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《基于氨基?；府a(chǎn)生菌米曲霉發(fā)酵條件的優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號(hào):學(xué)校代碼:10128UDC:學(xué)號(hào):20071152碩士學(xué)位論文（類別:全日制碩士研究生題目：氨基?；府a(chǎn)生菌米曲霉發(fā)酵條件的優(yōu)化英文題目：OptimizationofFermentationconditionofAspergillusOryzaeproducingAminoacylase研究生：王霞學(xué)科名稱：化學(xué)工藝指導(dǎo)教師：劉麗華副教授二○一○年六月摘要氨基?；妇哂泄鈱W(xué)異構(gòu)專一性，能夠選擇性地水解N-?；?DL-氨基酸，通過分離即可得到光學(xué)純L-或D-氨基酸。工業(yè)上利用這一特點(diǎn)可以大規(guī)模生產(chǎn)氨基酸。因此，高活力和高立體選擇性的氨
2、基?；傅纳a(chǎn)菌株的選育和產(chǎn)酶條件的優(yōu)化，是高效、低成本制備氨基酸的基礎(chǔ)?，F(xiàn)在用于氨基酸拆分的氨基?；复蠖鄟碜悦浊拱l(fā)酵，但是其產(chǎn)量和質(zhì)量遠(yuǎn)不能滿足工業(yè)生產(chǎn)的需求。為解決這一矛盾，本論文以經(jīng)過離子誘變的米曲霉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過改變它的碳源、氮源、磷酸鹽、以及它們的濃度、裝液量、溫度、轉(zhuǎn)速等各種因素來尋求它的最優(yōu)發(fā)酵條件，以達(dá)到發(fā)酵條件的最優(yōu)化。探求從外界環(huán)境進(jìn)一步提高米曲霉產(chǎn)氨基酰化酶的酶活，為工業(yè)化，規(guī)模化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)通過單因素試驗(yàn)研究了碳源及濃度，氮源及濃度，磷酸鹽及濃度、鎂離子濃度，底物及表面活性劑等培養(yǎng)基添加物對(duì)氨基?；干a(chǎn)
3、的影響，以及溫度、接種量、裝液量和轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件對(duì)產(chǎn)酶的影響。結(jié)果表明發(fā)酵最適碳源為麩皮，最適氮源為有機(jī)復(fù)合氮源（蛋白胨和尿素），最適磷酸鹽為磷酸二氫鈉。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，液態(tài)發(fā)酵的氨基酰化酶不是誘導(dǎo)酶，添加底物對(duì)酶活沒有影響。而添加表面活性劑，對(duì)氨基?；傅幕盍τ幸种谱饔?。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用正交設(shè)計(jì)法對(duì)主要因素進(jìn)行9因素3水平試驗(yàn)，通過試驗(yàn)結(jié)果和方差分析確定優(yōu)化培養(yǎng)基為：麩皮1%，蛋白胨1.25%，尿素0.75%，硫酸鎂0.15%，磷酸二氫鈉0.2%，不添加底物和表面活性劑。優(yōu)化培養(yǎng)條件為：250ml三角瓶中裝入20ml培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速為
4、150r/min，接種量為8%，pH為6.5，不添加玻璃珠，40℃下，培養(yǎng)50h。以此培養(yǎng)基發(fā)酵3批樣品，米曲霉產(chǎn)氨基?；傅钠骄富羁筛哌_(dá)850μmol/g?h。與優(yōu)化前75μmol/g?h相比，酶活提高11倍多。另外，對(duì)誘變前后米曲氨基酰化酶蛋白的提取及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步的探索。由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間比較短，實(shí)驗(yàn)條件有限，蛋白酶提取效果并不好，需要今后繼續(xù)努力研究，以便能得到較純的氨基?；浮ｊP(guān)鍵詞：米曲霉；氨基酰化酶；培養(yǎng)條件；正交試驗(yàn)AbstractAminoacylasewithspecificopticalisomercanselective
5、lyhydrolyzeN-acyl-DL-aminoacids,opticallypureL-orD-aminoacidscanbeobtainedthroughseparation.Thespecificfeaturecanbeutilizedtoproducelarge-scaleproductionofaminoacidinindustrial.Therefore,aminoacylaseproductionstrainsselectionandoptimizationoffermentationconditionswithhighe
6、nergyandhighstereoselectivityishighlyefficient,low-costbasisforpreparationofaminoacids.NowaminoacylasethatsplitaminoacidsismostlyproductedbyAspergillusoryzaefermentation,buttheyieldandqualitycannotmeettheneedsofindustrialproduction.Tosolvethisproblem,theionmutationstrainso
7、fAspergillusoryzaewasusedastheexperimentalobjectinthisthesis,whichwerefermentbychangingcarbonsource,nitrogensource,phosphate,liquidvolume,temperature,rotatespeedandotherfactorstofindtheoptimalfermentationconditions.SeektofurtherimproveAspergillusoryzaeaminoacylaseenzymeact
8、ivityfromtheexternalenvironment,asindustrializationandmassproductionbasis.Bysinglefactort
