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1、夂考SOOCHOWUNIVERSITY碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目研究生姓名指導(dǎo)教師姓名專業(yè)名稱研究方向論文提交日期蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名:B期:學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇
2、州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所(含萬方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文,可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在__年_月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文El論文作者簽名:I龜日期:2^:泰<導(dǎo)師簽名:曰期:,
3、則EGF/FOXM1在卵巢癌轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制研究中文摘要EGF/FOXM1在卵巢癌轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制研究中文摘要研究目的:卵巢癌的發(fā)生伴隨著各種基因通路的相互作用,研究這些基因的功能有助于癌癥的基因靶向治療。EGF、FOXM1基因均提示可能參與卵巢癌的發(fā)生與惡性進(jìn)展,本課題通過臨床標(biāo)本及體外實(shí)驗(yàn)研究EGF/FOXM1在卵巢癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制。方法:采用免疫組化SP法對臨床上收集的卵巢癌組織標(biāo)本和正常的卵巢組織標(biāo)本檢測FOXM1的表達(dá)情況;利用Westernblot技術(shù)分析人卵巢癌細(xì)胞HO8910PM、OV
4、CAR3、SKOV3等細(xì)胞中FOXM1的表達(dá)情況;不同濃度EGF作用于SKOV3細(xì)胞后用Westernblot法檢測FOXM1的表達(dá)情況;cck8法檢測不同濃度EGF對SKOV3細(xì)胞的增值影響;Transwell小室法檢測不同濃度EGF對SKOV3細(xì)胞的遷移、侵襲影響;設(shè)計(jì)合成三種靶向人FOXM1基因的siRNA表達(dá)序列,應(yīng)用脂質(zhì)體TMLipofectamine2000共轉(zhuǎn)染至SKOV3細(xì)胞作用24h后提取總蛋白,應(yīng)用Westernblot技術(shù)分析轉(zhuǎn)染后SKOV3細(xì)胞FOXM1蛋白表達(dá)量,選取敲除FOXM1效能最佳的siRNA序列
5、;cck8法檢測敲除FOXM1后添加EGF與否對SKOV3細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果:1、卵巢癌組織中FOXM1表達(dá)顯著高于正常卵巢組織,F(xiàn)OXM1在卵巢癌OVCAR3細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞中均有明顯表達(dá),其中SKOV3細(xì)胞表達(dá)量高于其他兩種細(xì)胞;2、SKOV3細(xì)胞經(jīng)不同濃度【濃度(ng/ml)=0、5、10、25、50、100】EGF處理后行Westernblot法檢測提示EGF濃度為10ng/ml時(shí)FOXM1的表達(dá)量最高(P<0.05);3、SKOV3細(xì)胞經(jīng)不同濃度【濃度(ng/ml)=0、5、10、25、50、10
6、0】EGF處理后行cck8檢測提示10ng/ml濃度的細(xì)胞吸光度最高(P<0.01);濃度為10ng/ml的EGF作用于SKOV3細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,不加EGF作為對照,Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)24h后電鏡拍照提示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移率大于對照組(P=0.002),侵襲實(shí)驗(yàn)24h后電鏡拍照提示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移率大于對照組(P=0.015);4、三種靶向FOXM1的siRNA感染SKOV3細(xì)胞后Westernblot證實(shí)siRNA-FOXM1-801的沉默效果最好;cck8法檢測siRNA-FOXM1-801沉默F(xiàn)OXM1后能顯著抑制SK
7、OV3細(xì)胞I中文摘要EGF/FOXM1在卵巢癌轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制研究增殖(P=0.005);cck8法檢測FOXM1–siRNA-801沉默F(xiàn)OXM1后吸光度提示對照組(未加EGF)和實(shí)驗(yàn)組(EGF=10ng/ml)統(tǒng)計(jì)結(jié)果無明顯差異(P=0.882)。結(jié)論:FOXM1基因在卵巢癌組織中過表達(dá),三株卵巢癌細(xì)胞株中均有FOXM1的過度表達(dá),以SKOV3細(xì)胞的表達(dá)量最高;EGF濃度為10ng/ml時(shí)促進(jìn)SKOV3細(xì)胞中FOXM1的表達(dá)作用最明顯以及增強(qiáng)SKOV3細(xì)胞的增殖、侵襲能力,敲除FOXM1基因后EGF失去對細(xì)胞增殖的影響,
8、從而證明EGF可能通過EGF/FOXM1通路對卵巢癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移等有間接調(diào)控作用。關(guān)鍵詞:卵巢癌;EGF;FOXM1;SKOV3細(xì)胞;細(xì)胞增殖;細(xì)胞侵襲作者:王璐指導(dǎo)老師:陳友國IIEGF/FOXM1在卵巢癌轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制研究英文摘要T