝等因素有關，美國內分泌醫(yī)師協(xié)會已將其列為代謝綜合征(matebolicsyndrome，MS)的組成成分之一。近年來，隨著生活方式和飲食結構的改變，NAFLD發(fā)病率有逐漸上升的趨勢，目前已成為嚴重危害人類健康的肝臟疾病之一。NAFLD的發(fā)病機理目前存在“二次打擊"學說：第一次打擊涉及胰島素抵抗，由于機體的自我防御機制，此階段可有抗細胞凋亡通路的活化，脂聯(lián)素、IL．6等抗炎因子的表達增加，因此病變存在可逆性；第二次打擊主要是活性氧代謝產物的增加所致的脂質過氧化反應，ROS與生物膜的磷脂等多不飽和脂肪酸的側鏈結合，導致
3、生物膜的流動性改變，通透性增加，核酸、酶等大分子功能受損，使脂肪變性的肝細胞發(fā)生凋亡壞死。作為NAFLD發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，胰島素抵抗已成為很多藥物治療該病的靶點。白色脂肪組織(whiteadiposetissue，WAT)是機體重要的內分泌器官，脂肪細胞因子水平(如IL．8，NGF)上升與代謝異常及胰島素抵抗存在因果關系，并導致肝臟脂質蓄積。PPAR丫是一種配體激活的核激素受體，在白色脂肪組織中高表達，具有調節(jié)脂肪酸代謝，誘導脂肪細胞分化的作用，在前脂肪細胞到成熟脂肪細胞的演變過程中表達量逐漸增加，影響著脂肪細胞的生長發(fā)育和
4、功能狀態(tài)，進而影響白色脂肪組織的內分泌功能。適度抑制其表達可以起到減輕胰島素抵抗的作用。解耦連蛋白2(uncouplingprotein2，UCP2)屬于解耦連蛋白家族，可以介導質子躍遷，使能量以熱能的形式釋放，減輕細胞氧化應激，在生熱及能量代謝中意義重大。NAFLD時，UCP2表達量增加，是一種適應性反應。替米沙坦，一種傳統(tǒng)的血管緊張素II受體拮抗劑，不僅可以抑制ATl中文摘要受體，還可作為PPARY的部分激動劑，起到減輕胰島素抵抗的作用。有研究證實替米沙坦可促進肝組織中PPAR1，的表達，但在白色脂肪組織中起何種作用目
5、前尚未有研究報道。本實驗應用高脂飲食建立NAFLD胰島素抵抗大鼠模型，觀察觀察替米沙坦干預前后血脂血糖，胰島素敏感性，轉氨酶的變化情況，并檢測肝組織及大網膜組織PPAR丫及肝組織中UCP2的表達變化，探討替米沙坦治療NAFLD的機制。方法：l動物模型的制備：選取雄性(SpragueDawley)SD大鼠，正常對照組喂飼普通飼料，高脂對照組飼以84％普通飼料+高脂飼料，配方為：l％膽固醇、5％蛋黃粉、10％豬油，實驗動物自由進食及飲水。2實驗分組：將SD大鼠40只隨機分為正常對照組(NCgroup，n=15)、高脂對照組(F
6、Cgroup，n=15)，高脂+替米沙坦干預組(FTgroup，n=10)。飼養(yǎng)12周末時隨機取NC及FC組各5只做高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗及肝組織的HE染色，確定造模成功。后FT組給予替米沙坦(5mg／kg．d)灌胃并予高脂飲食，正常及高脂對照組則以等容量的生理鹽水灌服，每日一次，共持續(xù)4周。，3大鼠體重、肝濕重和肝指數(shù)的變化：應用電子天平稱取體重及肝濕重，并根據以下公式計算肝指數(shù)：肝濕重／體重x100％。4胰島素敏感性測定：我們以高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗技術(euglycermichyperinsulinemiacla
7、mptechnique)在穩(wěn)態(tài)時葡萄糖的輸注速率(GIR)來評估胰島素的敏感性。5肝組織學檢查：應用石蠟切片，采用蘇木精一伊紅(hematoxylin．eosin，HE)染色的方法，在光鏡下觀察肝臟病理學的變化情況。6大網膜組織中PPAR丫mRNA，肝組織中PPAR丫mRNA、ATlmRNA及UCP2mRNA表達：采用半定量逆轉錄．聚合酶鏈反應(1洱PCR)的方法，平行觀察肝組織／大網膜組織(WAT)PPARYmRNA含量變化及肝組織PPAR仆ATl、UCP2mRNA的表達水平變化。采用磷鉬酸比色法測定肝組織ATP含量。7
8、血清生化學的檢測：取血清樣本，在河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院生化室的協(xié)助下，應用全自動血清生化分析儀檢測轉氨酶及血脂等生化指標的變中文摘要化。．、‘。結果：1各組大鼠的體重、肝濕重和肝指數(shù)的變化：在16周末成功的復制了大鼠NASH的模型。FC組的大鼠體重(597．51-415．62)、肝濕重(21．934-1．
