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《tnf-α和lps對哮喘患者外周血單個核細胞il-33分泌的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號學(xué)號M201075543學(xué)校代碼10487密級碩士學(xué)位論文TNF-α和LPS對哮喘患者外周血單個核細胞IL-33分泌的影響學(xué)位申請人胡朝梁學(xué)科專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)碩士指導(dǎo)教師：趙建平教授答辯日期：2013年5月AdissertationsubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofMasterofMedicineTheEffectofTNF-αandLPSontheSecretionofIL-33inPBMCinPatientswithAsthmaCandi
2、date:HuChaoliangMajor:ClinicalMasterSupervisor:Prof.ZhaoJianpingHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaMay,2013獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。
3、學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文TNF-α和LPS對哮喘患者外周血單個核細胞IL-33分泌的影
4、響華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科碩士研究生：胡朝梁指導(dǎo)教授：趙建平教授中文摘要目的：本實驗通過研究TNF-α和LPS在體外刺激哮喘患者PBMC細胞24小時后，細胞內(nèi)IL-33的mRNA及上清中IL-33水平的改變來探討哮喘可能的發(fā)生機制，并研究可能影響IL-33分泌的幾種因素，最后通過地塞米松和p38、ERK通道阻滯劑干預(yù)來為哮喘的治療提供新的途徑。方法：從同濟醫(yī)院門診收集20例哮喘患者外周靜脈血約15mL，通過人外周血淋巴細胞分離液分離出PBMC,并用在六孔板中用1640培養(yǎng)基進行培養(yǎng)(每孔1*10^6個細胞)，本實
5、驗分為14個小組，給予不同刺激:（1）哮喘對照組；（2）哮喘+TNF-α組；（3）哮喘+LPS組；（4）哮喘+TNF-α+LPS組；（5）哮喘+DXM組；（6）哮喘+DXM+TNF-α組；（7）哮喘+DXM+LPS組；（8）哮喘+DXM+TNF-α+LPS組；（9）哮喘+PD98059+TNF-α組；（10）哮喘+PD98059+LPS組；（11）哮喘+PD98059+TNF-α+LPS組；12）哮喘+SB202190+TNF-α組；（13）哮喘+SB202190+LPS組；（14）哮喘+SB202190+TNF-α+LPS組。刺激24小時
6、后，每孔收集細胞和PBMCs培養(yǎng)后的上清。再用realtime-PCR的方法來檢測細胞內(nèi)IL-33mRNA表達的相對水平,用Elisa方法來測定培養(yǎng)后上清中IL-33蛋白的水平。結(jié)果：(1)與哮喘對照組相比，TNF-α和LPS均能促進IL-33mRNA的表達(P<0.01)，兩者共同刺激后IL-33含量明顯增加(P<0.01)；(2)與相應(yīng)對照組相比，加入地塞米松(DXM)均無法抑制TNF-α和LPS對PBMC中IL-33的促進作用1華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文(P>0.05)；（3）與相應(yīng)對照組相比,加入p38通道阻滯劑后，TNF-α對IL-
7、33mRNA的升高作用明顯被抑制(P<0.01)，但對LPS的上調(diào)作用無類似效果（P>0.05）；(4）與相應(yīng)對照組相比,加入ERK通道阻滯劑后,均無法抑制TNF-α和LPS對PBMC中IL-33的促進作用(P>0.05)；（5）PBMC培養(yǎng)的上清中IL-33蛋白含量無法用Elisa檢測出來。結(jié)論：TNF-α和LPS刺激后，哮喘患者PBMC中IL-33mRNA的表達明顯升高，兩者之間有協(xié)同作用，加入地塞米松后，上述促進效應(yīng)未被明顯抑制。進一步研究相關(guān)通路表明，TNF-α使IL-33mRNA表達升高，可能是與p38途徑有關(guān)，LPS使IL-33
8、mRNA表達升高，可能并不是通過p38和ERK途徑。關(guān)鍵詞：IL-33TNFLPS哮喘2華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文TheEffectofTNF-aandLPSontheSecret
