zeb-1在大鼠肝纖維化模型和肝星狀細胞中的動態(tài)表達及意義

《zeb-1在大鼠肝纖維化模型和肝星狀細胞中的動態(tài)表達及意義》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文論文題目：蘭墾旦二!國王查太鼠趕紅維化撞型麴趕星鑒塑庭答辯委員會主席：壁壹羞麴援逝江太堂答辯委員會成員：塞堅勝．．麴握逝延笪魚趔醫(yī)瞳莊明左塾援濕趔醫(yī)型盔堂隆垡虛塑援逝、江省魚趔醫(yī)院韭友殖麴捶遏劌醫(yī)科太堂論文答辯日期：至Q!三生§旦23目．一溫州醫(yī)學院碩士學位論文目錄縮略詞表?????????????????4中文摘要?????????????????5英文摘要?????????????????8前言???????????????????11刖吾???????????????????l材料及方法????????????????13結果????

2、???????????????22；口木???????????????????二二分析和討論????????????????28小結???????????????????30參考文獻?????????????????31附錄???????????????????33致謝???????????????????34綜述???????????????????35參考文獻?????????????????37聲明???????????????????39溫州醫(yī)學院碩士學位論文縮略詞表4溫州醫(yī)學院碩士學位論文ZEB-I因子在大鼠肝纖維化模型和肝星狀細胞中的動態(tài)表達及意義中

3、文摘要目的中國是一個肝病大國，各種病因導致的肝炎、肝損傷可進一步發(fā)展為肝硬化，甚至肝癌，該病治療效果差，病死率高，給病人及其家庭帶來了大的負擔，而肝纖維化(Hepaticfibrosis)是其病情發(fā)展必經階段，近來學者們研究發(fā)現(xiàn)早期肝纖維化經過治療是可以發(fā)生逆轉的n，，這對阻斷肝炎、肝硬化、肝癌一系列發(fā)展無疑是個好消息，于是阻斷早期肝纖維化的發(fā)展甚至逆轉早期病變對臨床肝病的治療顯得尤為重要。ZEB一1是二鋅指蛋白家族的其中一個成員，很早就有報道顯示它作為細胞核轉錄因子參與著TGF—B通路的調控，而TGF—Bl是肝纖維化發(fā)生發(fā)展和誘導I{SC活化最關鍵的細胞因子，

4、由此該研究旨在通過觀察ZEB—l在大鼠肝纖維化模型及肝星狀細胞經TGF-131刺激后的動態(tài)變化來初步探討它對大鼠肝纖維化的影響。方法健康雄性SD大鼠60只，分為健康對照組8只和模型組52只，模型組按造模后不同時間點分為2周，4周，6周，8周四個亞組。所有大鼠均在清潔環(huán)境下，采用王寶恩造模法模型組0．2ml／lOOg劑量經腹腔注射二甲基亞硝胺(DMN)，每周前三天每天一次，持續(xù)4周建立纖維化模型，常規(guī)喂養(yǎng)至8周末，每到時間點后隨機處死6只，下腔靜脈取血后離心取上清，測定不同時間點ALT，AST的變化；肝組織經甲醛固定、石蠟包埋、切片后經HE，Masson染色，光學

5、顯微鏡下觀察肝組織病理變化；采用RT-PCR和Westernblotting檢測不同時間點肝臟ZEB-ImRNA和蛋白的表達。大鼠HSCT-6細胞用含i0—12％胎牛血清的高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)生長傳代，至3-4代對數(shù)生長期接板，濃度為1．8×105／L，加不同濃度TGF～Bl因子刺激，每組設3個復孔，48h后提取RNA及蛋白，檢測在不同TGF—B1濃度刺激下ZEB-ImRNA及蛋白的表達情況。各組間均數(shù)比較采用單因素分析。溫州醫(yī)學院碩士學位論文結果1．采用王寶恩方法成功誘導建立大鼠肝纖維化模型，4，6周時病理學圖片顯示肝內出血壞死明顯，炎性細胞明顯增多，肝小葉結構破壞

6、或消失，藍色膠原纖維切割肝小葉形成假小葉。模型組血清ALT，AST在2周開始升高，4周達到最高峰(169．2±16．2，193．3±31．1)，明顯高于正常對照組(29．2±4．70，42．7±6．30)。2．RT—PCR結果顯示：ZEB-lmRNh在正常肝組織中少量表達，模型組表達逐漸升高，4周表達最高(3．177±0．046)，隨后6、8周又逐漸降低，各模型組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(F=66．29，p

7、-222．27，p

8、ng／LTGF—B1刺激