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1、碩士學(xué)位論文論文題目鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用研究生姓名程付偉指導(dǎo)教師姓名張維天專業(yè)名稱耳鼻咽喉科學(xué)研究方向變應(yīng)性鼻炎論文提交日期2013年5月鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用中文摘要中文摘要第一部分鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用目的:探討鼻腔滴注重組小鼠白細(xì)胞介素-22(recombinationmurineinterleukin-22/rm-IL-22)對小鼠變應(yīng)性鼻炎免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)作用。方法:將24只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為3組,每組8只,分別為對照組、模型組和IL-22組。模型組和IL-22組建立
2、小鼠變應(yīng)性鼻炎模型,同時IL-22組在每次激發(fā)前鼻腔滴注rm-IL-22。首先應(yīng)用間接免疫熒光法檢測鼻黏膜上皮細(xì)胞是否表達(dá)IL-22受體(IL-22R1),最后一次激發(fā)后記錄三組小鼠10分鐘的抓撓數(shù)和噴嚏數(shù),應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)檢測外周血清中卵白蛋白-特異性IgE(OVA-sIgE)的濃度,檢測鼻腔灌洗液中干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)和胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(thymicstromallymphopoietin,TSLP)
3、的濃度,HE染色觀察鼻黏膜局部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤情況。最后利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:IL-22R1在小鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞表達(dá),IL-22組較模型組小鼠變應(yīng)性鼻炎抓撓和噴嚏癥狀減輕,鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5和外周血清中OVA-sIgE的濃度較模型組降低,局部嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)侵潤減少,三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,鼻腔灌洗液中IFN-γ、IL-10和TSLP的濃度在IL-22組和模型組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:鼻腔滴注rm-IL-22可以抑制變應(yīng)性鼻炎小鼠的免疫應(yīng)答,有望成為治療變應(yīng)性鼻炎的一種新方法。關(guān)鍵詞:鼻炎;變應(yīng)性;
4、白細(xì)胞介素-22;細(xì)胞因子;免疫I中文摘要鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用第二部分三種重組腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)綠色熒光蛋白在小鼠鼻黏膜的表達(dá)目的:探討重組1、2和8型腺相關(guān)病毒(rAAV1、rAAV2和rAAV8)載體經(jīng)小鼠鼻腔滴注轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)綠色熒光蛋白(EGFP)基因在鼻黏膜上皮細(xì)胞的表達(dá)情況。方法:6只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為3組,每組2只。用帶有EGFP基因的重組1、2和8型腺相關(guān)病毒進(jìn)行小鼠鼻腔滴注,第4周處死小鼠,獲得小鼠完整鼻腔,固定脫鈣后冰凍切片,然后在熒光顯微鏡下觀察EGFP在三組小鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞的表達(dá)情況。結(jié)果:rAAV1載體攜
5、帶的EGFP成功轉(zhuǎn)染,第4周穩(wěn)定表達(dá),另外兩型重組腺相關(guān)病毒攜帶的EGFP均未見在小鼠鼻黏膜表達(dá)。結(jié)論:rAAV1載體可以轉(zhuǎn)染小鼠鼻腔黏膜上皮細(xì)胞,并穩(wěn)定表達(dá)攜帶的EGFP,可以作為鼻部疾病基因治療的載體。關(guān)鍵詞:腺相關(guān)病毒;基因治療;轉(zhuǎn)染作者:程付偉指導(dǎo)教師:張維天II鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用英文摘要ABSTRACTChater1.Interleukin-22AdministrationintotheNostrilAlleviatesMurineAllergicRhinitisObjective:Toinvestigatetheimmuneregula
6、tionwithlocalapplicationofrecombinantmurineinterleukin-22(rm-IL-22)tonasalcavityinmurineallergicrhinitismodel.Methods:Twenty-fourfemaleBALB/cmice(6-to8-week-old)wererandomlydividedintocontrolgroup,modelgroupandIL-22group.Therewereeightmiceineachgroup.ModelgroupandIL-22groupwerepreparedtoconst
7、ructtheallergicrhinitismodel.Andmeanwhile,IL-22groupwaslocallyadministeredintonasalcavitywithrm-IL-22beforeeachOVAchallenge.Firstofall,wedetectedwhetherIL-22receptor1(IL-22R1)expressiononthemicenasalepithelialcellsbyindirectimmunofluorescence