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1、中圖分類號:R383.15編號:20100113承德醫(yī)學院碩士研究生畢業(yè)論文旋毛蟲成蟲cDNA文庫構(gòu)建及特異性基因PCNA的克隆、表達及功能鑒定SpecificgeneofTrichinellaspiralisadultwormcDNAlibraryconstructionandPCNACloning,expressionandfunctionalidentification研究生:李麗娜導師:陳曉寧教授許士奇副教授學科專業(yè):病原生物學所在系部:基礎醫(yī)學部研究起止日期:2011年10月~2012年9月論文提交日期:2013年3月承德醫(yī)學院學位
2、論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下,由本人獨立完成。本學位論文研究所獲的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸承德醫(yī)學院所有。承德醫(yī)學院有權(quán)對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關的論文,第一署名單位為承德醫(yī)學院,試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸承德醫(yī)學院所有。否則,承擔相應的法律責任。研究生簽名:導師簽章:年月日承德醫(yī)學院研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導教師對此進行
3、了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責自負。研究生簽名:導師簽章:年月日旋毛蟲成蟲cDNA文庫構(gòu)建及特異性基因PCNA的克隆、表達及功能鑒定SpecificgeneofTrichinellaspiralisadultwormcDNAlibraryconstructionandPCNACloning,expressionandfunctionalidentification研究生:李麗娜學號:20100113年級:2010級導師:陳曉寧教授許士奇副教授學科專業(yè):病原生物學所在系部:基礎醫(yī)學部研究方向:分子寄生蟲學研究起止日期:2011年10月~20
4、12年9月論文提交日期:2013年3月目錄中文摘要…………………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………………4英文縮寫…………………………………………………………………………7研究論文旋毛蟲成蟲cDNA文庫構(gòu)建及特異性基因PCNA的克隆、表達及功能鑒定前言…………………………………………………………………………8材料與方法…………………………………………………………………10結(jié)果…………………………………………………………………………21附圖…………………………………………………
5、………………………23討論…………………………………………………………………………27結(jié)論…………………………………………………………………………32參考文獻……………………………………………………………………30綜述…………………………………………………………………………33致謝…………………………………………………………………………39個人簡歷…………………………………………………………………………40中文摘要旋毛蟲成蟲cDNA文庫構(gòu)建及特異性基因PCNA的克隆、表達及功能鑒定摘要旋毛蟲病(trichinellosistrichinosi
6、s)的病原體是旋毛形線蟲(Trichinellqspiralis)簡稱旋毛蟲,寄生于豬、野豬、鼠、熊等150種動物和人體內(nèi),成蟲和幼蟲分別寄生于同一宿主的小腸內(nèi)。旋毛蟲病是因為生食或半生食含有旋毛蟲幼蟲囊包的豬肉和其他動物肉類而感染,本病是世界上較常見的人獸共患病。不僅嚴重危害人類健康,而且對養(yǎng)豬業(yè)可造成巨大損失。近年來在我國17個省、市、自治區(qū)發(fā)現(xiàn)有多起人體感染的暴發(fā)流行。河南省為我國旋毛蟲病高發(fā)區(qū)之一,僅鄭州市已發(fā)生7次暴發(fā)流行,發(fā)病400多人。若不及時診斷和治療,患者死亡率可高達3%一30%。因而旋毛蟲成為我國肉食品衛(wèi)生檢驗中的首檢寄生
7、蟲,開展旋毛蟲病的預防和控制工作在我國更具緊迫性和重要性,而預防和控制旋毛蟲病的關鍵在于建立一套快速、簡便、特異性高的檢測手段以及采取各種有效預防措施降低動物感染率。對旋毛蟲病的免疫預防的研究表明,由于旋毛蟲在不同的發(fā)育期蟲體抗原組分存在明顯的差異并且在同一期蟲體抗原結(jié)構(gòu)也極其復雜,在長期寄生生活中,逐漸形成了免疫逃避機制,所以目前采用成份復雜的蟲體抗原往往難以取得理想的免疫預防效果。旋毛蟲抗原具有其特異性,成分極其復雜,并且不能在體外進行培養(yǎng)和繁殖,而且其臨床表現(xiàn)較為復雜,因此給旋毛蟲病免疫診斷及預防帶來困難,故尋找旋毛蟲特異性抗原基因就成
8、為我們工作的重點。而構(gòu)建cDNA文庫,采用免疫學方法釣取cDNA片段,從而分析抗原蛋白的抗原表位,選取最佳抗原,是研究旋毛蟲抗體的有效途徑之一。目的:收集純凈的5日