資源描述：
《重組hmgb1對den2感染ana-1細胞分泌tnf-α及no的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文《中國圖書資料分類法》單位代碼：10660分類號：R392.12學號：S100019貴陽醫(yī)學院2013屆碩士學位論文重組HMGB1對DEN2感染Ana-1細胞分泌TNF-α及NO的影響研究生：孫偉導(dǎo)師：左麗教授，商正玲副教授年級：2010級專業(yè)：免疫學省社會發(fā)展合作專項資金項目（黔科合[2010]3155）國家自然科學基金（31260224）2013年5月28日貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文目錄摘要...................................
2、..................1前言.....................................................3實驗材料與方法：.........................................5結(jié)果....................................................16討論：..................................................23參考文獻:..............
3、.................................27英文摘要................................................33致謝..................................................35縮略詞表................................................36學位論文獨創(chuàng)性聲明......................................37附：綜述.....
4、...........................................38貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文重組HMGB1對DEN2感染Ana-1細胞分泌TNF-α及NO的影響專業(yè)：免疫學研究生：孫偉導(dǎo)師：左麗教授，商正玲副教授摘要目的：觀察不同濃度重組高遷移率族蛋白1(recombinationhighmobilitygroupboxprotein1，rHMGB1)對DEN2感染鼠源單核巨噬細胞Ana-1產(chǎn)生TNF-α和NO的影響。方法：直接免疫熒光及RT-PCR鑒定DEN2感染Ana-
5、1細胞；Real-timePCR動態(tài)監(jiān)測DEN2感染Ana-1細胞后胞內(nèi)病毒增殖情況；DEN2感染Ana-1細胞后，與不同濃度重組HMGB1進行培養(yǎng),Real-timePCR檢測24h時間點感染組及不同濃度重組HMGB1組中病毒載量情況；以雙抗體夾心ELISA方法檢測各組上清液中TNF-α的分泌水平；以Griess試劑檢測各組上清液中NO含量。結(jié)果：1.DEN2感染Ana-1后，直接免疫熒光檢測到DEN2并且RT-PCR檢測到病毒的目的基因NS5，條帶大小為177bp,證實DEN2可以感染Ana-1細胞。
6、2.Real-timePCR動態(tài)監(jiān)測DEN2感染Ana-1胞內(nèi)病毒載量，在24h-△△Ct病毒載量達高峰，48h病毒載量水平顯著下降，2值分別為50241.67±9570.96,71.67±23.67，差異具有顯著性統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。DEN2NS5引物的熔解曲線波峰單一，峰形銳利。3.Real-timePCR檢測不同濃度重組HMGB1處理組的病毒載量，與DEN2組相比，D-HMGB1（即DEN2-HMGB1）處理組病毒載量明顯下降，D-HMGB1-1組（HMGB1處理濃度為1ng/ml）﹑D-H
7、MGB1-10組（HMGB1處理濃度為10ng/ml）﹑D-HMGB1-100組（HMGB1處理濃度為100ng/ml）和D-HMGB1-1000組（HMGB1處理濃度為1000ng/ml）抑制率（%）分別為41.53±2.12﹑55.30±1.591貴陽醫(yī)學院2013屆碩士研究生論文﹑74.75±1.12﹑86.35±1.42，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。隨rHMGB1處理濃度增加，對胞內(nèi)病毒增殖的抑制率增大。4.雙抗體夾心ELISA法檢測TNF-α濃度，與DEN2組比較，D-HMGB1組TNF-
8、α濃度有所下降，且rHMGB1濃度越大，TNF-α濃度下降越明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。5.Griess試劑檢測NO含量，rHMGB1作用后NO濃度明顯減少，與DEN2組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論：1.在體外DEN2可以感染Ana-1細胞；2.重組HMGB1對DEN2在Ana-1胞內(nèi)的復(fù)制，有一定抑制作用。病毒抑制率與rHMGB1濃度成正相關(guān)；3.重組HMGB1對DEN2感染Ana-1分泌TNF-
