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《宮內(nèi)炎癥致腦白質(zhì)損傷新生大鼠的腦組織epo及epor mrna的表達及rhepo的治療作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：R722密級：UDC：610學校代碼：11065博士專業(yè)學位論文宮內(nèi)炎癥致腦白質(zhì)損傷新生大鼠的腦組織EPO及EPORmRNA的表達及rhEPO的治療作用研究劉燕指導教師姜紅教授學位類別臨床醫(yī)學博士專業(yè)領(lǐng)域兒科學答辯日期2015.5.28答辯委員會主席孫若鵬教授宮內(nèi)炎癥致腦白質(zhì)損傷新生大鼠的腦組織EPO及EPORmRNA的表達及rhEPO的治療作用研究摘要目的孕鼠腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）制作宮內(nèi)炎癥致新生鼠腦白質(zhì)病變動物模型。對腦白質(zhì)病變新生鼠腹腔注射
2、重組促紅細胞生成素（recombinanthumanerythropoietin,rhEPO）rhEPO，通過內(nèi)源性EPO/EPORmRNA及CD68、GFAP、MBP的檢測和神經(jīng)行為學評分，探討rhEPO對新生大鼠腦白質(zhì)病變近期和遠期的神經(jīng)保護作用，為臨床應(yīng)用rhEPO治療早產(chǎn)兒腦白質(zhì)病變提供依據(jù)。方法30只Wistar孕鼠（孕齡15天）隨機數(shù)字法分為實驗組和對照組。實驗組腹腔注射LPS300μg/kg制作早產(chǎn)兒腦白質(zhì)病變動物模型，對照組Wistar大鼠腹腔注射生理鹽水(Normalsalin
3、e,NS)1mL/kg作為對照。新生大鼠出生后，實驗組與對照組各選30只新生鼠4%多聚甲醛灌注取腦，左側(cè)腦組織進行HE染色，明確腦白質(zhì)損傷情況；右側(cè)腦組織用于實時熒光定量RT-PCR法檢測胼胝體促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）及EPORmRNA水平。實驗組隨機數(shù)字法取60只新生鼠隨機分為LPS+rhEPO組（n=30）和LPS+NS組(n=30)，分別于出生后即刻一次性腹腔注射rhEPO（5000IU/kg）和生理鹽水（1mL/kg）。對照組隨機數(shù)字法取60只新生鼠隨機分為
4、NS+rhEPO組(n=30)和NS+NS組(n=30)，分別于出生后即刻腹腔注射rhEPO（5000IU/kg）和生理鹽水（1mL/kg）。各處理組分別于用藥后后第3天、第7天隨機取10只新生鼠，進行腦組織HE染色,免疫熒光法進行CD68、GFAP及MBP的檢測。出生后2周各處理組隨機選取10只大鼠進行神經(jīng)行為學評分。結(jié)果1.孕15天Wistar大鼠腹腔注射LPS后所產(chǎn)新生鼠HE染色腦室周圍腦白質(zhì)染色淡染，結(jié)構(gòu)稀疏，呈網(wǎng)狀改變；對照組腦白質(zhì)組織結(jié)構(gòu)正常。2.腹腔注射LPS大鼠所產(chǎn)新生鼠胼胝體E
5、POmRNA及EPORmRNA的表達明顯高于腹腔注射NS組（P＜0.01）。3.生后3天HE染色顯示LPS+rhEPO組新生大鼠腦室周圍腦白質(zhì)染色淡染，結(jié)構(gòu)稀疏，呈網(wǎng)狀改變；LPS+NS組新生大鼠腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)稀疏，較LPS+rhEPO組加重。生后7天，HE染色顯示LPS+rhEPO組腦室周圍白質(zhì)結(jié)構(gòu)稀疏，染色較清晰；LPS+NS組腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)稀疏，呈網(wǎng)狀改變，染色不清晰。NS+rhEPO組及NS+NS組生后3天及7天腦白質(zhì)組織結(jié)構(gòu)正常，染色清晰。4.生后3天，LPS+rhEPO組、NS+rhEPO組
6、、NS+NS組CD68表達均較LPS+NS組顯著下降（F=7.456，P＜0.01），生后7d，LPS+rhEPO組、NS+rhEPO組、NS+NS組GFAP表達明顯低于LPS+NS組（F=5.121，P＜0.01），生后3天(F=2.628)、7天(F=1.425)各組間MBP表達水平差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。5.LPS+rhEPO組生后2周神經(jīng)行為學評分（曠場試驗、懸吊試驗、斜坡試驗、拒俘試驗）與LPS+NS組、NS+rhEPO組及NS+NS組均無明顯差別（F值分別為2.09、0.
7、60、0.11、0.37）。結(jié)論1.宮內(nèi)炎癥致腦白質(zhì)損傷新生大鼠內(nèi)源性EPOmRNA及EPORmRNA的表達明顯增加。2.rhEPO可抑制腦白質(zhì)損傷新生鼠的小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞活化。3.rhEPO腹腔注射對腦白質(zhì)損傷新生大鼠的遠期神經(jīng)行為改善作用尚不明確。博士研究生劉燕（兒科學）指導教師姜紅教授關(guān)鍵詞：促紅細胞生成素；腦白質(zhì)；新生，大鼠EPOandEPORmRNAExpressioninNeonatalRatswithWhiteMatterDamageassociatedwithIntrau
8、terineInflammationandtheTherapeuticEffectofrhEPOAbstractObjective:Toestablishanimalmodelsofintrauterineinflammationbyintraperitonealinjectionoflipopolysaccharide.Toinvestigatetherencentandlong-termneuroprotectiveeffectofrhEPOonneonatalratswithwhitema
