地氟醚預(yù)處理調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞nf-kb振蕩

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1、萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文後旦大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10246學(xué)號：09211210028地氟醚預(yù)處理調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞NF-KB振蕩一fluranepreconditioninginducesoscillationofNF-KBDestlUraneindUcesoscillationNFKBDreC0nnltlonlng-inendothelialcells系：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院業(yè)：麻醉學(xué)名：易娟指導(dǎo)教師：朱彪副教授完成曰期：2012年4月22日本課題承2009年度國家自然科學(xué)基金項目資助院專姓萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄中文摘要??????????????????

2、????????????i英文摘要??????????????????????????????3引言???????????????????????????????5第一部分地氟醚預(yù)處理對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的保護作用????7材料與方法???????????????????????????7結(jié)果?????????????????????????????????????。11討論?????????????????????????????????????。14第二部分地氟醚預(yù)處理引起臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NF—KB振蕩和抗凋亡蛋白產(chǎn)生??????????????????

3、???????????????????????。16材料與方法??????????????????????????．16結(jié)果?????????????????????????????????????．．19討論?????????????????????????????????????．．27參考文獻(xiàn)?????????????????????????????．30致謝????????????????????????????????????????．34文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????．35附錄?????????????????????????

4、???????????????．42英文縮略語??????????????????????????．42萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文地氟醚預(yù)處理調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞NF．KB振蕩中文摘要第一部分地氟醚預(yù)處理對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的保護作用目的：分離培養(yǎng)原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(humanumbilicalveinendothelialceils，HUVECs)，研究地氟醚預(yù)處理對HUVECs缺氧／復(fù)氧損傷所起的保護作用。方法：采用膠原酶灌注消化法分離培養(yǎng)HUVECs，以Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫熒光方法進(jìn)行鑒定。將細(xì)胞分為三組：對照組(CoN組)，缺氧／復(fù)氧組(A／R組)和地氟醚預(yù)處理

5、組(DesPC組)，DesPC組在缺氧／復(fù)氧損傷前先給予30分鐘I～I(xiàn)AC地氟醚處理。用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的重組膜粘連蛋白一5(AnnexinV-FITC)和碘化丙啶(PI)標(biāo)記，流式細(xì)胞儀計數(shù)凋亡細(xì)胞，四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定細(xì)胞存活率，采用WST-1(water—solubletetrazoliumsalt)法測定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活力。結(jié)果：原代HUVECs生長5—7天后呈單層鋪路石樣排列，細(xì)胞為扁平多角形，Ⅷ因子相關(guān)抗原檢測為陽性。A／R組細(xì)胞凋亡率(35．73±5．43％，均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)與CON組(23．62±4．56％)相比明顯增加，經(jīng)過地氟醚

6、預(yù)處理后，DesPC組細(xì)胞凋亡(27．39±3．22％)較A／R組明顯下降。DesPC組細(xì)胞存活率(96．58±6．25％)明顯高于A／R組(86．25±3．6l％)。A／R組細(xì)胞內(nèi)SOD活力(23．55±7．84U／mgprotein)較CON組(38．86±6．40U／mgprotein)降低，DesPC組SOD活力(35．49±9．36U／mgprotein)與A／R組相比明顯增加。結(jié)論：本實驗成功培養(yǎng)出原代HUVECs，建立了體外缺氧／復(fù)氧模型。地氟醚預(yù)處理抑制臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧／復(fù)氧引起的細(xì)胞凋亡，保存細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶活性，從而具有一定的抗缺氧／復(fù)氧損傷效應(yīng)。

7、關(guān)鍵詞：地氟醚；預(yù)處理：缺氧／復(fù)氧；臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文第二部分地氟醚預(yù)處理引起臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NF．KB振蕩和抗凋亡蛋白產(chǎn)生目的：轉(zhuǎn)錄因子NF-KB參與調(diào)節(jié)吸入麻醉藥物預(yù)處理引起的缺氧／復(fù)氧損傷保護作用。探討地氟醚預(yù)處理對HUVECsNF-KB以及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，以明確地氟醚預(yù)處理對缺氧／復(fù)氧損傷的保護機制。方法：選用原代培養(yǎng)的HUVECs，將細(xì)胞分成6組：對照組(CoN組)，地氟醚組(DES組)，缺氧／復(fù)氧組(A／R組)，地氟醚預(yù)處理組(DesPC組)，BAY+DesPC組和