桑葉蛋白的提取與應(yīng)用研究

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1、萬方數(shù)據(jù)分類號(hào)!S2Q2．3密級(jí)碩士學(xué)位論文桑葉蛋白的提取與應(yīng)用研究指導(dǎo)教師姓名、職稱王羞副教援單位地址逝江垣菹太堂絲堂皇生金科堂堂院申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別亟±專業(yè)植物堂論文提交時(shí)間一2Q!壘13131論文答辯時(shí)間2014．5．10學(xué)位授予單位和日期答辯委員會(huì)主席獫昌態(tài)論文評(píng)閱人——年月萬方數(shù)據(jù)StudiesonExtracionandApplicationofMulberryLeafProteinAThesisinbotanyUndertheSupervisionofassociateProfessorWA

2、NGFangByQiaoLuZhejiangNormalUniversityJinhua，Zhejiang，ChinaMay,2014萬方數(shù)據(jù)桑葉蛋白的提取與應(yīng)用研究摘要桑葉(MorualbaL．)從醫(yī)藥到食用、飼喂蠶蟲，在我國(guó)已有幾千年的應(yīng)用歷史，1993年被國(guó)家衛(wèi)生部正式列為“藥食兩用”農(nóng)產(chǎn)品之一。桑葉中含有多種功能成分，而且，在植物葉片中，其蛋白質(zhì)的含量較高且氨基酸組成理想。我國(guó)擁有世界上最大的桑樹栽種面積，桑葉資源豐富，但一直以來，對(duì)桑葉的利用十分有限，尤其對(duì)桑葉蛋白的開發(fā)還鮮見報(bào)道。本研究

3、以浙江省金華市桑葉為研究材料，優(yōu)化確定桑葉蛋白的提取工藝，比較不同季節(jié)桑葉蛋白品質(zhì)的差異，并考察桑葉蛋白的功能特性，對(duì)桑葉蛋白相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)及桑葉蛋白水解肽的制備工藝及其抗氧化活性做出初步的探究，以期為桑葉的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。本研究的主要結(jié)果有：(1)優(yōu)化桑葉蛋白的提取方法，確定了桑葉蛋白超聲波輔助提取工藝：0．4％的NaCI水溶液為提取溶劑，料液比為l：30(g／mE)，400W超聲處理20min，再40"C浸提80min，于pH2～3酸沉絮凝，沉淀干燥即得桑葉蛋白。影響桑葉蛋白提取的因素主

4、次順序?yàn)椋禾崛r(shí)間>提取溫度>an鹽量>料液比。用本實(shí)驗(yàn)確定的工藝提取桑葉蛋白，得率為10．23％，其蛋白質(zhì)含量為56．8％。(2)通過研究4．11月桑葉整個(gè)采收期8個(gè)月桑葉蛋白含量的變化，發(fā)現(xiàn)4-9月整個(gè)春夏季桑葉中蛋白含量較高，9月之后，桑葉中蛋白質(zhì)含量明顯降低。通過對(duì)不同季節(jié)桑葉蛋白氨基酸組成的研究發(fā)現(xiàn)，桑葉蛋白中至少含有18種氨基酸，必需氨基酸的含量占總氨基酸含量的30％-40％，桑葉蛋白氨基酸比值系數(shù)平均分為70．6l，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高；第一限制氨基酸為異亮氨酸：桑葉蛋白品質(zhì)最佳季節(jié)為春季及初

5、秋。(3)通過對(duì)不同環(huán)境條件下的桑葉蛋白功能特性的研究，發(fā)現(xiàn)外界環(huán)境的變化對(duì)桑葉蛋白的功能特性有較大影響。在pH5．0附近即處于桑葉蛋白等電點(diǎn)附近時(shí)，桑葉蛋白的溶解性、吸水性、起泡性、乳化及乳化穩(wěn)定性均最?。涸谌芤褐蠳aCl濃度為0~0．4moFL時(shí)，桑葉蛋白的各項(xiàng)功能特性在一定范圍內(nèi)發(fā)生變動(dòng)，總體均呈下降趨勢(shì)，在NaCl濃度高于0．6mol／L后，桑葉蛋白的溶解性、吸水性和起泡性均隨著濃度的升高開始上升，乳化性在濃度高于0．8mol／L后又萬方數(shù)據(jù)出現(xiàn)下降，而乳化穩(wěn)定性總體變化趨勢(shì)則與乳化性正好相

6、反；蔗糖濃度的持續(xù)增加使得桑葉蛋白的溶解度和起泡性隨之持續(xù)降低，但其吸水性卻與溶解性相反，隨著蔗糖濃度的增加吸水性也隨之升高；在20℃至70。C的溫度范圍內(nèi)，桑葉蛋白的溶解性、吸水性顯現(xiàn)出先上升而后下降的趨勢(shì)，分別在40。C、60。C達(dá)到最大，因此，過高溫度會(huì)對(duì)葉蛋白的溶解性和吸水性產(chǎn)生較大影響，而吸油性和起泡性則隨溫度的升高而持續(xù)增大；乳化性及其穩(wěn)定性對(duì)溫度的變化不太敏感，變化幅度較小。(4)結(jié)合所得的桑葉蛋白提取工藝，研制出桑葉營(yíng)養(yǎng)粉。通過考察13．環(huán)糊精及果膠酶、纖維素酶、中性蛋白酶等酶的添加

7、對(duì)所得產(chǎn)品的溶解性、色澤、澄清度及可溶性固形物與蛋白質(zhì)含量等指標(biāo)的影響，確定了如下工藝：桑葉粉中按照料液比l：30添加O．4％NaCI溶液，400W超聲20min后，添加中性蛋白酶10000U／g、纖維素酶100U／g、果膠酶50U／g和5％13-環(huán)糊精，50。C恒溫水浴浸提50min，真空濃縮，噴霧干燥，得到溶解性良好的桑葉營(yíng)養(yǎng)粉，得率為14．5％。經(jīng)檢測(cè)，所得桑葉營(yíng)養(yǎng)粉蛋白質(zhì)含量為24．79％，含l8種氨基酸(Y．氨基丁酸含量28．95ug／g)，含糖量72．17％，黃酮含量0．047％，灰分含

8、量為7．93％，含水量為3．175％。所得營(yíng)養(yǎng)粉溶解性極佳，色澤呈淺黃棕，湯色透亮，氣味甜香，口感細(xì)膩。(5)以不同蛋白酶的水解進(jìn)程和水解肽的體外抗氧化活性為指標(biāo)，確定了桑葉蛋白水解肽的制備工藝：桑葉蛋白底物濃度為5％(w／v)，40。C水浴溶解30min，以堿性蛋白酶為桑葉蛋白水解用酶，添加量為8000U／g，于55"C、pH8．0～9．0條件下水解4h，調(diào)節(jié)pH至3．0以下，離心，取上清液，脫鹽，干燥，得桑葉蛋白水解肽。通過5種體外抗氧化模型對(duì)桑葉蛋白水解肽的抗氧