寧波北侖地區(qū)急性腹瀉患者副溶血弧菌表型及分子特征研究

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)寧波北侖地區(qū)急性腹瀉患者副溶血弧菌表型及分子特征研究⑧論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:論文評(píng)閱人l:王賢軍教授杭州市第一人民醫(yī)院評(píng)閱人2:評(píng)閱人3:評(píng)閱人4:評(píng)閱人5:答辯委員會(huì)主席:委員1:委員2:委員3:委員4:委員5:答辯日期:2014年5月22日萬(wàn)方數(shù)據(jù)

2、

3、IIIIIIIIlUIIIIIIUlY2743749浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得逝望盤(pán)堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證

4、書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:;和f靠·簽字日期:鈔忡年,月1El學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解逝’江盤(pán)堂有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝望盤(pán)堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文作者簽名:昂瑰導(dǎo)師簽名:簽字日期:伽l平年,月1日簽字日期:妒,p年歹月卅日萬(wàn)方數(shù)據(jù)浙江大學(xué)碩士學(xué)

5、位論文致謝在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院攻讀同等學(xué)力碩士學(xué)位期間,得到過(guò)許多人的幫助,謹(jǐn)向所有關(guān)心我的師長(zhǎng)、同事、朋友和親人致以衷心的感謝。衷心感謝我的導(dǎo)師陳瑜教授接受我并給我一個(gè)寬松又富有挑戰(zhàn)性的學(xué)習(xí)和科研工作平臺(tái),并給予很多無(wú)私的幫助。同時(shí)老師的認(rèn)真銳意進(jìn)取的執(zhí)著精神為學(xué)生樹(shù)立了榜樣。感謝陳曉老師在課題研究和論文寫(xiě)作過(guò)程中,一直都給予我精心的指導(dǎo)和幫助,幫助我解決了許多學(xué)習(xí)科研難題。感謝同門(mén)師兄韓東升碩士在實(shí)驗(yàn)操作和論文寫(xiě)作中指導(dǎo)我,并給予我很多無(wú)私的幫助,你刻苦認(rèn)真的學(xué)>--j態(tài)度是我學(xué)>--j的榜樣。感謝科室領(lǐng)導(dǎo)周方滿(mǎn)主任給予的支持和幫助,感謝同事、朋友的

6、關(guān)心和熱情的幫助。特別感謝家人自始自終對(duì)我的無(wú)私關(guān)愛(ài),在工作、生活和學(xué)>-j上對(duì)我的支持,成長(zhǎng)的路上都是你們?cè)诒澈竽馗冻?,絕不辜負(fù)你們的殷切期望。最后,衷心感謝參加論文評(píng)審和答辯的各位專(zhuān)家學(xué)者,并致以崇高的敬意。二零一四年三月萬(wàn)方數(shù)據(jù)浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要寧波北侖地區(qū)急性腹瀉患者副溶血弧菌表型及分子特征研究浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)碩士研究生導(dǎo)師謝紅意陳瑜教授中文摘要目的:副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus,VP)是一種革蘭陰性嗜鹽性弧菌,廣泛存在于海水和海產(chǎn)品中。1950年在日本副溶血弧菌首次發(fā)現(xiàn)并被認(rèn)為是引起食物

7、中毒的重要致病茵,在我國(guó),副溶血弧菌感染引發(fā)的暴發(fā)事件居微生物食源性疾病爆發(fā)的首位。浙江寧波位于我國(guó)東南沿海,海產(chǎn)品消費(fèi)比較盛行,人們又喜歡食用生的或者未煮熟的海產(chǎn)品,因此副溶血弧菌是引起食物中毒最主要的病原菌。本課題通過(guò)收集寧波北侖區(qū)急性腹瀉患者糞便標(biāo)本,通過(guò)檢測(cè)血清學(xué)凝集試驗(yàn),可以知道寧波北侖區(qū)溶血弧菌血清型構(gòu)成譜;通過(guò)毒力基因檢測(cè)及分子分型分析,可以為副溶血弧菌感染的防控提供分子流行病學(xué)依據(jù),這為開(kāi)展副溶血弧菌的持續(xù)監(jiān)測(cè)研究提供依據(jù),并為進(jìn)一步的研究工作奠定基礎(chǔ)。方法:2012年4月至2012年10月,從北侖區(qū)人民醫(yī)院采集急性腹瀉患者的糞便標(biāo)本

8、,用常規(guī)微生物檢驗(yàn)程序?qū)ΤR?jiàn)腸道致病菌進(jìn)行分離培養(yǎng)及鑒定。對(duì)分離的副溶血弧菌菌株開(kāi)展血清學(xué)凝集試驗(yàn)、利用PCR技術(shù)檢測(cè)毒力基因檢測(cè)及多位點(diǎn)序列分型(池ST)分析。II萬(wàn)方數(shù)據(jù)浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要結(jié)果:1.2012年4.10月共收集腹瀉患者的糞便共962份,共分離出副溶血弧菌71株,分離率為7.4%(71/962),列細(xì)菌性病原第二位。感染病例男女性別比為1.73:1(45例:26例),年齡范圍為16.61歲,其中主要集中在20.45歲(69.0%,49/71)。2.本次研究共有16種O、K血清型組合,其中03:K6型是最主要的血清型,共44株

9、,占62.0%;04:K8(5株,7.0%)、01:K56(3株,4.2%),另有3(4.2%)株未鑒定出O、K型別,歸類(lèi)于OUT:KUT型。3.利用PCR對(duì)71株副溶血弧菌進(jìn)行tdh、trh、tlh毒力基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn):所有副溶血弧菌砌基因均陽(yáng)性,98.6%的菌株(70株)tdh基因陽(yáng)性,僅3株為trh陽(yáng)性。基因型表現(xiàn)為:砌+砌+trh一菌株67株,砌+砌十印辦+菌株3株和砌+tdh—trh一菌株l株。通過(guò)對(duì)大流行群菌株遺傳標(biāo)志性基因的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),寧波北侖區(qū)急性腹瀉患者感染的副溶血弧菌主要是大流行菌株(tdh+,trh.和toxRS/new+),共47株

10、(66.2%);非大流行菌株共24株(33.8%)。36株大流行菌株攜帶orf8基因,占所有大流行菌株的76

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