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《牛病毒性腹瀉粘膜病熒光定量rt-pcr檢測方法的建立》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：S855.3學(xué)校代碼：10758密級：公開學(xué)號：09020274碩士學(xué)位論文牛病毒性腹瀉/粘膜病熒光定量RT-PCR檢測方法的建立TheMethod-basedFluorescentQuantitativeRT-PCRforDetectionofBovineViralDiarrhea/MucosalDisease研究生姓名郭春娟導(dǎo)師姓名及職稱冉多良教授學(xué)位門類級別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱臨床獸醫(yī)學(xué)研究方向動物分子病毒學(xué)所在學(xué)院動物醫(yī)學(xué)學(xué)院新疆·烏魯木齊二〇一二年六月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工
2、作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：時間：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)新疆農(nóng)業(yè)大
3、學(xué)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以公布（包括刊登）論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名：時間：年月日導(dǎo)師簽名：時間：年月日本文是自治區(qū)高技術(shù)發(fā)展計劃項目“牛病毒性腹瀉/粘膜病檢測試劑盒研制與核酸疫苗構(gòu)建”（項目編號：201010101）的部分研究成果課題主持人:冉多良（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)）牛病毒性腹瀉/粘膜病熒光定量RT-PCR方法的建立摘要牛病毒性腹瀉/粘膜病(Bovineviraldiarrhea/mucosaldisease，BVD/MD)，由牛腹瀉/粘膜病毒引起的，是黃
4、病毒科、瘟病毒屬的成員之一，在牛的病原學(xué)上具有很重要的地位。目前為止，還沒有有效的預(yù)防和控制BVDV的措施。因此，建立高效快速的檢測方法，對于該病的早發(fā)現(xiàn)，早防治具有重要作用。本文根據(jù)BVDV5'-UTR區(qū)的高保守性的特點，通過引物、探針設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化，分別建立了檢測BVDV的通用型RT-PCR方法、通用型熒光定量RT-PCR方法、同時檢測BVDVⅠ型和Ⅱ型病毒的雙重?zé)晒舛縍T-PCR方法。其次，通過引物設(shè)計和搭橋法PCR擴增，獲得BVDV內(nèi)標(biāo)熒光PCR擴增模板，并構(gòu)建了含內(nèi)標(biāo)物的BVDV通用型熒光定量RT-PCR方法
5、。上述方法具有較好的特異性、靈敏度與可重復(fù)性，內(nèi)標(biāo)物的構(gòu)建還可對反應(yīng)過程進行監(jiān)測，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。上述方法的建立，達到對該病快速、靈敏、準(zhǔn)確檢測的目的。關(guān)鍵詞：牛粘膜腹瀉病病毒；RT-PCR；熒光定量RT-PCR；診斷方法建立ITheMethod-basedFluorescentQuantitativeRT-PCRforDetectionofBovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseAbstractBovineviraldiarrhea/mucosaldisease(Bovineviraldia
6、rrhea/mucosaldiseasetheBVD/MD)，causedbyBovineviraldiarrhea/mucosalvirus,thisvirusistheFlaviviridae,oneofthememberofthePestivirusgenus，havinganimportantpositionontheetiologyofthecattle.Sofar,thereisnoeffectivepreventionandcontrolmeasuresofBVDV.Therefore,toestablishar
7、apidandefficientdetectionmethodforearlydetectionofBVDVisveryimportantforearlyprevention.Inthisstudy,accordingtohighlyconservedcharacteristicsoftheBVDV5'-UTR,primersandprobeweredesigned,Throughoptimizedofreactionconditions,Establishedthegeneralpurposeofthedetectionof
8、BVDVbyRT-PCR,universalfluorescentquantitativeRT-PCRmethod,simultaneousdetectionofBVDVtypeⅠandtypeⅡvirusdualfluorescencequantitativeRT-PCRm
