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《牛病毒性腹瀉粘膜病熒光定量rt-pcr檢測(cè)方法的建立》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)：S855.3學(xué)校代碼：10758密級(jí)：公開(kāi)學(xué)號(hào)：09020274碩士學(xué)位論文牛病毒性腹瀉/粘膜病熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立TheMethod-basedFluorescentQuantitativeRT-PCRforDetectionofBovineViralDiarrhea/MucosalDisease研究生姓名郭春娟導(dǎo)師姓名及職稱(chēng)冉多良教授學(xué)位門(mén)類(lèi)級(jí)別農(nóng)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)臨床獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物分子病毒學(xué)所在學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院新疆·烏魯木齊二〇一二年六月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工
2、作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育單位的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名：時(shí)間：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)新疆農(nóng)業(yè)大
3、學(xué)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以公布（包括刊登）論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名：時(shí)間：年月日導(dǎo)師簽名：時(shí)間：年月日本文是自治區(qū)高技術(shù)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目“牛病毒性腹瀉/粘膜病檢測(cè)試劑盒研制與核酸疫苗構(gòu)建”（項(xiàng)目編號(hào)：201010101）的部分研究成果課題主持人:冉多良（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)）牛病毒性腹瀉/粘膜病熒光定量RT-PCR方法的建立摘要牛病毒性腹瀉/粘膜病(Bovineviraldiarrhea/mucosaldisease，BVD/MD)，由牛腹瀉/粘膜病毒引起的，是黃
4、病毒科、瘟病毒屬的成員之一，在牛的病原學(xué)上具有很重要的地位。目前為止，還沒(méi)有有效的預(yù)防和控制BVDV的措施。因此，建立高效快速的檢測(cè)方法，對(duì)于該病的早發(fā)現(xiàn)，早防治具有重要作用。本文根據(jù)BVDV5'-UTR區(qū)的高保守性的特點(diǎn)，通過(guò)引物、探針設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化，分別建立了檢測(cè)BVDV的通用型RT-PCR方法、通用型熒光定量RT-PCR方法、同時(shí)檢測(cè)BVDVⅠ型和Ⅱ型病毒的雙重?zé)晒舛縍T-PCR方法。其次，通過(guò)引物設(shè)計(jì)和搭橋法PCR擴(kuò)增，獲得BVDV內(nèi)標(biāo)熒光PCR擴(kuò)增模板，并構(gòu)建了含內(nèi)標(biāo)物的BVDV通用型熒光定量RT-PCR方法
5、。上述方法具有較好的特異性、靈敏度與可重復(fù)性，內(nèi)標(biāo)物的構(gòu)建還可對(duì)反應(yīng)過(guò)程進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。上述方法的建立，達(dá)到對(duì)該病快速、靈敏、準(zhǔn)確檢測(cè)的目的。關(guān)鍵詞：牛粘膜腹瀉病病毒；RT-PCR；熒光定量RT-PCR；診斷方法建立ITheMethod-basedFluorescentQuantitativeRT-PCRforDetectionofBovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseAbstractBovineviraldiarrhea/mucosaldisease(Bovineviraldia
6、rrhea/mucosaldiseasetheBVD/MD)，causedbyBovineviraldiarrhea/mucosalvirus,thisvirusistheFlaviviridae,oneofthememberofthePestivirusgenus，havinganimportantpositionontheetiologyofthecattle.Sofar,thereisnoeffectivepreventionandcontrolmeasuresofBVDV.Therefore,toestablishar
7、apidandefficientdetectionmethodforearlydetectionofBVDVisveryimportantforearlyprevention.Inthisstudy,accordingtohighlyconservedcharacteristicsoftheBVDV5'-UTR,primersandprobeweredesigned,Throughoptimizedofreactionconditions,Establishedthegeneralpurposeofthedetectionof
8、BVDVbyRT-PCR,universalfluorescentquantitativeRT-PCRmethod,simultaneousdetectionofBVDVtypeⅠandtypeⅡvirusdualfluorescencequantitativeRT-PCRm
