腺病毒介導的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對大鼠脊髓急性損傷后神經(jīng)細胞保護的研究

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1、論文作指導教師簽名:』§壘乒卜一論文評閱人1:評閱人2:評閱人3:評閱人4.評閱人5:蒸選良圭任醫(yī)垣浙江醫(yī)院丟瘟堡圭堡醫(yī)垣浙江太鱟醫(yī)堂疊啦屬篚三醫(yī)陡塑壅圭堡醫(yī)垣浙江太堂醫(yī)堂韭附屬笈三醫(yī)院答辯委員會主席:睦其旺圭堡醫(yī)垣浙江太堂醫(yī)堂壑隘屬筮三醫(yī)院委員1:潘盎至圭絲醫(yī)垣浙江太堂醫(yī)堂部隘屬篚三醫(yī)院委員2:鹽毯副主魚醫(yī)噓浙江太堂醫(yī)堂部隘屬筮三醫(yī)院委員。丕佳元圭堡醫(yī)蛭杭州直紅土寶金醫(yī)院委員4:韭建縫副主絲醫(yī)疸浙江太堂醫(yī)堂酆隘屬疊逸去醫(yī)院委員5:浙江大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師

2、指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得浙江太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名:、>j,簽字日期:勿、7年j。為/日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解浙江太堂有權保留并向國家有關部門或機構送交本論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權逝江太堂可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)

3、庫進行檢索和傳播,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)簽字日期:劾l≥年r月f日簽字日期:f現(xiàn)翕7;年97日浙江大學碩士學位論文致謝致謝本研究和畢業(yè)論文是在我的導師徐侃老師的親切關懷和悉心指導下完成的。在三年的學>--j期間,徐侃老師以他嚴肅的科學態(tài)度,嚴謹?shù)闹螌W精神,精益求精的工作作風,深深的感染和激勵著我。他不僅是我學業(yè)上的導師,更在生活和思想上給予我無微不至的關懷的照顧,在此謹向徐侃老師致以最誠摯的謝意和崇高的敬意。我還要感謝在論文完成過

4、程中幫助過我的老師和同學們,尤其是師兄趙騰飛,他在學習和工作上給了我大量的指導和幫助,我表示衷心感謝!感謝鄭強老師、李萬里老師、王建衛(wèi)老師、辛曾峰老師、錢勝君、阮峰、申成春、李浩、唐路平在工作及學習中的給予我的幫助與支持。感謝尊敬的答辯委員會專家及論文審核專家!特別感謝我的父母,感謝他們多年以來對我學業(yè)的支持與鼓勵。最后,感謝培養(yǎng)我三年的浙江大學醫(yī)學部以及浙二醫(yī)院,在此即將畢業(yè)之際,祝母校和浙二醫(yī)院蒸蒸日上,再創(chuàng)輝煌!浙汀大學碩十學位論文中文摘要腺病毒介導的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對大鼠脊髓急性損傷后神經(jīng)

5、細胞保護的研究浙江大學醫(yī)學院外科學(骨科)2010級碩士研究生李琰導師徐侃中文摘要背景:脊髓損傷分為原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷,原發(fā)性損傷是受傷瞬間對脊髓造成的不可逆損傷,很少有脊髓損傷是對脊髓的直接物理性橫斷,大多是挫傷、壓迫或者牽拉造成的損傷,所以仍有部分脊髓是完好的,這就給恢復神經(jīng)功能提供了可能。既往的研究表明,脊髓損傷后局部神經(jīng)營養(yǎng)因子不足是脊髓損傷后修復面臨的主要問題之一。在這些研究中,腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)的作用尤為矚目。目的:本研究將以脊髓損傷sD大鼠為模型,通過導入腺病毒介導的腦

6、源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Adv。BDNF),上調大鼠BDNF基因的表達,并最終達到修復神經(jīng)細胞、改善大鼠運動功能的目的。方法:將實驗大鼠分為G1.4組,其中G1.3組手術創(chuàng)建大鼠急性脊髓壓迫損傷模型,G4組為假手術組。脊髓損傷模型建立后,于G1組大鼠損傷節(jié)段頭端5mm處注射Adv.BDNF,G2組大鼠同樣位置注射Adv.eGFP,G3組大鼠注射PBS做為對照。于術后1、3、7、14、28天取各組脊髓標本,通過檢測BDNFmRNA及蛋白評價BDNF表達情況,標本行染色鏡檢評價組織損傷程度。同時通過行BBB評

7、分評價大鼠運動功能恢復情況。II浙江大學碩士學位論文中文摘要結果:術后3天取G2組脊髓切片鏡檢,見GFP散布整個頭端脊髓,提示腺病毒基因逆行調控滿意。PCR及westernblot結果提示在對N至]t(G3)中,BDNF的表達在傷后24h就顯著增加,但是3天后即減少,而且,這種BDNF的低表達狀態(tài)持續(xù)時間長達1星期。在實驗組1(G1)中,因損傷導致的BDNF表達下調較對照組(G3)要小很多,并且在第2星期和第4星期有明顯的恢復表現(xiàn)。在術后1星期時,G1組的BDNF表達明顯高于G2組,而且無論是G1還

8、是G2組均表現(xiàn)出比對照組(G3)更高的BDNF表達。G1組的標本在光鏡下觀察到的空腔較對照組(G3)要小,G2組在術后4周時觀察到的空腔最小,但是G1組的正常脊髓實質較G2組更多。BBB評分的結果表明,所有實驗動物的BBB評分均表現(xiàn)出了逐步好轉的跡象,在術后第7,14,28天時,G1組的BBB評分較G2組和對照組(G3)更高。結論:1、使用腺病毒介導的BDNF可以在大鼠的SCI模型中上調BDNF表達。2、在大鼠SCI中,上調BDNF表達有助于大鼠的神經(jīng)組織修復及運動功

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