百脈根泛素連接酶sie3對共生受體symrk調(diào)控機(jī)制的研究

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1、分類號密級華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文百脈根泛素連接酶SIE3對共生受體SymRK調(diào)控機(jī)制的研究RegulationmechanismofE3liagaseSIE3forreceptorkinaseSymRKinLotusJaponicus研究生付偉偉學(xué)號2011304110007指導(dǎo)教師張忠明教授指導(dǎo)小組趙斌教授梁運(yùn)祥教授何正國教授林擁軍教授李友國教授專業(yè):微生物學(xué)獲得學(xué)位名稱:理學(xué)碩士研究方向:共生固氮分子生物學(xué)獲得學(xué)位時間:2014年6月22日華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院二。一四年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)

2、位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)描學(xué)位論文如需保密,解密時間年月日是否保密獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明,并表示了謝意。研究生簽名:尉帛辭時間:弦憚年。6月ff曰學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存

3、、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本;學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版,并提供目錄檢索和閱覽服務(wù),可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)h。注:保密學(xué)位論文(即涉及技術(shù)秘密、商業(yè)秘密或申請專利等潛在需要提交保密的論文)在解密后適用于本授權(quán)書。、學(xué)位論文作者簽名:詹串偉導(dǎo)師簽名:燜簽名日期:如f≯午06月lj日簽名目期:20Ifq-年

4、6月·fEl百脈根泛素連接酶SIE3對共生受體SymRK調(diào)控機(jī)制的研究目錄摘要???????????????????????????????????????????i縮略語表?????????????????????????????..iii1.前言???????????????????????????????.11共生固氮的意義???2根瘤器官的發(fā)生???3共生信號傳導(dǎo)途徑模型4蛋白激酶??????12341.4.1植物類受體激酶??????????????????????41.4.2共生受體激酶??

5、?????????????????????51.5蛋白質(zhì)的泛素化修飾???????????????????????71.5.1泛素及泛素化修飾的意義??????????????????71.5.2泛素化修飾的過程?????????????????????81.5.3E3泛素連接酶???????????????????????91.5.4E3泛素連接酶參與了共生固氮的調(diào)控過程??????????.101.6研究的目的與意義???????????????????????.112.材料與方法?????????

6、???????????????????122.1材料???????????????????????????.????.122.1.1載體與菌株???????????????????????..122.1.2植物材料????????????????????????..142.1.3相關(guān)培養(yǎng)基及緩沖液???????????????????..142.2實(shí)驗方法???????????????????????????.162.2.1DNA的相關(guān)操作?????????????????????..162.2.2毛根

7、轉(zhuǎn)化????????????????????????..162.3總RNA的制備?????????????????????????172.4Real·TimePCR?????????????????????????????????.172.4.1Real.TimePCR引物設(shè)計及檢驗???????????????172.4.2反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)???????????????????????..182.4.3Real—TimePCR反應(yīng)及檢測?????????????????182.5酵母轉(zhuǎn)化??????????

8、?????????????????.182.5.1醋酸鋰(LiAC)高效轉(zhuǎn)化酵母方法一(Clontech)?????????.182.5.2LiAC法高效轉(zhuǎn)化酵母方法二????????????????192.5.3酵母的小范圍Mating???????????????????一20華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2014屆碩士研究生學(xué)位論文2.6WesternBlot?..?.?.????..????.??..?.??.?.?????..?.?.?..??..

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