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《全氟化碳對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)：R541.4密級(jí)：不保密UDC：616-02學(xué)校代碼：11065碩士學(xué)位論文全氟化碳對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的影響陳登勇指導(dǎo)教師龐繼恩教授學(xué)科專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)（心血管?。┱撐拇疝q日期2015年05月30日全氟化碳對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的影響摘要目的建立體外缺氧/復(fù)氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）損傷模型，通過(guò)觀察全氟化碳(perfluocarbon，PFC)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs）缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用及其調(diào)控機(jī)理，深入理解和闡釋PFC的
2、生物學(xué)效應(yīng)及作用機(jī)制，為其在心肌缺血再灌注損傷中的臨床應(yīng)用提供更為客觀和充分的理論依據(jù)。方法采用化學(xué)方法(連二亞硫酸鈉溶液法)制備缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷模型。實(shí)驗(yàn)分組為：對(duì)照組、10%PFC組、H/R組、PFC+H/R處理組（5%、10%、20%）(以上均為培養(yǎng)液體積比)。CCK-8法測(cè)定細(xì)胞活力；比色法依次檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶（Lactatedehydrogenase，LDH）外漏量，胞內(nèi)丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、一氧化氮（Nitricoxide，NO）的含量及超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）的活性；
3、蛋白質(zhì)印跡法（WesternBlot，WB）分析細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比，10%PFC組中各待檢指標(biāo)差異均不明顯（P＞0.05）。相比與模型組，10%、20%PFC處理組能提高細(xì)胞活力A、降低胞內(nèi)NO含量及減少Caspase-3的表達(dá)（P＜0.05）；5%、10%、20%PFC處理組能顯著降低LDH外漏量、胞內(nèi)MDA含量及提高SOD的活性（P＜0.01）。結(jié)論（1）缺氧/復(fù)氧損傷可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激的發(fā)生，并進(jìn)而出現(xiàn)細(xì)胞壞死和凋亡；（2）PFC對(duì)HUVECs缺氧/復(fù)氧損傷具有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng),增強(qiáng)細(xì)
4、胞抗氧化和凋亡能力有關(guān)。關(guān)鍵詞全氟化碳；缺氧/復(fù)氧；內(nèi)皮細(xì)胞；氧化應(yīng)激；凋亡Effectsofperfluorocarbononhypoxia/reoxygenationinjuryofhumanumbilicalveinendothelialcellsAbstractObjectiveEstablishinghypoxic/reoxygenation(H/R)injurymodel,andtheninvestigatingtheprotectiveeffectandtheregulationmechanismofPerfluocarbon(PFC)onHumanu
5、mbilicalveinendothelialcells(HUVECs)inthemodelofhypoxia/reoxygenationinjury.ToprovideamoreobjectiveandadequatetheoreticalbasisforthePFC’sclinicalapplicationinthemyocardialischemia-reperfusioninjury,throughtheobserveofPFC’sbiologicaleffectsandmechanism.MethodsH/Rmodelswereestablishedbys
6、odiumhydrosulfite,andtheexperimentwasdividedinto6groups:controlgroup,PFCgroupwithPFCata10%volume,H/Rgroup,PFC+H/Rtreatmentgroup(thevolumeratiosofculturemediumwere5%,10%,20%).ThecellviabilitywasdetectedbyCCK-8method.Thecontentsofmalondialdehyde(MDA),nitricoxide(NO)andtheactivitiesofsupe
7、roxidedismutase(SOD)incells,aswellasthelactatedehydrogenase(LDH)intheculturemedium,weremeasuredbybiochemistryapproaches.Theexpressionofapoptosis-relatedproteinCaspase-3wasanalyzedbyWesternblotting(WB).ResultsComparedwiththecontrolgroup,everydetectedindexesof10%PFCgrouphadnostatistica
