dcb16融合細胞誘導t細胞特異性ctl的基礎(chǔ)實驗研究

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1、中圖分類號密級DC/B16融合細胞誘導T細胞特異性CTL的基礎(chǔ)實驗研究TheExperimentalStudyofDC/B16MalignantMelanomaFusionCellsInduceTCell—specificCTL計:學位論文:34頁表格:3個插圖:10幅王曉飛指導教師:曲巍教授申請學位級別:碩士學位學科(專業(yè)):外科學培養(yǎng)單位:大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院完成時間:二。一三年四月答辯委員會主席:附件1:獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含

2、其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得大連醫(yī)科大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名:a叢曼k簽字日期:止年主月正日附件2:關(guān)于學位論文使用授權(quán)的說明本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于(請在以下相應

3、方框內(nèi)打“4”):1.保密口,在一年解密后適用本授權(quán)書。2.不保密口。作者簽名:a鐫k導師簽名:碑礱≤日期:侈年籮月珀日期:爐期礦日2.9融合細胞體外抗腫瘤活性分析?????????????12(三)結(jié)果??????????????????????123.1形態(tài)學觀察DC細胞、T淋巴細胞、惡性黑色素瘤細胞和融合細胞?·?···??·?·?·一”···??·一?····”····”········?··??123.2繪制融合細胞生長曲線????????????????133.3DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞刺激自體T細胞增殖實驗??143.4DC/B16

4、惡性黑色素瘤融合細胞體外誘導T細胞分泌IFN.Y含量測定????????????????????????153.5融合細胞體外抗腫瘤活性分析???Qoea???????16(四)討論???????????????????????17(五)結(jié)論???????????????????????19三、參考文獻???????????????????????20四、綜述???OOOOOOOOO??OOOOOOOOO?OOOOO??????????23(一)綜述???????????????????????23(二)參考文獻?????????OOO?????????

5、?29五、致謝?????????????????????????34大連醫(yī)科大學碩士學位論文DC/B16融合細胞誘導T細胞特異性CTL的基礎(chǔ)實驗研究碩士生姓名:指導教師:專業(yè)名稱:I魔飛曲巍教授外科學摘要目的探討B(tài)16惡性黑色素瘤細胞與C57BL/6小鼠骨髓源樹突狀細胞融合后體外誘導特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)及對B16惡性黑色素瘤細胞的殺傷作用。方法用聚乙二醇(PEG)將B16惡性黑色素瘤細胞與小鼠骨髓源樹突狀細胞(DC)融合,融合成功后以DC細胞、B16惡性黑色素瘤細胞做為對照組,DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞作為實驗組,繪制融合細胞生長曲線

6、并進行融合細胞刺激自體T淋巴細胞增殖試驗。以DC細胞、B16惡性黑色素瘤細胞、DC+B16惡性黑色素瘤細胞聯(lián)合培養(yǎng)做為對照組,DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞作為實驗組,用細胞內(nèi)細胞素染色法檢測DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞誘導CTL的活性,體外檢測DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞融合細胞誘導產(chǎn)生的CTL對B16惡性黑色素瘤的殺傷性作用。實驗數(shù)據(jù)用工±S進行計數(shù),使用SPSSl3.0軟件,選擇one.wayANOVA和LSD’Sposthoctest統(tǒng)計學方法對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果小鼠骨髓源樹突狀細胞(DC)與B16惡性黑色素瘤細胞成功實現(xiàn)融合

7、,給予合適的完全培養(yǎng)基和生長環(huán)境后,發(fā)現(xiàn)DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞的生長情況與DC相類似,其增殖能力與B16惡性黑色素瘤細胞相比明顯較弱,細胞培養(yǎng)期間沒有實現(xiàn)明顯的細胞倍增,說明DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞更多了表現(xiàn)出了親DC的生長增殖特性。以DC細胞、B16惡性黑色素瘤細胞做為對照組,DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞作為實驗組,觀察其對致敏的T細胞的增殖效率。結(jié)果顯示,DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞可有效刺激同源T淋巴細胞增殖,其促進T細胞增殖能力顯著高于單純DC細胞組和B16細胞組,其統(tǒng)計學比較具有顯著性差異(p<0.05)。以DC細胞、

8、B16惡性黑色素瘤細胞、DC+B16惡性黑色素瘤細胞聯(lián)合培養(yǎng)做為對照組,DC/B

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