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《廣西巴馬小型豬apoe的表達、真核載體構(gòu)建及功能驗證》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號S墨13：3UDC碩士學(xué)位論文密級廣西巴馬小型豬卻DE的表達、真核載體構(gòu)建及功能驗證蘇秀珍學(xué)科專業(yè)動塑遑籃直弛皇繁殖指導(dǎo)教師郭亞薟數(shù)援論文答辯日期2Q13生魚月三旦學(xué)位授予日期答辯委員會主席夔塑生硒究雖廣西大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)聲明本人聲明所呈交的論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨立進行研究所取得的研究成果。除已特別加以標注和致謝的地方外，論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，也不包含本人或他人為獲得廣西大學(xué)或其它單位的學(xué)位而使用過的材料。與我一同工作的同事對本論文的研究工作所做的貢獻
2、均已在論文中作了明確說明。本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的學(xué)位論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬廣西大學(xué)。本人授權(quán)廣西大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán)，即：學(xué)校有權(quán)保存并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于：口保密，在年解密后適用授權(quán)。日不保密。(請在以上相應(yīng)方框內(nèi)打“√”)論文作者簽名礪、鷹嗡指導(dǎo)教師簽名：行鄉(xiāng)鳥L作者聯(lián)系電話：?研．『-779瑤紹日期：汐f
3、多罩‘瑪。功目日期LI弓．參．加電子郵箱：砧了2／7伽@吮．∞肌廣西巴馬小型豬和DE的表達、真核載體構(gòu)建及功能驗證摘要阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)是繼心臟病、腫瘤、中風(fēng)之后，成為人類死亡的第四大死因，嚴重危害到老年人身體健康。研究發(fā)現(xiàn)，載脂蛋白E(apolipoproteinE，ApoE)與AD高度相關(guān)。因此，本研究以廣西巴馬小型豬為研究對象，測定了．4poE在不同組織、不同年齡和大腦不同部位的表達模式；構(gòu)建4pDE真核表達載體并對其功能進行驗證，同時進行轉(zhuǎn)ApoE基因小鼠的生
4、產(chǎn)，為后續(xù)構(gòu)建廣西巴馬小型豬AD動物模型的研究奠定基礎(chǔ)。根據(jù)GenBank公布的豬ApoEcDNA序列設(shè)計特異引物，利用RT-PCR(1"leversetranscriptionPCR，RT-PCR)分析廣西巴馬小型豬ApoE在心、脾、肝、腎、胰和腦等組織中的表達情況，并測定了ApoE在不同年齡(10，14，24，>24月齡)豬腦組織中的表達模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)／／poE在腦和胰腺中的表達最高；老年(>24月齡)豬腦組織中ApoE的表達量高于其它年齡；免疫組化的結(jié)果顯示，ApoE在前腦皮質(zhì)的表達量高于海馬組織。將
5、ApoEcDNA序列克隆到pMDl8．T載體，雙酶切并連接構(gòu)建彳pDE真核表達載體pEGFP-C1．ApoE，利用PKl5和PCI2細胞對載體的功能進行了驗證。結(jié)果顯示，在兩種細胞中都檢測到綠色熒光，證明真核表達載體pEGFP．C1．ApoE在PKl5和PCI2細胞中均能正常表達目的蛋白。為了進一步驗證重組質(zhì)粒的功能，將質(zhì)粒注入小鼠睪丸，自然交配獲得57只F1代小鼠，PCR檢測獲得陽性小鼠2只，轉(zhuǎn)基因陽性率為3．5％。關(guān)鍵詞：廣西巴馬小型豬阿爾茨海默病動物模型載脂蛋白ECONSTRUCTIONANDFUNC
6、Tl0NAI，ANAI．YSISOFEIⅨARYOTICEXPI己ESSIONVECTOROFAPOE，ANDTHEANAIYSIS0FEXPRESSIONPROFⅡ正SINGUANGXIBAMAⅣ田m-PIGABSTRACTAlzheimer'sdisease(AD)hasbecamethefourthseriousdiseaseleadingtothehumandeathexceptingforheartdisease，cancer,andapoplexy．Previousstudyindicatedt
7、hattherewerehighlycorrelatedboththeexpressionofapolipoproteinE(ApoE)andtheAD．Therefore，theobjectiveofcurrentstudyistoanalyzetheexpressionprofilesofApoEindifferenttissues，ages，andthedifferentregionsinbraininGuangxiBamamini—pig．Theeukaryoticexpressionvectoro
8、fApoEWasconstructedandthefunctionofrecombinantplasmidwasidentified．Meanwhile，thetransgenicmicewereconductedwiththemethodofinjectiondirectlyinovariesandtestes．Thestudywillmakepreparationfortheconstructionofani
