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《nutlin-3a誘導的p73α對結腸癌細胞周期阻滯的作用及其作用機制》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名(手寫)：步翻簽字日期：訓弓年學位論文版權使用授權書6月7日
2、本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權
3、南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數據庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數據庫》中全文發(fā)表，并通過網絡向社會公眾提供信息服務。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名(手寫)：五翻導師簽名簽字日期：M夢舌月7日簽字日期耖多年摘要IIIIIM11111111141111111IY2427159目的：本項目研究不同劑量Nutlin-3a對內源性p73a
4、表達及功能的影響，探討由此產生的對結腸癌細胞老化和靜止的作用及其作用機制，為Nutlin．3a用于p53突變及p53缺失的結腸癌的治療、減少此癌復發(fā)的可能性提供實驗依據。方法：人體結腸癌細胞株Caco．2(p53基因突變，含野生型p73a基因)，用10％胎牛血清DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)于5％C02-370C的潮濕環(huán)境中24h。用含0斗M、2．51xM、5州、10“M、200M、40肛M、600M及80“M的Nutlin．3a培養(yǎng)液培養(yǎng)Caco．2細胞72h后，用MTT法檢測Nutlin-3a對Caco．2細胞的抑制作用；WesternBlot檢測p
5、73a蛋白在Caco．2細胞中的表達；SA．B．gal染色標識出老化的Caco．2細胞；細胞集落形成分析檢測Caco．2細胞在Nutlin．3a撤藥后是否重新增殖。尋找一個濃度范圍的Nutlin．3a所誘導的p73a能引起癌細胞死亡(凋亡及有絲分裂死亡)及老化，但不引起癌細胞靜止，而使腫瘤在化療藥物撤除后復發(fā)的可能性減少，并探索Nutlin．3a引起上述結果的作用機制。結果：Nutlin．3a能抑制Caco．2細胞的生長；Nutlin．3a可以上調p73a蛋白在Caco．2細胞中的表達，且有濃度依賴效應；Nutlin．3a引起結腸癌老化但不引
6、起其靜止的最佳濃度范圍是5．10btM。結論：Nutlin．3a可以使P73a蛋白在Caco．2細胞中的表達加強，且有濃度依賴效應。當Nutlin．3a的濃度為5．10“M時，Nutlm．3a對結腸癌細胞Caco．2的抗腫瘤效應最好。關鍵詞：結腸癌；Nutlin一3a；p73a；細胞老化；細胞靜止IIAbstractABSTRACTPurpose：ThisprojectistosearchforasuctableNutlin．3aconcentrationwhichcausescancercelltosenescencebutnottoqui
7、escence．Thatprovidedexperimentalbasisforp53mutationsandp53nullcoloncancerwhichtreatedbyNutlin．3aandreducingthepossibilitytothecarcinomarecurrence．Methods：Caco-2，p53mutationsbutcontentsmt-p73awasfirstacclimatedinDMEMcontaining10％fetalbovineserumfor24hbeforeexposuretoNutlin．3
8、．wetreatredCaco。2cellwith0州、2．51xM、51xM、10rtM、201xM、40州、60-tMand80I．tMofNutlin-3a．ThentestedtheinhibitoryeffectsofNutlin．3aoncelllinesCaco．2byMTTassay，testedp730texperienceofthetreatedCaco．2cellsbywesternblottinganddemonstratedthesenescencecellbySA-betagaldyeingtoanalysiswi
9、thcoloncancereellafter72hours．WesearchedforaconcentrationrangeofNutlin．3a．Nutlin-3
