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《tirc7在急性移植物抗宿主病中的作用研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：R392.4單位代碼：10312密級：公開學(xué)號：20122085博士學(xué)位論文題目：TIRC7在急性移植物抗宿主病中的作用研究研究生：朱鋒指導(dǎo)教師：徐開林教授學(xué)科專業(yè)：血液病學(xué)學(xué)院名稱：南京醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院完成時(shí)間：二O一五年三月南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本
2、人承擔(dān)。作者簽名：日期：年月日導(dǎo)師簽名：日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于（請務(wù)必在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“√”）：1、保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。2、不保密□。作者簽名：日期：年月日導(dǎo)師簽名：日期：年月日目錄中文摘要………………………………………………
3、…………………………1英文摘要…………………………………………………………………………3前言………………………………………………………………………………6第一部分TIRC7在急性GVHD中作用的臨床研究…………………………111.材料……………………………………………………………………112.方法……………………………………………………………………203.結(jié)果……………………………………………………………………304.討論……………………………………………………………………405.小結(jié)……………………………………………………………
4、………43第二部分TIRC7在急性GVHD中作用的體內(nèi)外研究………………………441.材料……………………………………………………………………442.方法……………………………………………………………………493.結(jié)果……………………………………………………………………684.討論……………………………………………………………………1045.小結(jié)……………………………………………………………………108結(jié)論………………………………………………………………………………109參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………
5、…110文獻(xiàn)綜述………………………………………………………………………121附錄…………………………………………………………………………143攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文、獲得課題及參加學(xué)術(shù)會議等………………146致謝………………………………………………………………………………148南京醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文TIRC7在急性移植物抗宿主病中的作用研究摘要目的：探討TIRC7與急性GVHD的相關(guān)性及TIRC7分子在急性GVHD發(fā)生發(fā)展中的作用和可能的機(jī)制。方法：(1)分別獲取急性GVHD患者治療前后的外周血血漿及單個(gè)核細(xì)胞等樣本，通過酶聯(lián)
6、免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q-PCR)等方法，檢測TIRC7及CTLA-4在急性GVHD患者治療前后的指標(biāo)變化，明確TIRC7及CTLA-4與急性GVHD的相關(guān)性。(2)應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及蛋白印跡(Westernblot)等檢測手段，選擇急性GVHD患者淋巴細(xì)胞作為靶細(xì)胞，采用質(zhì)粒構(gòu)建及電穿孔等方法，觀察TIRC7對CTLA-4的調(diào)控、T細(xì)胞活化及其對細(xì)胞因子分泌等的影響。(3)以SPF級C57BL/6鼠為供鼠，BALB/c鼠為受鼠，參照本實(shí)驗(yàn)室成熟的建模方案建立小鼠急性GVHD模型。腹腔注射TIRC7及C
7、TLA-4單克隆抗體，并觀察在小鼠急性GVHD模型中，TIRC7及CTLA-4對T細(xì)胞活化及急性GVHD的影響。結(jié)果：(1)我們應(yīng)用RT-PCR及westernblot方法檢測到急性GVHD患者TIRC7及CTLA-4的表達(dá)。ELISA及q-PCR方法發(fā)現(xiàn)急性GVHD患者TIRC7表達(dá)較正常人升高，在治療后28d，其表達(dá)均有不同程度下降，且其表達(dá)水平與急性GVHD嚴(yán)重程度呈正比；急性GVHD患者CTLA-4表達(dá)下降，在治療后28d，其表達(dá)均有不同程度回升，且其表達(dá)水平與急性GVHD嚴(yán)重程度呈反比。(2)下調(diào)TIRC7表達(dá)后，CTL
8、A-4的表達(dá)下降，STAT3熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒的熒光素酶活性顯著下降，STAT3磷酸化程度降低；上調(diào)CTLA-4表達(dá)，TIRC7表達(dá)變化不明顯，STAT3熒光素酶活性顯著升高，STAT3磷酸化程度升高。上調(diào)CTLA-4表達(dá)可顯著抑制T細(xì)胞活化，I
