氫氣通過(guò)上調(diào)ho-1的表達(dá)減輕膿毒癥小鼠肺損傷

氫氣通過(guò)上調(diào)ho-1的表達(dá)減輕膿毒癥小鼠肺損傷

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1、分類號(hào):R614學(xué)校代碼:10062密級(jí):學(xué)號(hào):2012602775碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目:氫氣通過(guò)上調(diào)HO-1的表達(dá)減輕膿毒癥小鼠肺損傷TITLEHydrogengasalleviatesthelunginjurycausedbyseveresepsisinmicebyincreasingtheexpressionofhemeoxygenase-1一級(jí)學(xué)科:臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科:麻醉學(xué)論文作者:李媛指導(dǎo)教師:于泳浩教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二〇一五年五月分類號(hào):R614學(xué)校代碼:10062密級(jí)

2、:學(xué)號(hào):2012602775學(xué)位類別:科學(xué)學(xué)位?專業(yè)學(xué)位?學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目:氫氣通過(guò)上調(diào)HO-1的表達(dá)減輕膿毒癥小鼠肺損傷TITLEHydrogengasalleviatesthelunginjurycausedbyseveresepsisinmicebyincreasingtheexpressionofhemeoxygenase-1一級(jí)學(xué)科:臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科:麻醉學(xué)論文作者:李媛指導(dǎo)教師:于泳浩教授導(dǎo)師組成員:謝克亮天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二〇一五年五月學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明

3、本人鄭重聲明:所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外,論文中不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名:李媛日期:2015年6月2日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國(guó)家有關(guān)

4、部門或機(jī)構(gòu)送交論文,并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)。保密,在年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密√。(請(qǐng)?jiān)谙鄬?duì)應(yīng)的方框內(nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名:李媛日期:2015年6月2日導(dǎo)師簽名:于泳浩日期:2015年6月2日天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的:膿毒癥是由感染所致的全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS),是臨床常見(jiàn)的危重癥。急性肺損傷(ALI)是其嚴(yán)重并發(fā)癥,死亡率較高。氫氣(H2)無(wú)色、無(wú)嗅、無(wú)味,是目前自然界中最小的分子,近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等特征,對(duì)多種疾病具有治療作用。血紅素氧合酶1(HO-1),也被稱為熱休克蛋白

5、32(hsp32),是一種抗氧化酶,廣泛分布于組織細(xì)胞中。本課題組前期研究表明,含氫培養(yǎng)液通過(guò)調(diào)節(jié)HO-1的表達(dá),發(fā)揮對(duì)巨噬細(xì)胞過(guò)度炎癥反應(yīng)的作用。而其在氫氣減輕膿毒癥小鼠ALI中的作用,尚不十分清楚。本研究擬探討氫氣吸入對(duì)膿毒癥小鼠肺組織HO-1表達(dá)的影響,為明確其治療機(jī)制提供參考。方法:成年雄性ICR小鼠,體重20~25g,6周齡,隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組(sham),假手術(shù)+H2吸入組(sham+H2),重度膿毒癥組(severesepsis),重度膿毒癥+H2吸入組(severesepsis+H2),重度膿毒癥+ZnPP

6、IX組(severesepsis+ZnPPIX),重度膿毒癥+H2吸入+ZnPPIX組(severesepsis+H2+ZnPPIX)。采用盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)的方法建立重度膿毒癥小鼠模型。H2吸入方案為在假手術(shù)或CLP術(shù)后1h和6h分別給予2%H2吸入1h,余下三組吸入氣體為空氣。severesepsis+ZnPPIX組及severesepsis+H2+ZnPPIX組在CLP術(shù)前1h給予ZnPPIX腹腔注射,劑量為40mg/kg。第一部分:取120只小鼠,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將其分為上述6組(n=20)。觀察各組小鼠不同時(shí)間

7、點(diǎn)(1,2,3,5,7天)的生存率。另取108只小鼠隨機(jī)分為上述6組(n=18)。于CLP術(shù)后6h、12h及24h分別處死小鼠,測(cè)定各個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組小鼠血清及肺組織勻漿中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、高遷移率族蛋白B1(HMGB1)及白細(xì)胞介素10(IL-10)的水平。觀察各組小鼠術(shù)后24h肺組織病理學(xué)改變,肺濕/干(W/D)重比及氧合指數(shù)(PaO2/FiO2)的變化。第二部分:另取108只小鼠隨機(jī)分為6組(n=18)。于CLP術(shù)后6h、12h及24h分別處死小鼠,采用Westernblot免疫印跡法觀察各個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組小鼠肺組織

8、中HO-1、HMGB1以及Nrf2蛋白的表達(dá);采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)法測(cè)定小鼠肺組織HO-lmRNA、HMGB1mRNA以及Nrf2mRNA的表達(dá);采用膽紅素生成法測(cè)定小鼠肺組織中HO-1的活性。最后,用免疫熒光的方法觀察CLPI天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文術(shù)

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