針刺對慢性萎縮性胃炎模型大鼠nf--kb轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)影響的研究

《針刺對慢性萎縮性胃炎模型大鼠nf--kb轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)影響的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是個人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽日期：2．mq-年關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中

2、醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽蛸論文導(dǎo)師簽名日期：—羽碑年，,EJ歲D日摘要JIIIIIIIIIIIIlullIIII『Y2622754背景在針灸門診的臨床實踐中，經(jīng)常會遇到慢性萎縮性胃炎的患者，這部分患者通常是接受了各種治療措施而療效欠滿意后，前來尋求針灸醫(yī)生幫助的。正是這種臨床常見的疾病，因其發(fā)病原因復(fù)雜，沒有統(tǒng)一的方案可循，且各種治療方式效果差強人意，因此成為臨床常見疑難病之一。在針

3、灸臨床實踐中，我們發(fā)現(xiàn)針灸對本病的治療具有較為理想的效果，而且諸多臨床隨機(jī)對照試驗文獻(xiàn)報告業(yè)已證實，針灸治療慢性萎縮性胃炎具有較好的療效，但其內(nèi)在的機(jī)理尚不明確。因此，設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膭游飳嶒?，探究針灸治療本病的機(jī)理尤為有必要。NF．rB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)是各種炎癥反應(yīng)的三條重要轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一，也是影響炎癥反應(yīng)中細(xì)胞凋亡進(jìn)程的重要因素。為探究針灸治療慢性萎縮性胃炎的分子機(jī)理，基于導(dǎo)師已有的研究成果及在查閱大量相關(guān)文獻(xiàn)基礎(chǔ)上，我們提出假設(shè)：針刺治療慢性萎縮性胃炎的機(jī)制可能是，針刺具有NF．rJ3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的作用，從而抑制炎癥的發(fā)展

4、，減輕炎癥反應(yīng)，并調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因的表達(dá)，減輕胃黏膜細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到保護(hù)胃黏膜的作用。所以，本研究希望通過研究針刺穴位對慢性萎縮性胃炎大鼠NF．心信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中TLR4、IL．1RI、TAKl、ir,gp、Ir．B、NF．r,B、IL．8、IL．1R、TNFRI及TUNEL的表達(dá)，一方面觀察針刺療法對慢性萎縮性胃炎的治療效果，另一方面探討針刺對NF．r,B信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，從而豐富針刺穴位治療慢性萎縮性胃炎的相關(guān)理論，提高對臨床的指導(dǎo)價值和運用價值，同時也為針刺穴位預(yù)防慢性萎縮性胃炎癌前病變提供新的研究線索。

5、目的通過建立慢性萎縮性胃炎大鼠模型，探討NF．r．B信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中TLR4、IL．1RI、TAKl、ir,gp、Ir．B、NF—r,B、IL-8、IL-IR、TNFRI及TUlqEL在慢性萎縮性胃炎模型大鼠中的表達(dá)及意義，觀察針刺對上述指標(biāo)表達(dá)的影響，探討針刺對NF．r,B轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的影響，為針灸治療慢性萎縮性胃炎提供理論和實驗依據(jù)。方法選用80只體重在180—2009雌雄各半的SD大鼠，用隨機(jī)數(shù)字表法設(shè)立空白對照組25只，CAG造模組55只?？瞻讓φ战M正常喂養(yǎng)。造模組采用如下造模方法進(jìn)行慢性萎縮性胃炎大鼠模型的制備：

6、配置濃度為lg／L的MNNG溶液，避光低溫保存；使用時用蒸餾水稀釋成100倒ml，供大鼠自由飲用，同時配合饑飽失常法(即足量喂食1天，禁食1天，兩者交替進(jìn)行)。造模組大鼠經(jīng)某次隨機(jī)剖殺，經(jīng)胃黏膜光鏡下病理學(xué)檢查確認(rèn)建立成功后，則將造模組剩余大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組和針刺組。本研究模型成功復(fù)制后，模型組為21只大鼠，針刺組為22只(造模過程中大鼠死亡6只，隨機(jī)剖殺6只)，隨即開展實驗。空白組大鼠，正常喂養(yǎng)，不施加干預(yù)措施，直至實驗結(jié)束。模型組大鼠，正常喂養(yǎng)，不施加干預(yù)措施，直至實驗結(jié)束。針刺組大鼠，正常喂養(yǎng)，施加

7、針刺干預(yù)措施，直至實驗結(jié)束。針刺組干預(yù)措施為：30號1寸不銹鋼毫針針刺足三里、中脘、脾俞三個穴位，刺至所需深度，得氣后留針15min，每天治療一次，十天為一個療程，共治療6個療程。治療完畢后，剖殺所有大鼠，進(jìn)行各項觀察指標(biāo)檢測：1．胃黏膜病理觀察；2．胃黏膜損傷指數(shù)；3．ELISA檢測TNF．Ⅱ、TNFRI和IL．6；4．免疫組化觀察本信號通路上的IL．1RI、TAKl、TLR4、IKK、Ir,B、NF．r,B和IL．8細(xì)胞因子；5．胃黏膜細(xì)胞凋亡指數(shù)；6．胃黏膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察。成果1．第12周末隨機(jī)剖殺經(jīng)光鏡下胃

8、黏膜病理觀察證實造模成功后，進(jìn)入治療階段，在治療干預(yù)過程中無大鼠死亡；最終納入研究大鼠共66只，空白組23只，模型組21只，針刺組22只。2．胃黏膜病理觀察：空白組大鼠正常胃粘膜表現(xiàn)；模型組大鼠的胃黏膜改變符合慢性萎縮性胃炎的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)：針刺組大鼠胃黏膜有不同程度的好轉(zhuǎn)。3．模型組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)和血清CRP、TNF．a(chǎn)、TNFRI、IL．