脂肪酶產(chǎn)生菌發(fā)酵條件優(yōu)化

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1、綿陽師范學(xué)院本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2發(fā)酵條件的優(yōu)化專業(yè)生物技術(shù)院部生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院學(xué)號(hào)0811420218姓名杜長(zhǎng)蔓指導(dǎo)教師李俊剛答辯時(shí)間2012年5月論文工作時(shí)間：2011年7月至2012年5月脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2發(fā)酵條件的優(yōu)化學(xué)生：杜長(zhǎng)蔓指導(dǎo)老師：李俊剛摘要：本文對(duì)綿陽師范學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室篩選和鑒定的產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌M-6-2的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)和產(chǎn)酶動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究；通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，對(duì)脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2搖床發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，得出較佳的產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成配方為：1.5%淀粉+0.5%酵母膏為碳源、4.5%

2、豆餅粉+1.5%硝酸銨為最佳的氮源、0.05%磷酸氫二鈉和0.15%硫酸鎂；最優(yōu)的發(fā)酵條件為：初始pH7.5，接種量1.5%，裝液量20ml/250ml，發(fā)酵溫度35℃，在轉(zhuǎn)速180r/min下，培養(yǎng)16h，經(jīng)過優(yōu)化后發(fā)酵液脂肪酶酶活力最高可達(dá)到15.60U/ml,較優(yōu)化前提高了49.57%。脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道的產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌相比產(chǎn)酶活力高。對(duì)該菌株發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化后，為生產(chǎn)性試驗(yàn)打下了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2；脂肪酶；發(fā)酵條件；優(yōu)化；正交試驗(yàn)；LipasetoproducebacteriaM-6-2Optimizationoffe

3、rmentationconditionsUndergraduate:DuChangmanSupervisor:LiJunGangAbstract:Inthispaper,LaboratoryscreeningandidentificationoflipaseproductionbybacteriaintheM-6-2growthkineticsandenzymeproductionkineticswerestudied;throughsinglefactorexperimentsandorthogonaltest,thelipasetoproducebacte

4、riaM-6-2shakerfermentationlipasemediumcompositionandcultureconditionswereoptimizedtocometoabetterenzymeproductionmediumcompositionformula:1.5%starchand0.5%yeastextractascarbonsource,4.5%ofthesoybeanpowderand1.5%ammoniumnitrateforthebestsourceofnitrogen,0.05%disodiumhydrogenphosphate

5、and0.15%magnesiumsulfate.Optimalfermentationconditionswere:initialpH7.5,1.5%oftheinoculumsize,liquidvolume20ml/250ml,fermentationtemperature35°C,inthespeed180r/minnext,cultured16hAfteroptimizationofthefermentationbrothlipaseactivitycanreach49.57%to15.60U/ml,comparedtobeforeoptimizat

6、ion.LipasetoproducebacteriaM-6-2andreportedinChinaintheproductionoflipasebacteriacomparedtothehighactivityofenzymeproduction.Ofthestrainfermentationconditionsoptimized,laidthefoundationfortheproductionoftest.Keywords:LipaseproducingstrainM-6-2；lipase；fermentationconditions；optimizat

7、ion；orthogonaltest目錄1前言11.1脂肪酶的概況11.2國(guó)內(nèi)外脂肪酶的研究概況21.3本研究的目的及意義22實(shí)驗(yàn)材料和器具32.1實(shí)驗(yàn)菌種32.2主要實(shí)驗(yàn)儀器32.3實(shí)驗(yàn)試劑32.4培養(yǎng)基43實(shí)驗(yàn)流程44.實(shí)驗(yàn)方法44.1生長(zhǎng)曲線的測(cè)定44.2產(chǎn)酶曲線的測(cè)定54.3脂肪酶產(chǎn)生菌M-6-2菌體生長(zhǎng)的最佳條件的確定54.3.1PH對(duì)M-6-2菌體生長(zhǎng)的影響54.3.2溫度對(duì)M-6-2菌體生長(zhǎng)的影響54.3.3裝液量對(duì)M-6-2菌體生長(zhǎng)的影響64.3.4搖床轉(zhuǎn)速對(duì)M-6-2菌體生長(zhǎng)的影響64.4脂肪酶培養(yǎng)基的優(yōu)化74.4.1脂肪酶培養(yǎng)基單因素條件的

8、優(yōu)化74.4.2產(chǎn)脂肪酶培養(yǎng)基的正交試