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《基于大環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十五內(nèi)酯的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文大環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十五內(nèi)酯的研究姓名：潘湘波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：化學(xué)工藝指導(dǎo)教師：劉雄民20040401陽(yáng)人學(xué)碩十論文《火環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十五內(nèi)酯》大環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十五內(nèi)酯的研究摘要環(huán)十五內(nèi)酯屬大環(huán)麝香類香料，廣泛應(yīng)用于香水、香精、化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。目前該產(chǎn)品僅能以化學(xué)合成法生產(chǎn)。本文以∞一羥基十五烷酸為底物，以微生物脂肪酶為催化劑，合成環(huán)十五內(nèi)酯。研究主要內(nèi)容包括四個(gè)方面：(1)合成環(huán)十五內(nèi)酯脂肪酶菌株的篩選；(2)脂肪酶生產(chǎn)條件的優(yōu)化；(3)脂肪酶的分離純化；(4)探討影晌u一羥基十五烷酸關(guān)
2、環(huán)因素。首先，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)，篩選得到了十五株產(chǎn)脂肪酶的菌株，其中有六株所產(chǎn)脂肪酶具有催化合成環(huán)十五內(nèi)酯的能力。進(jìn)而重點(diǎn)對(duì)菌株GXU01與GXU03進(jìn)行脂肪酶生產(chǎn)條件的探索。結(jié)果表明GXU01與GXU03搖瓶發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶酶活力分別達(dá)20．69U／ml與16．89U／mI。二種菌株所產(chǎn)脂肪酶均在pH=7．0，反應(yīng)溫度為40。C時(shí)水解活力最高。其熱穩(wěn)定性為：GXU01脂肪酶在50。C下保溫15分鐘，酶活力損失僅20％：GXU03脂肪酶在50。C下保溫15分鐘，酶活力損失僅30％。然后，用硫酸銨分級(jí)沉淀發(fā)酵上清液，發(fā)現(xiàn)了GXU01脂肪酶活力主要分布在40％～50％的硫酸銨飽和度，而G
3、XU03脂肪酶活力主要分布在40％～60％的硫酸銨飽和度。并用凝膠色譜層析分離純化GXU01脂肪酶得到了二種脂肪酶，分離后的二種脂肪酶可能均有催化合成環(huán)十五內(nèi)酯的能力。最后，用自制曲人學(xué)碩十論文《人環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十五內(nèi)酯》脂肪酶進(jìn)行了環(huán)十五內(nèi)酯合成研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果指出，脂肪酶最宜合成反應(yīng)pH值為6．O，在環(huán)已烷中催化能力比在苯中要高。同時(shí)考察了不同脂肪酶在不同溶劑中催化合成環(huán)十五內(nèi)酯能力，其中假絲酵母屬來(lái)源的脂肪酶在環(huán)已烷中的催化環(huán)化能力比在苯中高。而青霉屬的GXUl4正好相反，在苯中的催化環(huán)化能力為在環(huán)已烷中的3．4倍。結(jié)果給出了在OXU01脂肪酶催化作用下
4、15一羥基十五烷酸轉(zhuǎn)化率高達(dá)88％，具有應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞：∞一羥基十五烷酸；脂肪酶；環(huán)十五內(nèi)酯2曲人學(xué)碩士論文《大環(huán)內(nèi)酯化脂肪酶篩選及其酶法合成環(huán)十fi山酯)STUDYONSCREENlNGOFLACTONlZlNGLlPASEANDSYNTHESlZEOFCYCLOPENTADECANOLIDEABSTRACTCycIoDentadecanoIideisoneofthemacrocyclemusk．whichCOUldbeusedinmanyfieIdsbroadIY．suchasperfume．cosmetic．food，medicaIandetc．．Atpresent．
5、cycIopentadecanoIideCOUldbepreparedwithchemicaIsynthesisonlY．Inthispaper．cycloDentadecanoIidewaspreparedusing15一hydroxypentadecanoicacidasmateriaIandmicrobeIipasesascatalyst．TheresearchesincIuded：ScreeningofstrainsproducingIipaseusedtopreparecycIopentadecanoIide：OptimizationofIipasepreparat
6、ionconditions：PurificationofIipases：StudyofeffectsoncIose-cycIereactionof15一hydroxypentadecanoicacid．FifteenstrainsproducingIipasewereobtainedandsixstrainsoutofthefifteenstrainshavetheIactonizationabiIities．TheIipasePreparationconditionsofCandidasp．GXU01andCandidasp．GXU03werestudiedindetaiI
7、．TheresuItsshowedthattheIipaseactivitiesofCandidasp．GXU01andCandidasp．GXU03reached20．69u／mIand16．89u／mIrespectiveIY．ForthetwoIipases．theIipaseactivitiesweremaximaIat40℃andpH7．0．ForCand／daspGXU01．theIOSSofIipaseactivitywas20％at50℃for15minsandforCandidasp．
