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《慢性乙型肝炎患者淋巴細(xì)胞亞群變化及意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、慢性乙型肝炎患者淋巴細(xì)胞亞群變化及意【摘要】目的：通過觀察慢性乙型肝炎病人與正常人外周血中淋巴細(xì)胞亞群的變化，研究乙肝的發(fā)病機(jī)制與宿主細(xì)胞免疫功能的關(guān)系。方法：收集2009年10月至2010年3月在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的慢性乙肝病人32例和健康人20例的外周血，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群并分析其差異及臨床意義。結(jié)果：慢性乙肝患者與正常對(duì)照組比較，CD3+、CD44+及CD3+細(xì)胞數(shù)均減少（P<0.05）；與正常對(duì)照相比外周血NK細(xì)胞減低（P〈0.05）；與正常對(duì)照相比外周血B淋巴細(xì)胞升高（P〈0.05）o結(jié)論：慢性乙肝患
2、者血中細(xì)胞免疫功能紊亂，T淋巴細(xì)胞亞群失衡等可能與乙肝病毒感染后慢性化有關(guān)。【關(guān)鍵詞】慢性乙型肝炎；T細(xì)胞亞群；NK細(xì)胞；B淋巴細(xì)胞【中圖分類號(hào)】R512.6+2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517（2012）10-0074-02乙型肝炎病毒（HBV）感染人數(shù)眾多，我國(guó)HBV感染率為60%,乙肝表面抗原陽性率約10%,是導(dǎo)致慢性肝病最常見的原因。HBV感染可以引起肝細(xì)胞的免疫性損害，其病理過程涉及到T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK、NKT等細(xì)胞。本文通過分析慢性乙肝病人與健康人免疫細(xì)胞的差異，來探討乙型肝炎發(fā)病機(jī)制與宿主細(xì)胞免疫功能的關(guān)系
3、。1材料和方法2009年10月至2010年3月在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬-第一醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎病人32例和健康人20例，診斷符合肝病學(xué)會(huì)聯(lián)合修訂的病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)。乙肝患者中男23例、女9例，年齡18-63歲，平均年齡34±13歲，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶均超過正常2倍以上。所有病人均未接受過任何與肝病相關(guān)的治療。健康對(duì)照組20例，男14例、女6例，年齡18—61歲，平均年齡34±9歲。1.1儀器與試劑使用美國(guó)BD公司FACSCuliber流式細(xì)胞儀測(cè)定樣本中的淋巴細(xì)胞亞群，試劑均由該公司提供。1.2檢測(cè)方法標(biāo)本制備：(1)用K2-EDT
4、A抗凝管收集外周靜脈血2ml混勻，2ml用于流式細(xì)胞儀測(cè)定，室溫下送檢。(2)抗體標(biāo)記：取2支檢測(cè)管，分別加入如下抗體組合，每種抗體20u1。①CD4、CD8.CD3細(xì)胞亞群抗體；②CD16+56.C嘰9抗體；(3)上述管中加入50卩1全血，混勻避光室溫孵育20分鐘；(4)加入500U1OFHLYSE—c溶血素，混勻避光26°C水浴溶血10分鐘；(5)加入2mlPBS洗液，振蕩混勻，1500r/min,離心5rain,棄上清；(6)重復(fù)步驟(5)；(7)每管加入0.5mlPBS洗液，混勻避光放置，2h內(nèi)完成上機(jī)檢測(cè)。儀器檢查達(dá)標(biāo)準(zhǔn)后開始
5、檢測(cè)。每管讀取細(xì)胞5000個(gè)，將流式細(xì)胞儀檢測(cè)的各亞群占淋巴細(xì)胞總數(shù)的百分比與血常規(guī)結(jié)果中淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)值相乘，得到各亞群細(xì)胞的數(shù)。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用土s表示。采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。多組比較采用方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果每組之間淋巴細(xì)胞亞群、淋巴細(xì)胞及白細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行比較：病人組淋巴細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組。淋巴細(xì)胞亞群中B細(xì)胞計(jì)數(shù)、NK細(xì)胞計(jì)數(shù)低于對(duì)照組（見表1）;外周血CD4+T、CD8+細(xì)胞低于對(duì)照組（見表2）。3討論HBV主要是通過引起宿主自身的免疫反應(yīng)而造成肝細(xì)胞的損傷
6、。國(guó)內(nèi)外初步研究顯示，慢性乙型肝炎病人體內(nèi)存在著細(xì)胞免疫功能的紊亂，T淋巴細(xì)胞亞群失衡，使機(jī)體不能有效清除入侵的乙肝病毒，導(dǎo)致疾病的慢性化。我們通過檢測(cè)慢性乙肝病人和正常人的淋巴細(xì)胞亞群的變化，來了解是否存在淋巴細(xì)胞亞群免疫功能紊亂。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照相比，慢性乙肝患者CD4+、CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)減少。CIM+T為輔助性T細(xì)胞，能促進(jìn)B細(xì)胞等其他免疫細(xì)胞的增殖和分化，調(diào)節(jié)體液免疫和細(xì)胞免疫；CD8+T細(xì)胞由細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞組成。國(guó)內(nèi)外研究顯示在急性乙肝患者體內(nèi)存在著針對(duì)乙型肝炎病毒強(qiáng)烈多克隆CIM+T細(xì)胞反應(yīng)和細(xì)胞
7、毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）反應(yīng)，而在慢性乙肝患者中這種反應(yīng)很弱或檢測(cè)不到。這就提示乙型肝炎病毒感染后HBV特異性CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞反應(yīng)對(duì)病毒的清除和疾病的轉(zhuǎn)歸起重要的作用。CIM+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)的減少，可能導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能降低，乙肝病毒感染后不易被清除，與疾病慢性轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，但是，CD8+T細(xì)胞數(shù)量改變不能完全反映其功能上的變化，并且外周血中CD8+T細(xì)胞數(shù)量并不能完全反映肝細(xì)胞的情況。因此，尚需完善T細(xì)胞功能方面的檢測(cè)及進(jìn)行肝組織活檢來進(jìn)一步分析CTL與乙肝臨床轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。慢性乙肝患者NK細(xì)胞計(jì)數(shù)低于正常對(duì)
8、照。NK細(xì)胞是機(jī)體自然免疫的主要承擔(dān)者，也是獲得性細(xì)胞免疫的核心細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞缺陷的病人易發(fā)生多種危及生命的病毒感染，這可能與NK細(xì)胞缺乏導(dǎo)致的CTL功能喪失有關(guān)。在對(duì)乙肝病毒的細(xì)胞免疫中HBV特異
