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《農(nóng)桿菌介導茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、SHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY碩士學位論文MASTER’STHESIS論文題目：農(nóng)桿菌介導茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究學科專業(yè)：園藝專業(yè)作者姓名：張國剛指導老師：劉楊日期:2015年1月上海交通大學碩士學位論文農(nóng)桿菌介導茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究碩士研究生：張國剛學號：1121509075導師：劉楊專業(yè)：園藝(專業(yè)學位)所在單位：農(nóng)業(yè)與生物學院答辯日期：2015年1月授予學位單位：上海交通大學DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeof
2、MasterRESEARCHONEFFICIENTTRANSFORMATIONSYSTEMOFEGGPLANTMEDIATEDBYAGROBACTERIUMAuthor:ZHANGGuogangStudentID:1121509075Supervisor:ViceProf.LIUYangSpecialty:HorticultureDepartment:CollegeofAgricultureandBiologyDateofDefence：Jan.2015Drgree-Conferring-Institution:Shangh
3、aiJiaoTongUniversity上海交通大學碩士學位論文農(nóng)桿菌介導茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究摘要茄子(solanummelongnaL.)，茄科茄屬一年生草本植物，是我國一種重要經(jīng)濟類蔬菜。茄子產(chǎn)量和品質(zhì)容易受到蟲害、病害、不良環(huán)境等影響。因此，培育具有抗蟲、抗病、抗逆的茄子新品種具有重要意義。常規(guī)的育種方式是品種改良的重要手段，同時也存在選育年限長、遠源雜交不親和及種質(zhì)資源匱乏等問題。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育茄子新品種是未來主要的研究方向。本研究以茄子子葉為外植體材料，探討植物激素NAA、ZT、6-BA的不同濃度與組合對白撮茄
4、子葉外植體分化的影響、比較不同基因型外植體分化能力、研究硝酸銀在外植體出芽分化中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白撮茄愈傷組織分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT3.0mg/L，出愈率為97%；誘導芽分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT4.0mg/L+6-BA1.5mg/L+AgNO38.0mg/L，出芽率為82%；不同基因型外植體分化能力不同；AgNO3對外植體芽分化具有促進作用；1/2MS培養(yǎng)基生根效果較好，生根率可達80%。建立了穩(wěn)定的茄子再生體系。本研究還對農(nóng)桿菌介導的茄子遺傳轉(zhuǎn)化進行了初步探索，篩選抑制非
5、轉(zhuǎn)化外植體的潮霉素濃度、抑制農(nóng)桿菌生長的特美汀濃度，研究不同預培養(yǎng)時間、菌液濃度、侵染時間對外植體轉(zhuǎn)化率的影響。結(jié)果表明：10mg/L的潮霉素可對外植體抗性芽進行有效篩選；150mg/L特美汀可以有效抑制農(nóng)桿菌污染；預培養(yǎng)2天的外植體分化效果好，轉(zhuǎn)化率為71%；菌液濃度OD600值為0.5時適宜侵染，轉(zhuǎn)化率為80%；I上海交通大學碩士學位論文菌液侵染時間為10min時，轉(zhuǎn)化率為76%。GUS染色結(jié)果和分子檢測初步證明，外源基因已經(jīng)整合到‘白撮茄’基因組中，獲得了8株轉(zhuǎn)化植株。關(guān)鍵詞：茄子，子葉，再生體系，農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化
6、，分子檢測II上海交通大學碩士學位論文ResearchonEfficientTransformationSystemofEggplantMediatedbyAgrobacterium.ABSTRACTEggplant(solanummelongnaL.),annualherbplants,animportanteconomicvegetablesinChina.However,theyieldandqualityofeggplantisvulnerabletodiseases,insectsorotheradverseenv
7、ironment.Therefore,breedingneweggplantvarietiesresistancetoinsects,diseaseshasgreatsignificance.Regularbreedingmethodsandpracticeofeggplantplayanimportantroleinimprovingthenewspecies,atthesametimetherearesomeproblems,likelongbreedingperiod,farsourcehybridincompatib
8、ilityandlackofgermplasmresources.Itisvitalforustoutilizetransgenictechnologytocultivateneweggplant.Usingeggplantcotyledonsasexplants,differentcon
