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《黃鱔抗苗勒氏管激素（amh）cdna克隆及其表達分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、中山大學理學碩士學位論文黃鱔抗苗勒氏管激素(AMH)cDNA克隆及其表達分析Anti．mullerianhormoneofthericefieldeeI(Monopterusa肪us)：cDNAcloninganditsmRNAexpression碩士生：趙靜導師：張為民教授專業(yè)：水生生物學答辯委員會(簽名)答辯主席：☆7嗽答辯委員：衰別肇私I擴’f．’／’凄蓬嗡匹抵芬蓬腧◇訊中山大學水生經(jīng)濟動物研究所暨廣東省水生經(jīng)濟動物良種繁育重點實驗室中國廣州二零零七年五月黃鱔抗苗勒氏管激素(AMH)cDNA克隆及其表達分析專業(yè)：水生生物學碩士
2、生t趙靜導師：張為民教授摘要抗苗勒氏管激素(anti．mullerianhormone，AMH)，也稱為苗勒氏管抑制物質(zhì)(Mullerianinhibitingsubstance，MIS)，是13一轉化生長因子(TGF—B)超家族成員之一，具有調(diào)節(jié)生殖細胞發(fā)育及分化的作用。在哺乳動物中，AMH由胚胎精巢的支持細胞產(chǎn)生，并引起苗勒氏管(在雌性中將分化成輸卵管、子宮等)的退化。AMH不僅在哺乳類性腺發(fā)育早期中發(fā)揮作用，而且在后期兩性的性腺發(fā)育也都起著調(diào)控作用。本文采用RT-PCR和RACE法，成功地從黃鱔間性時期的性腺中克隆得到AMHc
3、DNA的全長。該cDNA序列含有一個1644bp的開放讀碼框(Openreadingframe，ORF)，編碼了一含548個氨基酸的蛋白。氨基酸序列分析表明它的C端(羧基端)的保守區(qū)域有7個半胱氨酸殘基，這是TGF—B超家族特征之一。進化樹分析完表明，黃鱔AMH蛋白與其他魚類AMH蛋白處于同一簇，與舌齒鱸和比目魚AMH同源性最高，分別達63．8％和63．5％。采用RNA反義探針原位雜交技術，對AMH基因在黃鱔性腺中的表達情況進行了分析。結果表明：在雌性性腺中，AMHmRNA在濾泡細胞的顆粒細胞中表達；在問性性腺中，不僅在早期精巢的未
4、分化的支持細胞中檢測到AMH表達，同時在敗育的卵母細胞顆粒細胞中也檢測到其表達；在雄性性腺中，AMHmRNA在成熟精巢的支持細胞中表達。這種細胞表達模式以及在黃鱔性逆轉過程表達表明：AMH在黃鱔性腺發(fā)育和性逆轉過程中都起到一定的作用。關鍵詞黃鱔抗苗勒氏管激素原位雜交顆粒細胞支持細胞IIAnti．mullerianhormoneofthericefieldeeI(Monopterusalbus)：cDNAcloninganditsmRNAexpressionMajor：HydrobiologyName：JingZhaoSupervis
5、or：Pro．WeiminZhangAbstractAnti·Mfillefianhormone(AM嘞alsoknownasMullerian·inhibitingsubstance(Mis)，isaglycoproteinmemberofthetransforminggrowthfactor-B(TGF-8)superfamily．AMHisproducedbySertolicellsinfetaltestesandcausestheregressionoftheMulledanducts,whichinfemalcsdiffe
6、rentiateintoFaIlopiantubesanduterus．Inadditiontothemlcthemammalianbipotentialgonad,AMHalsoplaysnegativelyregulatoryroleinlaterdevelopmentofgonadinbOthsexes．AMHcDNAwasisolatedfromtheovotestisofthedcefieldeelbyRT-PCRandRACEtechnology,whichspanned1938bp,andtheopenreadingf
7、lame(ORF)encodedaproteinof548aminoacidresidues．RieefieldeelAMHcontainedaTGF-betadomainattheC-terminuswhichhasSeveucysteineresidues．SequenceanalysisrevealedthattheficeficldeelAMHwasclusteredwithAMHsofteleosts,andsharedhighesthomologieswithhomologuesfromEuropeanspabassan
8、dJapaneseflounder(63．8and63．5％respectively)．ThemRNAexpressionofficefieldeelAMHinthegonadwasexamined研tllinsimhybridiza
