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《益氣養(yǎng)陰活血方治療糖尿病腎病的實驗研究及遠(yuǎn)期療效觀察》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中國中醫(yī)科學(xué)院博士學(xué)位論文益氣養(yǎng)陰活血方治療糖尿病腎病的實驗研究及遠(yuǎn)期療效觀察姓名：陳菲菲申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：中醫(yī)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：張寧20120531益氣養(yǎng)陰活血方治療糖尿病腎病的實驗研究及遠(yuǎn)期療效觀察中文摘要【研究背景】糖尿病腎病(DN)是糖尿病最常見和主要的慢性微血管并發(fā)癥，早期表現(xiàn)為尿中微量蛋白，繼而出現(xiàn)持續(xù)蛋白尿、水腫、高血壓、腎功能小全，最終發(fā)展至終木期腎病(ESRD)。DN時，腎小球系膜細(xì)胞是主要的受累細(xì)胞，高血糖作為糖尿病最基本的生化特征，可激活胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)通路并增加其下游產(chǎn)物前列腺素E。(PGE。)、轉(zhuǎn)化生
2、長因子(TGF—B。)及纖維連接蛋白(FN)的表達，引起早期腎小球高濾過、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成增多，導(dǎo)致DN的發(fā)生、發(fā)展。目前關(guān)于中藥復(fù)方對DN時ERK通路的影響多數(shù)是動物體內(nèi)試驗，體外實驗報道較少，且多數(shù)側(cè)重在其非血流動力學(xué)效應(yīng)。中醫(yī)藥在防治DN方面有較大優(yōu)勢，國內(nèi)關(guān)于中醫(yī)藥治療DN的臨床研究一般療程較短，隨訪超過2年的報道較少，多數(shù)采用隨機對照試驗，用藥及治療方案單一，臨床推廣性低，且評價指標(biāo)側(cè)重在實驗室指標(biāo)及臨床癥狀，缺少對終點事件的評價。本課題乃中國中醫(yī)科學(xué)院優(yōu)勢病種的后續(xù)研究，益氣養(yǎng)陰活血方是導(dǎo)師治療DN的經(jīng)驗方，短期療效觀察
3、可以降低DN患者尿蛋白排泄率，改善生存質(zhì)量，但其作用機制之前并未做相關(guān)實驗研究，且缺乏遠(yuǎn)期療效觀察?！狙芯磕康摹?、實驗研究：探討益氣養(yǎng)陰活血方通過抑制腎小球系膜細(xì)胞的增殖、ERK通路的活化及其下游產(chǎn)物的表達而治療糖尿病腎病的作用機制。2、臨床研究：整體評價以益氣養(yǎng)陰活血方為主的中醫(yī)辨證治療糖尿病。腎病的遠(yuǎn)期療效，發(fā)掘中醫(yī)治療本病的特色與優(yōu)勢，為完善中醫(yī)規(guī)范化治療方案和整體療效評價體系提供參考?！狙芯糠椒ā縧、實驗研究1．1研究對象：大鼠。腎小球系膜細(xì)胞。1．2干預(yù)措施：以高糖作為刺激因素誘導(dǎo)系膜細(xì)胞增殖及ERK通路活化，予益氣養(yǎng)陰活血方和
4、福辛普利含藥血清加以干預(yù)，根據(jù)培養(yǎng)條件不同，將系膜細(xì)胞分為6組：正常血糖組、高糖組、高糖+福辛普利組和高糖+高、中、低濃度中中國中醫(yī)科學(xué)院2009級博士研究生學(xué)位論文藥組。1．3觀察指標(biāo)：培養(yǎng)6h、12h、24h、48h、72h后，用Western—blot法檢測系膜細(xì)胞磷酸化ERK1／2(pERK1／2)蛋白的表達，Realtime—PCR法檢測系膜細(xì)胞TGF—B，基因的表達，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中PGE。和FN的含量。在培養(yǎng)24h、48h、72h時，用4一甲偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測系膜細(xì)胞的增殖。2、臨床研究2．1研究對象：200
5、6年12月～2009年12月問在望京醫(yī)院住院或者門診治療的糖尿病腎病患者。2．2干預(yù)措施：以益氣養(yǎng)陰活血方為主的中醫(yī)辨證治療作為暴露因素，將既往病例劃分為兩個隊列：(1)中西醫(yī)結(jié)合隊列(治療組)，接受以益氣養(yǎng)陰活血方為主的中醫(yī)辨證治療+西醫(yī)基礎(chǔ)治療；(2)西醫(yī)隊列(對照組)，接受單純西醫(yī)基礎(chǔ)治。對兩組病例進行回顧性觀察。2．3觀察指標(biāo)：蛋白尿、腎功能進展，終末期腎病(ESRD)和死亡各類終點事件；實驗室指標(biāo)療效、臨床癥狀療效和疾病綜合療效；生存質(zhì)量及營養(yǎng)狀態(tài)評估?！狙芯拷Y(jié)果】l、實驗研究1．1高糖刺激24h、48h后能顯著促進系膜細(xì)胞增殖，
6、但至72h，高糖促細(xì)胞增殖趨勢下降，與正常組相比無顯著差異。福辛普利和高濃度中藥含藥血清組均可明顯抑制高糖引起的系膜細(xì)胞增殖，兩組間未見顯著差異。中濃度中藥組僅在24h表現(xiàn)出明顯的抑制作用，低濃度中藥組均未見抑制作用。1．2高糖刺激6h后系膜細(xì)胞中pERKl／2蛋白的表達即明顯升高，隨時間延長表達逐漸增高，24h達到高峰，后逐漸減弱，至72h恢復(fù)至與正常組同等表達水平。福辛普利和高濃度中藥組在6h一48h均顯著抑制ERK的活化，兩組在各時間點均無明顯差異。中濃度中藥組在6h一24h亦表現(xiàn)出明顯的抑制作用。而低濃度中藥組僅在12h可見明顯的抑
7、制作用。1．3與正常組相比較，高糖組TGF—p．mRNA的表達從12h開始明顯升高，F(xiàn)N的表達則從24h開始明顯升高，隨著時間延長，至72h升高趨勢更為顯著。高濃度中藥組在各時間點均可顯著的抑制TGF一6．mRNA、FN表達的升高。福辛普利益氣養(yǎng)陰活血方治療糖尿病腎病的實驗研究及遠(yuǎn)期療效觀察組在早期有明顯抑制作用，中濃度中藥組在后期有明顯抑制作用。低濃度中藥組均未見抑制作用。1．4隨著ERK通路的激活，高糖組PGE。的表達在6h即明顯升高，48h表達量達到峰值，至72hPGE：的表達較正常組仍有明顯升高，但表達量較48h有所降低。高濃度中藥
8、組在12—48h可明顯抑制PGE：的升高，中濃度中藥組在24h、48h亦可明顯抑制PGE。的升高。福辛普利組和低濃度中藥組均未見抑制作用。2、臨床研究本研究共納入病例105例，其
