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《大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中圖分類號(hào)UDCR764610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q53圣密級(jí)公玨大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的研究Thestu#ofculturedandinducedtodifferentiateintoneuron—likecellsofRatBoneMarrowMesenchymalStemCellsinvitro作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：秦華麗臨床醫(yī)學(xué)耳鼻咽喉科學(xué)中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院蔣明副教授答辯委員會(huì)中南大學(xué)2013年5月原創(chuàng)性聲明1111111I
2、IIIIIIlUUll111IIIIllIIlY2425744本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：丕留乃關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢?/p>
3、公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文；學(xué)校可根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。作者簽名：』超導(dǎo)師簽名l至互一日期：絲!三年上月塑大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的研究摘要：目的：建立SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)體外培養(yǎng)體系，誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞，篩選較好的體外誘導(dǎo)方法，為下一步內(nèi)耳移植實(shí)驗(yàn)提供前期研究基礎(chǔ)。方法：1．BMSCs培養(yǎng)：主要采用全骨髓直接貼壁法培養(yǎng)BMSCs并傳代，取P3代行流式細(xì)胞儀檢測(cè)BMSCs表面標(biāo)志CD2
4、9，CD90及造血細(xì)胞表面抗原CD45的表達(dá)。2．取P4代BMSCs，由堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)預(yù)誘導(dǎo)24h后，分別加入：A組誘導(dǎo)劑：神經(jīng)營養(yǎng)素3(NT-3)，維甲酸(RA)；B組誘導(dǎo)劑：B．硫基乙醇03MZ)。誘導(dǎo)1h，5h，24h，7d，14d，21d后，采用細(xì)胞免疫熒光方法鑒定，檢測(cè)成熟神經(jīng)元標(biāo)志物神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的表達(dá)情況，觀察兩組是否有染色陽性的神經(jīng)元樣細(xì)胞及比較陽性率的高低。結(jié)果：1．全骨髓貼壁篩選法簡(jiǎn)便，所獲得的細(xì)胞數(shù)量多，增殖分化快。2．流式細(xì)胞儀檢測(cè)BMS
5、Cs表達(dá)CD90、CD29；不表達(dá)CD45，結(jié)合細(xì)胞形態(tài)分析，符合BMSCs的特征。3．細(xì)胞免疫熒光結(jié)果示NSE陽性表達(dá)’A組誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的陽性率明顯高于B組。結(jié)論：1．全骨髓貼壁篩選法分離培養(yǎng)的BMSCs所獲得的細(xì)胞數(shù)量多，增殖分化快，純度高。2．采取分步誘導(dǎo)和聯(lián)合誘導(dǎo)BMSCs，由bFGF預(yù)誘導(dǎo)24h后，換用NT-3+RA誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞NSE陽性率明顯高于BME誘導(dǎo)，是一種比較好的誘導(dǎo)方案。圖5幅，表1個(gè)，參考文獻(xiàn)97篇。關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；誘導(dǎo)方法；神經(jīng)元樣細(xì)胞；內(nèi)耳
6、移植分類號(hào)：R764IIThestudyofculturedandinducedtodifferentiateintoneuron—likecellsofRatBoneMarrowMesenchymalStemCellsinvitroABSTRACT：?。一。‘‘．1l‘‘‘^一一0bjectiveEstablishingtrainingsystemofSDratbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)andscreeningoutabeRermethodfori
7、nducingBMSCsdifferentiateintoneuron．1ikecellsinvitro．SOastolaythefoundationforthenextexperimentsofinnereartransplantation．MethodFirst，culturedBMSCs：First，BMSCswereculturedandsubculturedbythemainmethodofwholebonemarrowdirectlyadherentinflasks．a(chǎn)ndBMSCso
8、fthethirdgenerationusedforflowcytometricdetectionaboutthesurfacemarkersCD29．CD90ofBMSCsandthesurfaceantigenCD45ofhematopoieticcell．Second，BMSCsofthefourthgenerationwerepre．induced24hbybasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)，andthendividedinto2groups
