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《產(chǎn)殼聚糖酶海洋微生物菌株的篩選鑒定、發(fā)酵產(chǎn)酶條件和酶解產(chǎn)物性能研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、浙江大學碩士學位論文產(chǎn)殼聚糖酶海洋微生物菌株的篩選鑒定、發(fā)酵產(chǎn)酶條件和酶解產(chǎn)物性能研究姓名：戴秋萍申請學位級別：碩士專業(yè)：食品科學與工程指導教師：葉興乾2012-05-26浙江大學碩士學位論文摘要海洋微生物由于具有物種、基因組成和生態(tài)功能的多樣性，成為酶制劑開發(fā)的新來源。海洋環(huán)境中甲殼質(zhì)的含量非常豐富，為尋找產(chǎn)殼聚糖酶的新菌株和新型殼聚糖酶提供可能。本文采用富集培養(yǎng)和透明圈法，對海洋生物與海洋養(yǎng)殖環(huán)境樣品中產(chǎn)殼聚糖酶的野生菌株進行篩選，獲得1株高產(chǎn)殼聚糖酶的微生物菌株XW-1002，經(jīng)常規(guī)形態(tài)、生理生化反應和分子生物學鑒定，屬于節(jié)桿菌屬(
2、Arthrobactersp)。通過對Arthrobacter?。甔W-1002發(fā)酵條件的研究，確定了最佳產(chǎn)酶發(fā)酵條件為：殼聚糖底物濃度為3％、發(fā)酵溫度30。C、250ml三角瓶裝量為50．100ml、接種量為3％。在上述培養(yǎng)條件下，24h時搖瓶中發(fā)酵液的最高酶活力為0．414U／ml。菌株Arthrobactersp．XW-1002產(chǎn)生的是誘導型胞外酶。采用端基法測定了菌株Arthrobactersp．XW-1002酶解產(chǎn)物．殼寡糖的平均聚合度和分子量，采用分光光度法測定殼寡糖的抑菌活性，利用種子水培法測定殼寡糖的促水稻生長情況。結(jié)果表
3、明酶解10、20、30分鐘的殼寡糖平均聚合度分別為5．4、2．66和1．7，平均分子量為870．16、446．25和292．04；殼寡糖對多種細菌和酵母類真菌有明顯的抑制作用，但對水稻紋枯病菌的抑制作用不明顯，抑茵效果隨著殼寡糖作用濃度的增加而增強；低濃度的酶解產(chǎn)物對水稻幼苗的生長有促進作用，高濃度的酶解產(chǎn)物對水稻幼苗生長有抑制作用。為提高野生型產(chǎn)殼聚糖酶菌株Arthrobactersp．XW-1002的產(chǎn)酶活力，本文采用化學誘交劑硫酸二乙酯(DES)和紫外照射兩種方法對其進行誘變處理，得到2株突變株，分別命名為W1和UV-1。結(jié)果表明：
4、DES對菌株Arthrobactersp．XW-1002的最適誘變劑量為2％，最適誘變時間為50min，突變菌株YY-1的殼聚糖酶活力穩(wěn)定在2．50U／ml左右，較誘變前菌株提高了1．7倍；紫外突變菌株Uv-1酶活為2．50U／ml，比野生型菌株酶活提高了1．39倍，菌株生長周期從8天縮短至7天。關(guān)鍵詞：殼聚糖酶；海洋微生物；節(jié)桿菌屬；殼寡糖；生理活性；誘變II浙江大學碩士學位論文AbstractThemariIlemicroorganismhasbecameanewresourceofenzymepreparation，becausei
5、thasthediversityofspecies，genecompositionandecologicalfunction．Witlltheabundanceofchitinsinthemarineenvironment，SOithastremendouspossibilitiestofindthechitosanolyticmicrobesandnewchitosanase．Chitosanase-producingstrainXW-1002，whichWasisolatedfromXuwangculturefactoryinXiao
6、shatownofzhoushancitybyusingtheenrichmentcultureandthetransparentcirclemethods，WasclassifiedintoArthrobacterbasedonmorphology，analysisofphysiologyandbiochemistryandmolecularbiologymethods．Ithasgrownwellinthechitosanpowdermedium，theoptimumfermentationconditionswere"ferment
7、ationtemperature30"C，chitosanconcentration3％，250mlerlenmeyerflaskcontaining50-100mlmediumandinoculationamount3％．ThechitosanasefromArthrobacterXW．1002strainWasaninducibleandsecretedextracellarenzyme．Thedegreeofpolymerizationwasmeasuredbyterminalanalysis，theantibactericalac
8、tivityofchitooligosaccharideswastestedbyspectrophotometricmethod，andtheeffectstoplantgrowthingwe
